下肢静脉曲张MMP－2及TIMP－2水平的表达及价值

郑毅

【摘 要】 目的：分析下肢静脉曲张基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及基质金属蛋白酶抑制物-2（TIMP-2）水平的表达及价值。方法：选30名下肢静脉曲张患者的静脉组织（观察组）以及30名正常人下肢静脉组织（对照组），用相同方法检测并比较MMP-2及TIMP-2表达水平。结果：光学显微镜下两组MMP-2均可以检测到，但是观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;TIMP-2均可表达，但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：下肢静脉曲张患者与MMP-2和TIMP-2的表达异常有关。

【关键词】 基质金属蛋白酶-2;基质金属蛋白酶抑制物-2;表达特征和意义

Expression and value of MMP-2 and TIMP-2 in varicose veins of lower extremities

Zheng Yi

Department of Clinical Laboratory， First People's Hospital of Jining City， Jining， Shandong 272000

[Abstract] Objective：To analyze the expression and value of MMP-2 and TIMP-2 in varicose veins of lower extremities. Methods： Thirty patients with varicose veins of the lower extremity （observation group） and 30 normal human lower extremity vein tissues （control group） were used to detect and compare the expression levels of MMP-2 and TIMP-2. Results： Matrix metalloproteinase-2 was detected in both groups under light microscope， but the observation group was higher than the control group， the difference was statisticallysignificant（P<0.05）. Matrix metalloproteinase inhibitor-2 could be expressed， but the difference was not statistically significant （P>0.05）. Conclusion： Patients with lower extremity varices are associated with abnormal expression of matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase inhibitor-2.

[Key words]Matrix metalloproteinase-2; Matrix metalloproteinase inhibitor-2; Expression characteristics and significance

下肢靜脉血液的回流需要靠下肢肌肉的收缩和静脉瓣膜的引导。静脉曲张是由于患者下肢静脉瓣膜无法完整封闭以及引导动力的减弱，使得血液堆积在患者下肢。静脉曲张患者开始时症状较为轻微，检查后只能看到皮肤表面微微凸起的浅蓝色血管，当症状加重时，患者腿部会出现瘙痒、水肿、酸痛感[1]。并且外观上也会发生明显的改变，例如，皮肤外观呈现蜘蛛网状、凸起的血管呈现蚯蚓状，症状加重时皮肤会出现溃烂。当患者下肢的静脉发生破裂时，可能引起患者下肢血管出现静脉血栓，严重者引起慢性肾衰竭，所以下肢静脉曲张近几年来受到了来自国内外学者的关注，众多研究表明，导致下肢静脉曲张的原因与患者自身体内的MMP-2和TIMP-2表达异常有关[2]。本文作者主要探讨下肢静脉曲张MMP-2及TIMP-2水平的表达及价值，并取得了不错的效果，结果研讨如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

研究对象为30名正常人（对照组）、30名下肢静脉曲张患者（观察组）。观察组：有男性患者13名，女性患者17名，患者的平均年龄为（36.0±1.9）岁，对照组：有男性患者14名，女性患者16名，患者的平均年龄为（35.0±1.8）岁。排除标准：1）急性传染病患者;2）病历记录不完整患者;3）不配合患者;4）血压紊乱患者。

1.2 方法

将选取的两组样本浸于10%的甲醛溶液中，浸泡1d后脱水，用石蜡进行包埋切片。每组切片数不少于2张，每章厚度大约在2μm左右。用免疫组织化学法对每组的两张样本切片进行染色。用染色的阳性片作为阳性对照，阴性对照用PBS缓冲液即可。

1.3 观察指标及评定标准

本文主要的观察指标包括，两组样本中MMP-2及TIMP-2表达强度和阳性细胞表达率。评价标准和方法为[3-4]，1）两组样本中MMP-2及TIMP-2的表达强度：根据光学显微镜下细胞染色深浅来打分，不同的颜色代表不用的分数，没有颜色记为0分，淡黄色记为1分，棕黄色记为2分，棕褐色记为3分。根据观察到的实际颜色进行打分。2）阳性细胞率[5]：以阳性细胞占上皮细胞的百分率来表示，没有阳性细胞记为0分，10%的阳性细胞率记为1分，11%～50%的阳性细胞率记为2分，51%的阳性细胞率记为3分，采用双录入的方法，如果两个人记录的差异超过10%以上，则需要重新记录。

1.4 统计学处理

所有数据准确无误的用SPSS 20.0统计学软件进行处理。（±s）表示计量资料，以t检验;%表示计数资料，以χ2检验，P<0.05为差异显著有统计学意义。

2 结果

2.1 两组样本中MMP-2表达强度和阳性细胞率比较

经观察后，观察组患者的MMP-2表达强度高于对照组患者，指标对比差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 两组样本中TIMP-2的表达强度和阳性细胞率比较

经观察后，两组样本中TIMP-2的表达强度和阳性细胞率对比差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

3 讨论

静脉曲张是一种常见病，双下肢为好发部位。患者下肢静脉曲张病变的部位，主要出现在静脉壁的中层[6]。最开始时，静脉压力的增大会导致肌肉组织增厚，末期时，增厚的组织会出现萎缩由组织纤维所替代，导致静脉周围组织由于无法得到充足的营养供给而出现营养不良和纤维细胞的大量增生[7]。此外，组织的水肿会加重纤维组织的增生，使得静脉血管因大量蛋白质的产生而出现阻滞现象，最终导致组织的缺氧和坏死[8]。

