脂蛋白相关磷脂酶A2与缺血性脑卒中的相关性研究

陈 婷， 李 欢， 朱 雄， 陈 海， 张 猛， 张新平， 俞书义， 陈少金

缺血性脑卒中占卒中的60%～80%，发病率、致残率、病死率均高，及时诊断、准确评估病情、有效治疗是延缓病情、改善预后的关键，而能够预测预后，对合理分配医疗资源、改善预后具有重要意义[1]。

近年来研究虽提出了核糖核酸、蛋白质等多种预测缺血性脑卒中的标志物，但在临床应用中未显示出快速性、高特异性、准确性及相应的成本效益，临床推广应用受限。探寻一种检测更便捷、预测更准确的生物标志物势在必行。相关研究证实：缺血性脑卒中病理过程中，动脉粥样硬化发挥关键作用[2]。而脂蛋白相关磷脂酶A2(Lipoprorein-assoeiated phosPhohPaseA2，Lp-PLA2)作为新型炎症标志物，可促使形成动脉粥样硬化斑块。资料显示，Lp-PLA2可判断缺血性脑卒中的发生[3]。Lp-PLA2检测便捷，一致性好，但目前国内尚未普及Lp-PLA2检测，其在缺血性脑卒中的发生、神经功能缺损程度判断、预后预测等方面的应用尚未完善。

本研究旨在探讨Lp-PLA2与缺血性脑卒中患者神经功能缺损及预后的关系，以期为其临床防治提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年4月-2019年12月我院收治的缺血性脑卒中患者94例作为研究组。纳入标准：(1)符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》[4]中诊断标准，经CT和(或)MRI确诊；(2)年龄>20岁；(3)发病2 w内入院。排除标准：(1)出血性卒中；(2)血液、免疫系统疾病者；(3)全身感染、恶性肿瘤、肝肾功能障碍、心脏疾病患者；(4)精神疾病、严重意识障碍者；(5)合并周围血管性疾病者；(6)近6 m有外科手术、创伤史患者；(7)近2 m服用降脂药物、维生素B12等可能影响Lp-PLA2水平的药物；(8)临床资料不完整者。另选取同期体检健康者92例作为对照组，其中，男63例，女29例；年龄39～90岁，平均(64.87±11.96)岁。所有受试者均知情同意，本次研究相关的伦理问题已经我院医学伦理委员会审批通过。

1.2 方 法

1.2.1 基线资料收集 收集所有受试者的临床资料：性别、年龄、体质量指数(Body Mass Index，BMI)、高血压、高脂血症、糖尿病、吸烟史、饮酒史等。

1.2.2 血清Lp-PLA2水平检测 采集受试者空腹静脉血2 ml(缺血性脑卒中患者入院24 h内采集，健康者体检当天采集)，常规离心(4000 rpm，10 min)，取上层血清-80 ℃保存备测。12 h内采用NRM-200化学发光分析仪(南京诺尔曼生物技术有限公司)，通过荧光素增强免疫化学发光法(试剂供自南京诺尔曼生物技术有限公司，批号：19091601，医疗器械注册证/产品技术要求编号：苏械注准20142400670)测定血清Lp-PLA2水平，操作严格遵循试剂盒说明完成。正常参考值：<200 ng/ml。

1.2.3 治疗及评估指标 依据《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》，结合患者具体病情，给予改善脑血液循环(他汀药物)、抗凝、降纤、调脂、抗血小板聚集、控制血压血糖等治疗。根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表评分(National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS)[5]对患者神经功能缺损程度进行评估，其中，轻度(NIHSS<4分)、中度(NIHSS 4～15分)、重度(NIHSS>15分)。根据出院时改良Rankin量表评分(mddified Rankin Scale，mRS)[6]对患者预后进行评估，其中，预后良好(mRS评分≤2分)、预后不良(mRS评分>2分)。

1.3 观察指标 (1)比较研究组与对照组患者基线资料及血清Lp-PLA2水平;(2)比较不同神经功能缺损程度患者基线资料及血清Lp-PLA2水平，分析Lp-PLA2与患者神经功能缺损的相关性;(3)比较不同预后患者基线资料及血清Lp-PLA2水平，分析Lp-PLA2对患者预后的预测价值。

2 结 果

2.1 两组基线资料及血清Lp-PLA2水平比较 研究组与对照组基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组血清Lp-PLA2水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

2.2 不同神经功能缺损程度患者基线资料及血清Lp-PLA2水平比较 不同神经功能缺损程度患者基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。重度组血清Lp-PLA2水平高于中度组、轻度组，中度组血清Lp-PLA2水平高于轻度组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

2.3 Lp-PLA2与患者神经功能缺损的相关性 Pearson相关性分析显示，Lp-PLA2与患者患者神经功能缺损呈正相关(r=0.779，P=0.000)(见图1)。

2.4 不同预后患者基线资料及血清Lp-PLA2水平比较 不同预后患者基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。预后不良组血清Lp-PLA2水平高于预后良好组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表3)。

