变形虫对盐生杜氏藻生长的控制研究

唐淑萍，祁世英，杜建军

(内蒙古兰太实业股份有限公司，内蒙古 阿拉善 750333)

盐湖生物是大盐湖产业的重要组成部分，盐生杜氏藻(简称盐藻)在盐湖生物中占有重要地位。近几十年来，国内外工业化生产的盐藻生物技术产业发展速度之快、产品之多在微藻产业领域异军突起，令世人注目。盐藻大规模工业化生产蕴藏着巨大的经济潜力，开发盐藻资源不仅有利于开发新型营养源、缓解能源危机，而且有助于促进传统农业向现代化农业的转化。内蒙古自治区荒漠、盐碱地区(湖泊)众多，如能在大力发展盐湖生物产业中因地制宜地有效利用自然及废弃资源发展盐藻产业，并开展进一步深加工，如有效成分蛋白质、多种天然类胡萝卜素、盐藻多糖、维生素、氨基酸、色素、不饱和脂肪酸等的提取和应用，其前景是广阔的。但在大规模养殖中，常常伴有变形虫的出现，大变形虫(Amoeba proteus)变形虫，真核生物，又音译为“阿米巴”。属于肉足亚门裸变亚纲变形目。裸露，常为单核(有些种类多核)，有线粒体，无鞭毛期，核分裂为核内有丝分裂，常为无性生殖。细胞膜纤薄，由于原生质层的流动，使身体表面生出无定形的指状、叶状或针状的突起，称为“伪足”，身体即借此而移动。身体的形状轮廓也会随伪足的伸缩而形成变化。伪足间可自由包围融合，借此包裹食物进行消化。主要生活在清水池塘，或在水流缓慢藻类较多的浅水中进行吞噬藻细胞。文章探讨了变形虫对盐生杜氏藻大规模养殖生长的影响。

1 材料和方法

1.1 材料

藻种，内蒙古微藻良种培育中心；培养液，来自卤水(25 °Be′)与淡水配制的培养液；培养条件，智能光照，气候培养箱培养，温度26 ℃，光照,二级(5 680 lx)。

培养液组成见表1。

表1 培养液组成Tab.1 Composition of culture medium

1.2 方法

1.2.1 变形虫对盐藻细胞密度的影响

实验设6组,每组均为3个平行样。统一用250 mL锥形瓶,每瓶培养藻液150 mL，接种藻液密度43万个/mL，盐度12°Be′，变形虫平均密度3.0个/mL。实验期每天早、午摇瓶两次,隔2 d观察计数,藻液密度及变形虫密度从培养第3 d开始计数,培养周期12 d。实验结果见表2。

表2 变形虫对盐藻细胞密度的影响数据分析Tab.2 Data analysis of the effect of amoeba on cell density of Dunaliella Salina 万个·mL-1

1.2.2 变形虫在不同盐度对盐藻密度的影响

藻种,藻液中藻种密度32.5万个/mL，变形虫的数量25个/mL;培养液,来自卤水(25 °Be′)与淡水配制的不同盐度的培养液；培养条件，露天养殖，实验时间7 d。实验结果见表3、表4。

表3 变形虫在不同盐度对盐藻个数的影响Tab.3 The effect of amoeba on the number of Dunaliella Salinain different salinity 万个·mL-1

表4 变形虫在不同盐度中存活的个数情况Tab.4 The number of amoeba surviving in different salinity 万个·mL-1

1.2.3 变形虫对盐藻在不同培养模式下生长的影响

培养液：23#、18#均为1 500 m2养殖池，藻液均来自44#养殖池，变形虫个数25个/mL;19#、24#均为1 500 m2养殖池，藻液均来自38#养殖池，变形虫个数30个/mL。

培养方式： 18#、23#为半连续培养，19#、24#为连续培养。

培养条件：露天养殖、培养时间7 d。

实验结果见表5、图1。

表5 变形虫对盐藻在不同培养方式下影响Tab.5 Effect of amoeba on Dunalliella Salina in different culture ways 个·mL-1

图1 实验结果示意图Fig.1 Schematic diagram of test results

2 结果

在大规模盐藻养殖过程中，随着室外温度的增高变形虫生长速度较快，大量吞噬着盐藻的细胞，使盐藻密度急剧下降，由43.0万个/mL减少到11.4万个/mL。影响了盐藻的养殖。

通过调整藻液盐度，将养殖盐度提高5°Be′，致使变形虫生存环境骤变、破碎，盐藻密度增加。变形虫由原来的45个/mL减少到6个/mL。

变形虫对盐藻生长过程中，连续培养较半连续培养变形虫个数明显减少。连续培养与半连续培养对比见图2。

图2 连续培养与半连续培养的对比图Fig.2 Comparison of continuous culture and semi continuous culture

3 讨论

目前，国内各有关单细胞藻类培养的企业，对敌害生物的杀灭治理方面，尚无有效的方法和措施，虽然个别采用半封闭式通气培养方法，但仍然不能彻底解决敌害生物的污染和危害，也没有做过相关课题研究。

在生物养殖行业，应用此方法在盐藻养殖中对变形虫进行控制，取得一定效果，在持续高温养殖过程使变形虫数量减少86.7%，确保盐藻正常生长。