猪败血型链球菌K-B法药敏试验

（铁岭县现代农业发展中心，辽宁 铁岭 112000）

1 试验材料

1.1 微生物培养设备

鲜血营养琼脂培养基、恒温箱、细菌接种环、无菌棉签及灭菌柜等设备。

1.2 药敏纸片

购于上海金穗生物科技有限公司和自制药敏纸片。

1.3 试验菌种

从发病猪场典型病猪分离到的致病性链球菌。

表1 猪败血型链球菌药敏试验结果

2 试验过程

2.1 猪败血型链球菌的菌种分离

在湿热的夏季，猪场出现发病猪，其症状符合败血型链球菌病的特征。猪死亡后通过剖检发现疑似败血型猪链球菌病[2]。取病死猪心血和脾脏病料，实验室无菌操作接种于鲜血琼脂平板培养基，37℃培养24 h，取出观察。菌落为淡黄色圆形，有溶血现象，染色，显微镜下为5～10个连结成链、革兰氏染色呈阳性的球状杆菌。取菌落置于生理盐水混悬液中，分别给仔猪口服和肌肉注射，均出现感染。从仔猪心血和脾脏中分离出链球菌，保留菌种，作为药敏试验野毒菌种。

2.2 药敏纸片的制作

除购买的药敏纸片外，还自制部分抗菌药物纸片，取有效浓度的抗菌药物制剂1 mL，充分浸湿直径6 mm的圆形灭菌滤纸片100张，37℃风干备用。

2.3 药敏试验的操作

依据纸片法药敏试验操作规程，进行以下试验[3]。

取鲜血琼脂培养基，在灭菌柜内使用灭菌棉签涂布接种链球菌生理盐水菌液，保证培养基表面被涂抹均匀形成菌膜。

从每类抗菌药物中选取1～3种代表性药物纸片进行试验，均匀粘贴药敏纸片，每片间隔10 mm以上，置于恒温箱内，37℃培养18～24 h。

3 试验结果

本地区连续2年的药敏试验结果：

体外琼脂扩散药敏试验结果表明，阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶钠及头孢噻呋钠最为敏感。在试验中，以阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋钠的抑菌圈最为明亮且边缘整齐，说明抑菌或杀菌效果显著。

4 讨论

从本地分离到的野毒致病性链球菌，对阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶钠和头孢噻呋钠最为敏感，说明上述药物适于在发病时使用。考虑到猪败血型链球菌病死亡速度较快，在用药治疗时应选择作用迅速、敏感性高的药物。实践表明，阿莫西林和复合磺胺有较好的治疗效果。