葵花籽与大豆磷脂酰丝氨酸的鉴别

李令星 1.广东广业清怡食品科技有限公司 广州 510000 2.翁源广业清怡食品科技有限公司 韶关 512600

磷脂酰丝氨酸 (简称PS) 作为一种营养补充剂在国内外被广泛使用。它能改善老年人阿尔兹海默症和儿童多动症，还具有提高认知力，特别是识别、学习、记忆能力的作用。同时，PS还具有抗抑郁、缓解精神压力和身体疲劳的功能。但是由于PS需求量大，天然PS来源较少，使得市场上大部分PS主要由大豆或葵花籽卵磷脂与丝氨酸在磷脂酶的作用下合成。但是大豆有转基因和过敏原风险，而葵花籽目前并无相关报道，因而市面上葵花籽PS更受人们青睐，市场价格也远远高于大豆PS。

为了追求短期利益，不少厂家往葵花籽PS中掺杂大豆PS，甚至直接将大豆PS当作葵花籽PS售卖，造成PS市场混乱。目前并无权威的PS鉴别方法，原料卵磷脂可以通过基因测序来鉴别，但合成后PS在纯化工序时已将该基因序列破坏，无法通过基因测序来进行鉴别。本文通过试验分析了两种PS的脂肪酸组成差异，期望能建立一种简单、可靠的鉴别方法。

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂

Agilent 7890B 气相色谱仪( 安捷伦科技有限公司)；分析天平BSA224S( 赛多利斯公司) ；高速离心机（湘仪离心机仪器有限公司）；RE52CS旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；正己烷，甲醇均为色谱纯；氢氧化钠，无水硫酸钠，三氟化硼均为分析纯；油酸甲酯，亚油酸甲酯，亚麻酸甲酯，棕榈酸甲酯（Sigma，纯度≥99.0%）；葵花籽PS(公司自产，纯度≥50%)；大豆PS(公司自产，纯度≥50%)。

1.2 色谱条件

色 谱 柱：J&W FFAP (30 m×0.32 mm, 0.25 µm)；进样器温度:270℃；检测器温度:280℃；程序升温:初始温度100℃,持续 13min；100℃～180℃,升温速率10℃/min,保持6min；180℃～200℃,升温速率1℃/min,保持20min；200℃～230℃,升温速率4℃/min,保持10.5min；载气:氮气；分流比:100：1；进样体积:1.0µl。

2 分析方法

2.1 标准溶液制备

精密称取油酸甲酯、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯、棕榈酸甲酯各10mg，用正己烷定溶至10ml，摇匀，取样到进样瓶中测定。

2.2 样品制备

称取样品1.0g到三角烧瓶中，加入10ml盐酸,混匀。70℃～80℃振荡水浴水解40min。冷却至室温，加入95%乙醇10ml，混匀，加入30ml正己烷萃取，4000r/min离心10min，分离出正己烷层，重复3次。收集3次正己烷于旋转蒸发仪上蒸干，往蒸干物中加入2%氢氧化钠甲醇溶液8ml,连接回流冷凝器, 80℃±1℃水浴回流,直至油滴消失。从回流冷凝器上端加入15%三氟化硼甲醇溶液7ml,回流2min。取下烧瓶,冷却至室温。准确加入10ml正己烷,振摇2min ,加入饱和氯化钠溶液,静置分层。吸取上层溶液5ml至10ml试管中,加入3g～5g无水硫酸钠,振摇1min,静置5min ,吸取上层溶液到进样瓶中测定。

2.3 混合样品制备

按表一比例称取葵花籽和大豆PS混合均匀，按2.2制备样品。

表一 不同比例的PS组成

3 结果与分析

3.1 标准溶液分析

取2.1溶液分别进样，记录色谱图，棕榈酸甲酯保留时 间为32.083min、油 酸甲 酯 保 留时 间 为41.846min、亚油酸甲酯保留时间为45.050min、亚麻酸甲酯保留时间为48.026min。4种脂肪酸在设定色谱条件下获得良好的分离。

3.2 纯净样品分析

通过表二可以看出，大豆PS以棕榈酸和亚油酸居多，而葵花籽PS则以油酸和亚油酸居多，值得一提的是大豆PS中亚麻酸含量为5.64%，而葵花籽PS中亚麻酸含量仅为0.32%,两者含量相差近18倍。由此可以通过PS中的亚麻酸多少判断PS的来源。

表二 2种PS的四种脂肪酸含量

表三 混合PS的亚麻酸含量

通过表三可以看出随着大豆PS比例的增加，亚麻酸含量也逐渐增加，反之随着葵花籽PS比例的增加，亚麻酸含量逐渐减少。由此可以通过亚麻酸含量鉴别PS来源，当PS中亚麻酸含量小于0.88%时，可以判断该PS为葵花籽PS，PS中亚麻酸含量大于5.11%时，可以判断该PS为大豆PS，PS中亚麻酸含量0.88%～5.11%之间时，可以判断该PS为葵花籽与大豆PS的混合品。

4 结论

葵花籽与大豆PS中亚麻酸含量相差高达18倍，通过GC测定PS中亚麻酸的含量。当PS中亚麻酸≤0.88%时，产品为葵花籽PS；PS中亚麻酸≥5.11%时，产品为大豆PS；PS中亚麻酸0.88%～5.11%时，产品为混合PS。该方法简单、快速、可靠，适用于葵花籽和大豆PS鉴别。