2.5 Lp-PLA2对患者短期预后影响的Logistic回归分析 以缺血性脑卒中患者“短期预后”为因变量(赋值：0=预后良好，1=预后不良)，以“Lp-PLA2”为自变量，进行Logistic回归分析。Logistic回归分析显示，Lp-PLA2是患者短期预后不良的独立危险因素(P<0.05)(见表4)。

2.6 Lp-PLA2对患者短期预后的预测价值 ROC曲线分析显示，Lp-PLA2预测患者短期预后的AUC为0.802，最佳临界值为370.57，灵敏度为72%，特异度为81.2%，有一定预测准确性(见表5、图2)。

表1 两组基线资料及血清Lp-PLA2水平比较

注：M表示中位数；IQR表示四分位数间距

表2 不同神经功能缺损程度患者基线资料及血清Lp-PLA2水平比较

与轻度组比较*P<0.05；与中度组比较#P<0.05

表3 不同预后患者基线资料及血清Lp-PLA2水平比较

注：M表示中位数；IQR表示四分位数间距

表4 多因素Logistic回归分析结果

表5 Lp-PLA2对患者短期预后的预测价值

图1 Lp-PLA2与患者神经功能缺损的相关性

图2 Lp-PLA2预测患者短期预后的ROC曲线

3 讨 论

动脉粥样硬化是缺血性脑卒中首要致死、致残原因。以往国内外指南建议以传统危险因素为基础构建模型进行心血管疾病长短期风险的预测。但实际应用存在明显不足，如个体具有相同危险因素，但心血管病事件的发生风险具有差异，部分无危险因素者仍出现心血管病事件。近年来，生物标志物被作为重要补充手段应用于缺血性脑卒中预测与评估。且研究证实：炎症是动脉粥样硬化病理生理发生、发展的一项重要机制[7]。与白介素、C-反应蛋白不同，Lp-PLA2作为炎症标志物被指出具有血管特异性[8]。且资料显示，Lp-PLA2是心脑血管疾病的独立危险因子[9]。为了全面探索Lp-PLA2与缺血性脑卒中的关系，使临床更好地理解并合理应用Lp-PLA2，同时为临床防治提供生物标志物依据，本研究分析了Lp-PLA2与缺血性脑卒中神经功能缺损及预后的关系。

本研究结果显示：研究组血清Lp-PLA2水平高于对照组(P<0.05)，提示Lp-PLA2参与缺血性脑卒中病理发生过程，有助于辅助临床诊断。分析认为：Lp-PLA2是淋巴细胞、巨噬细胞分泌产生的活性磷脂酶，可水解循环中氧化型低密度脂蛋白，生成炎性介质(游离氧化脂肪酸、溶血卵磷脂)，进而刺激细胞因子、粘附分子生成，促单核细胞→巨噬细胞→泡沫细胞的转化，而泡沫细胞凋亡后可生成斑块，并释放蛋白酶、炎性因子，降解胶原基质、平滑肌细胞，导致斑块破裂，形成血栓，造成缺血性脑卒中[10,11]。故监测Lp-PLA2有利于预测缺血性脑卒中的发生。临床研究表明：Lp-PLA2水平越高，卒中患者神经功能缺损越严重[12]。本研究结果显示：神经功能缺损重度组患者血清Lp-PLA2水平高于中度组、轻度组，且中度组血清Lp-PLA2水平高于轻度组(P<0.05)；Lp-PLA2与患者神经功能缺损呈正相关(P<0.05)。提示Lp-PLA2与神经功能缺损相关，这对提高病情评估准确性具有重要意义。国内外研究表明：Lp-PLA2与卒中梗死灶体积正相关[13,14]。这可能是Lp-PLA2与神经功能缺损相关的间接机制，但还有待进一步证实。

本研究结果显示：预后不良组患者血清Lp-PLA2水平高于预后良好组(P<0.05)；Logistic回归分析显示，Lp-PLA2是缺血性脑卒中患者短期预后不良的独立危险因素(B=0.009，95%CI=1.005～1.013)；ROC曲线分析显示，Lp-PLA2预测缺血性脑卒中患者短期预后的AUC为0.802，最佳临界值为370.57，灵敏度为72%、特异度为81.2%。提示Lp-PLA2对缺血性脑卒中患者短期预后具有一定预测价值。考虑与Lp-PLA2自身促炎活性、刺激生成脂类促炎物质、参与动脉粥样硬化过程等[15,16]有关。陆敏智等[17]研究表明：高龄是缺血性卒中近期预后不良的危险因素(95%CI=1.024～1.099)。黄兴圣等[18]研究发现：高血压、高龄可影响缺血性卒中患者短期转归。但本研究不同预后组年龄、高血压对比无统计学差异，与上述研究的差异考虑与患者个体差异、样本量、病例选取范围等有关。此外，Lp-PLA2临床检测便捷快速、成本相对低，且可重复性好，有助于临床动态监测与评估，故推广应用可行性强。

综上所述，Lp-PLA2与缺血性脑卒中的发生、发展密切相关，是评估患者神经功能缺损程度的重要指标，对患者的短期预后具有一定预测价值，临床可加强监测。本研究不足之处在于样本量有限、单中心研究，可能使结果普遍性受影响，同时缺乏对长期预后的观察，故日后将进一步开展大样本、多中心、长期随访的研究予以验证。