梅毒螺旋体感染的检测现状分析

汪梦 许娜 赵铁

梅毒螺旋体（Treponema pallidum，Tp）是密螺旋体属苍白亚种，是一种小而纤细的螺旋状微生物。Tp是多阶段性传播疾病——梅毒的病原体。梅毒目前仍然是重要的公共卫生问题，影响全球近600万人。自2003变至今，我国梅毒发病率呈显著增长趋势，年均增长达13.37%。梅毒感染后7～10周或硬下疳出现6～8周后，梅毒螺旋体即可经淋巴进入全身血液循环，几乎侵犯全身各个器官——引起心血管、神经、生殖等多个系统严重并发症，甚至促进HIV的感染和传播，还可由母体经胎盘垂直传播给胎儿，严重影响出生人口质量。

梅毒的诊断及临床判愈目前主要依靠血清学诊断。而在梅毒早期没有免疫反应;梅毒晚期 （TP往往迁徙到免疫相对薄弱的区域，眼，脊髓等）;兔感染实验作为金标准，因为时间成本及价格，在临床应用并不现实;梅毒不同阶段各重组蛋白检测结果并不一样;PCR用于早期梅毒检测。所以，及时、准确、可靠的诊断及临床判愈方法对于梅毒的管理来说尤为重要。近年来，以微小RNA（microRNA，miRNA，miRs）为基础的PCR法因其独到的优势（客观、准确、耗时短，易于自动化和数字化等），在各种病原体诊断及肿瘤诊断中得到了一定的应用。miRNA是一类内源性的非编码小分子RNA，广泛参与调节多种生命体活动。早先的研究发现miRNA可在血清或者血浆中稳定存在，不受反复冻融或者PH变化的影响。更重要的是，临床应用中，通过抽血检测其中物质的变化就能指示患者的健康状况是一种微创的方法，因此检测血中miRNA的含量可作为一种较好的筛查或者辅助诊断的方式。

为明确梅毒患者体内miRNA的变化规律，并探讨其在梅毒血管炎症发病过程真的作用和机制，我们对文献进行前期分析，通过比对分析二期梅毒患者和正常人miRNA芯片，发现差异表达的miRNA中，潜在的诊断靶标包括hsa-mir-21-5p， hsa-miR-19b-3p， hsa-miR-16-5p和hsa-miR-142-3p。尽管这些miRNA在梅毒血清中低于正常人，但目前没有数据确切表明哪一种miRNA或者多重miRNA的诊断价值最好;且以上miRNA为基础的PCR等特异性方法尚不能评价梅毒的治疗和愈后。而临床以非Tp为基础的血清学试验（RPR、TRUST等）主要原理是基于反应素。它们的滴度变化通常与疾病的活跃程度有着密切的关系，因此可作为梅毒的判愈实验。但是由于反应素在其它疾病如SLE、疟疾、单核细胞增多症等也会存在，所以假阳性率较高。因此，有必要阐明miRNA与梅毒病期之间的关系，最好是能结合传统TPPA、基于Tp膜脂蛋白的ELISA试验和RPR/TRUST试验的优点，进一步提高对梅毒的诊断及判愈价值。

应用miRbase和MIRTARBASE数据库分析hsa-miR-21-5p， hsa-miR-19b-3p， miR-16-5p，和miR-142-3p序列保守性和所在基因组特征;应用TargetScan、PicTar及miRanda预测他们的靶基因，并对其进行功能富集分析和信号转导通路富集分析。以上miRNA可能通过调控多个信号通路，多阶段参与梅毒的病例损伤。目前发现，由于单个的miRNA的诊断效率还不是很高，所以我们将多个miRNA通过二元Logistic回归方程进行组合，探讨组合后的模型对梅毒的诊断效率。

深入研究Tp诱导的血清源性miRNA在梅毒病期中的差异表达。从大样本临床病例分析中总结各miRNA表达与疾病发展的关系，收集各期梅毒患者血清中、皮损组织，RT-PCR检测上述组织中miRNA的表达水平，阐明miRNA在梅毒病患中的表达规律及与现有诊断试剂表达之间的关系，揭示miRNA表达水平与临床分期与病程、临床表现、生化指标等梅毒诊断指标之间的关系。深入了解miRNA在梅毒病程中的作用及机制，建立基于这些Tp感染相关miRNA的PCR法，评价筛选出的Tp感染相关miRNA在梅毒诊断中的应用价值，寻找可替代传统Tp诊断的新型诊断靶标，为miRNA作为梅毒感染病程和预后判断的生物标志物提供理论依据具有非常重要的意义。

参考文献：

[1]Amsalu A， Ferede G， Assegu D.High seroprevalence of syphilis infection among pregnant women in Yiregalem hospital southern Ethiopia.BMC Infect Dis. 2018，18（1）：109.

[2]胡跃华，李镒冲，刘世炜，么鸿雁，于石成，冯国双，邵华，刘炜炜，周脉耕.中国20年间淋球菌、性传播衣原体、梅毒螺旋体的发病情況及其疾病负担.疾病监测.2015，30（11）：904-910.

[3]覃雪钰，李力.诊断梅毒螺旋体感染的方法分析与研究[J].世界最新医学信息文摘，2019，19（84）：139+141.

[4]刘文. 梅毒螺旋体感染依赖性抗原属性鉴定及在梅毒诊断中的应用评价[D].南华大学，2018.

[5]徐福刚，于翠华.ELISA法在诊断梅毒螺旋体感染中的临床检验作用分析[J].世界最新医学信息文摘，2017，17（32）：101+163.

[6]何基照.梅毒螺旋体人类医学实验学检测进展[J].临床合理用药杂志，2016，9（20）：176-178.