SD 大鼠自发性回肠黏液性腺癌1 例的病理学观察

英 永, 夏玉洁, 汤连升, 贾婵媛, 张海静, 胡建廷

(1. 山东省药学科学院, 山东省化学药物重点实验室, 济南 250101;2. 青岛海华生物医药技术有限公司, 青岛266000)

SD 大鼠是致癌试验、药物非临床安全性评价及科学研究中常用的实验动物。了解SD 大鼠组织脏器自发性病变背景数据，尤其是自发性的肿瘤性病变，对于确保研究质量至关重要[1]。但目前国内大鼠自发性肿瘤背景数据十分缺乏，严重影响致癌试验的评估能力。因此，建立和完善自发性肿瘤性病变数据库迫在眉睫。对于药物安全性评价而言，大鼠小肠自发性肿瘤病变极少[2-3]，国内还未见相关报道[4-7]，且根据中国食品药品监督管理局(CFDA) 相关指导原则，毒性病理学研究只是选取部分肠段组织进行组织病理学检查，并未对整段肠道进行常规组织病理学检查，可能导致许多肿瘤被忽视或漏诊。本文阐述本实验室开展的26 周SD 大鼠灌胃重复给药毒性试验中空白对照组雄性大鼠出现1 例回肠黏液性腺癌，为SD大鼠药物非临床安全性评价和致癌试验评价研究中自发性肿瘤病变数据整理提供依据。

1 患病动物概况及剖检

雄性SD 大鼠，34~35 周龄，来源于26 周重复给药毒性试验空白对照组。麻醉、放血处死后，摘取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、淋巴结、脑、垂体、肾上腺、甲状腺、胰腺、大肠、小肠、胸骨、股骨、睾丸、附睾、前列腺、精囊、骨骼肌、眼、哈氏腺及皮肤乳腺等组织，检查所摘取组织的部位、颜色、形状和大小有无异常。

2 病理学检查

2.1 肉眼形态学观察

小肠的回肠浆膜层可见3 处黄白色、水螅样的结节，凸出回肠壁，其中两处相隔距离较近(图1A)，另一处较远，且与大肠的直肠系膜组织相粘连。3 个结节大小分别为1.4 cm×1.3 cm、0.7 cm ×0.5 cm、0.4 cm ×0.3 cm。切开结节，可见切面呈鱼肉样(图1B)，且结节中心质地较软，呈凝胶状，肠腔内容物比较黏稠。其中2 个结节明显凸进肠腔，导致肠腔变狭窄。其他受检组织/脏器的颜色、形状和大小均未见异常。

2.2 组织病理学检查

对所取组织用体积分数10%的中性甲醛溶液固定，常规脱水、石蜡包埋、5µm 切片、HE 染色用于组织学检查。同时为了进一步深入研究，对回肠结节进行Masson 三色胶原染色及阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色(pH2.5)。

图1 大鼠回肠肉眼形态学观察Figure 1 Gross morphological observation of rat ileum

HE 染色显示，回肠黏膜层内可见许多大小不一、形状不规则腺体，结构异型性明显，局部浸润黏膜下层、肌层及浆膜层(图2A、2B)。增生的腺体主要以立方至柱状上皮细胞组成，上皮细胞形态结构与杯状细胞相似，所围成的腺腔大小不一，局部腺上皮细胞扁平或上皮细胞缺失，仅见纤维结缔组织，有丝分裂象少见。腺腔内充满大量黏液样物质，并混杂大量的细胞碎片，局部腺腔内出现钙化。间质伴有少量淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润。AB-PAS 染色显示增生的腺上皮细胞质及腺腔内容物呈阳性，与黏膜层杯状细胞染色相似(图2C)，提示这些上皮细胞可以产生黏液样蛋白。Masson 染色间质结缔组织呈现蓝色(图2D)。肺脏及精囊等组织结构正常，未见组织病理学变化(图2E、图F)。综合病变性质、特点及结构异型性等，回肠浆膜层增生的组织诊断为黏液性腺癌。

3 讨论

一般情况下，啮齿类实验动物自发性的肠道肿瘤是上皮性来源的腺瘤、腺癌[8]，非上皮性来源的脂肪瘤、脂肪肉瘤、纤维瘤和纤维肉瘤等也见诸报道[9]。许多化学物质可引起啮齿类动物大肠和小肠肿瘤，其中包括来自天然产物的化学物质如苏铁素(偶氮甲烷和二甲肼)、硝基类化合物、芦荟提取物、灭菌丹、克菌丹、杂环胺类和硫酸葡聚糖钠等[10-16]。

Konishi 报道[10]肠腺癌可以分为4 种类型：①肿瘤从黏膜层突进肠腔；②肿瘤侵入到黏膜层，导致肠壁水平增厚；③肿瘤侵入到黏膜层、黏膜下层及肌层，黏膜表面产生溃疡，但未穿透浆膜层；④肿瘤穿透肌层，在浆膜层形成结节。根据肿瘤侵入位置及形态学特征，本文报道的腺癌应该归于第4 类。尽管未见Chandra 等[17]所报道的黏液性腺癌可以转移到肠系膜淋巴结、肺脏及精囊腺等脏器，但Nagayo[18]认为如果侵入到浆膜层，即使细胞异型性小，肿瘤也可能是恶性的。在本例病变中局部腺腔内出现钙化，可能是糖蛋白作为离子交换介质的结果[19]，这在人类肠黏液性腺癌常常见到。同时黏液性腺癌要区分于黏液囊肿和印戒细胞癌等。黏液囊肿是一种非肿瘤性病变，在人体中多见，其发生原因是堵塞引起黏蛋白大量积聚，从而导致囊肿的形成[20]；当肠腔内容物显著增加时，肠壁及上皮层变薄。印戒细胞癌又称黏液细胞癌，是杯状细胞内含有大量黏液的癌细胞。由于细胞中充满大量的黏液，把细胞核挤向一侧，产生类似“戒指样”外观。印戒细胞癌可侵入到黏膜下层、肌层及浆膜层，但癌细胞无腺腔形成，且细胞之间缺乏结合性。

图2 大鼠部分脏器病理组织学观察Figure 2 Histopathological observation of some organs in rats

本文主要报道药物非临床安全性评价研究中出现的1 例雄性SD 大鼠自发性回肠黏液样腺癌，阐释肉眼形态学和组织病理学特征，为肠道黏液性腺癌诊断提供病理形态学参考，进一步丰富了本实验室SD 大鼠药物非临床安全性评价研究中自发性病变背景数据，同时也丰富了国内SD 大鼠自发性肿瘤病变数据，为致癌试验的合理评价提供基础。