基质金属蛋白酶家族是一个大家族，在其合成中需要金属钙离子和金属锌离子协助，其功能主要由疏水信号肽序列、前肽区、催化区、富含脯氨酸的铰链区以及羧基末端区五个不同功能的区域组成。疏水信号肽区的功能主要是通过信号肽使处于翻译状态的核糖体附着到rER膜上，与膜上的受体蛋白和新分泌的信号肽结合。前肽区，对酶原具有稳定作用，当前肽区被外源性酶切断后，基质金属蛋白就会被激活。催化区通过与锌离子结合而对产生酶的催化作用。链区指免疫球蛋白重链CHl和CH2功能区之间的区域。含大量脯氨酸，具有弹性。适于与抗原结合，也与补体活化有关。由于铰链区富含大量的脯氨酸，可以与抗原结合也可对补体进行活化。羧基末端区与酶的底物特异性有关，同时具有高度的保守性。目前已被分离出来的基质金属蛋白酶家族共有26个成员，命名为基质金属蛋白酶1～26。基质金属蛋白酶家族根据底物的作用和片段的同源性分为间质胶原酶、明胶酶、基质溶解素、模型基质金属蛋白酶家族以及MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-20等五大类。基质金属蛋白酶家族具有以下特点：1）Zn与催化有关;2）蛋白酶通过无活性的形式分泌;3）有机汞制剂和蛋白酶原激活因子可以使酶原激活;4）分子量随着酶原的激活越来越少;5）基质金属蛋白酶家族具有很高的同源性;6）酶原激活剂可以被TMPS抑制。此外，金属蛋白酶家族与机体各组织的发育、重建作用有关，例如骨的重建。

基质金属蛋白酶-2由13个外显子和12个内含子组成。活化的基质金属蛋白酶-2具有钻头的作用，在将细胞进行定位后穿透细胞基质。众多临床研究表明，基质金属蛋白酶会对血管的内皮细胞和平滑肌造成影响，影响其愈合和生长。在下肢静脉曲张患者静脉血管壁的重塑作用中，胶原纤维一直处于一种分解和合成的动态平衡中，正常人体下肢静脉中的胶原纤维增多会使得弹性纤维数量减少。基质金属蛋白酶-2通过钙离子和钾离子对下腔静脉壁进行诱导，使得血管壁出现扩张。静脉曲张的早期，血管壁并未发生扩张松弛的变化，只存在血流回流受阻的问题，所以此时基质金属蛋白酶-2表达程度较低，随着病情的紧张，患者体内的基质金属蛋白酶-2表达程度逐渐提高，静脉管壁和胶原纤维出现改变。免疫组化研究证明，MMP-2在成纤维细胞、平滑肌细胞中呈现高度表达，而TIMP不表达。基质金属蛋白酶通过对蛋白水解酶活性的抑制，使得人体下肢正常的血管壁变薄。对静脉曲张晚期患者的曲张静脉进行检查时可以发现，ECM的蛋白出现水解和变性，基质金属蛋白酶可以通过一种超计划的钙钾离子通道使下肢静脉平滑肌松弛。基质金属蛋白酶家族在病理或者生理状态下的活性会出现动态性的改变，并且对下肢静脉血管重塑产生影响。缺氧或者炎症状态下，患者下肢静脉血管的内皮细胞和平滑肌会受到不良条件的刺激而产生基质金属蛋白酶，尽管基质金属蛋白酶家族与酶原的催化、合成有关，但是受体内TIMP的抑制作用，这些功能将难以实现。

TlMPs是基质金属蛋白酶家族的内源性特异性抑制因子，共有TlMP-1、TlMP-2、TlMP-3、TlMP-4四种，巨噬细胞和结缔组织细胞中可以发现大量的TIMP-2，对基质的降解具有抑制作用。TIMP-2可以与患者体内的MMP-2进行结合，对其转录功能具有抑制作用。由结果也可看出，观察组患者中MMP-2的阳性细胞率和表达作用高于对照组患者，差异具有统计学意义，而TIMP-2的表达在两组中差异无统计学意义。

总之，导致下肢静脉曲张的原因与患者的MMP-2和TIMP-2的表达异常有关。

参考文献

[1] 刘群亮，葛卫宁.下肢曲张静脉MMP-2与TIMP-2的表达及其意义[J].中国普通外科杂志，2015，22（06）：781-782.

[2] 许建辉，刘程伟，王石，等.MMP-1、TIMP-2在下肢静脉曲张血管中的表达及意义[J].黑龙江医药科学，2015，38（04）：126-127.

[3] 郝建.自体静脉移植再狭窄与MMP-1、MMP-2及TIMP-2的表达[J].中国现代普通外科进展，2005，（04）：229-230.

[4] MMP-2、TIMP-2在肝癌中的表达及临床意义[J].中国厂矿医学，2015，22（06）：649-650.

[5] 劉艳，马康康，黄泽智，等.肺结核患者血清MMP-2、TIMP-2与HA、PCⅢ、LN、Ⅳ-C水平变化及肺功能的相关性[J].临床医药文献电子杂志，2017，04（39）：22-23.

[6] 刘亚敏，陈燕，黎元莉.妊娠滋养细胞疾病患者血清CD44v6、MMP-2、TIMP-2水平变化及临床意义[J].山东医药，2018，（03）：74-76.

[7] 焦雪娟，丛林.MMP-2及TIMP-2在复发性流产绒毛组织中的表达及意义[J].现代妇产科进展，2017，26（07）：536-537.

[8] 葛明广.MMP-1、MMP-13及TIMP-1联合检测在下肢静脉曲张血管中的表达及价值[J].双足与保健，2018，27（22）：16-17.