粘液型细菌的菌悬液配制及与非粘液型细菌的耐药性分析

吉维民

(江苏省宝应县人民医院，江苏 宝应)

0 引言

临床实验室经常见到粘液型细菌生长，粘液型细菌较常见的有，肺炎克雷伯菌，铜绿假单胞菌，肺炎链球菌，少见的有，脑膜炎奈瑟菌，流感嗜血杆菌，金黄色葡萄球菌。粘液型细菌的粘液组成，主要是细菌的荚膜，由粘多糖构成主要成份[1]，因为粘液有其疏水性，细菌悬浊液0.5 麦氏单位，准确配制有实际困难。我们根据多年的经验，进行一些实验，以便能在实验中有所发现，找出简便可行的办法。

1 材料和方法

取我院近年来培养出的，很明显的粘液型细菌，用无菌棉签沾取目标菌，与无菌生理盐水充分混匀，孵育一定时间进行比浊，比浊仪使用梅里埃产品。配制一定浊度的粘液型细菌菌悬液，在37度孵育时间与浊度变化，如表1。常见粘液型细菌与非粘液型同期同种细菌，体外药敏试验结果比较，结果见表2。药敏结果判读按CLSIC2018，微生物实验操作按《全国临床检测操作规程》第4版操作规范。统计学方法：采用SSPS 20.0 进行数据的统计学分析。

2 结果

表1 主要粘液型细菌菌悬液在37℃孵育时间与浊度变化(n=20，浓度：麦氏单位)

结果表明：孵育30 分后，所配菌悬液，混合较均匀，可调至0.5麦氏单位，无肉眼可见凝块，统计学分析有显著意义P＜0.05。没有孵育的或孵育时间较短的样本，不易形成均匀菌悬液，孵育时间过长，菌悬液的浓度不易掌握，临床实验室操作起来也不方便。因此建议对粘液型细菌菌悬液的配制采用本方法。粘液状细菌其折光强粘液样的外层为荚膜层，荚膜是由疏水性多肽糖物质构成，是细菌的毒力因子。

3 讨论

细菌在感染人体时，会产生或丢失一部份荚膜，也就是常说的细菌的毒力变异，在革兰染色中，有一层厚厚的折光层，荚膜帮助细菌抵制外来因素，从而逃避药物的作用[2]，使感染细菌的毒力增强，它又称为毒力因子。我们在工作中发现，荚膜厚度与毒力呈正相关，而在实验检测中，因为配制悬浊液与普通易散于生理盐水中的细菌，不一样的是，直接做药敏试验，无论是K-B 法还是MIC法，结果都有一定影响，通过孵育能使实验配制菌悬液操作容易些，还可使一部份细菌增加亲水性，孵育与否的结果，两者有一定差异[3]。按照本方法，使用生理盐水配制，以防富营养物质促使细菌分裂生长，使得浓度不易掌握，又能使得细菌分散开来，虽然不能洗脱外层荚膜，但能使细菌表层的荚膜变小。

粘液型病原菌，相对同种非粘液型对抗生素较敏感，在三代头孢菌素上表现的更明显，差异有显著性，大多数抗生素相对粘液型细菌更敏感，总体来看还是比较接近[4]，粘液型细菌药敏试验，一致性较难掌握，实验须更加细心，特别是悬制液的配制，起着很重要的作用。我们采取的方法能很好的解决这部分问题，具体规范化还需进一步研究，以使实验重复性达到要求[5]。回顾性分析本院的粘液型细菌检出率有增加趋势。粘液层使细菌耐受环境的能力变强，对药物渗透入细菌形成障碍，可表现为药敏试验耐药性增强。而实验室药物统计分析并非如此，耐药性分析的结果，反而是粘液型细菌较敏感，统计学分析有显著意义P＜0.05。原因可能是粘液型细菌大多数是野生菌株所致。

表2 主要常见粘液型细菌与非粘液型同期同种细菌药敏结果比较(耐药率%)

据报道肺炎克雷伯菌的拉丝长度和它的毒力强度呈正相关[6]，我们工作中发现有一定道理。我们发现铜绿假单的水溶性色素和粘液呈负相关，水滴状的铜绿少见明显金属光泽的色素，偶见有粘液样的金黄色葡萄球菌，镜下并不见像其它几种水滴样细菌有厚厚的折光层，根据本文可得出，经过37℃孵育30 分钟的菌悬液效果最好，因此，一般工作中可采用37℃孵育30 分钟。有荚膜细菌大都属野生菌株，且在多种标本中都算病原菌，比如痰，分泌物等，临床属病原菌[7]，根据对这几种临床常见病原菌的耐药性分析，区分粘液型与否对感染病原菌与否，对毒性分析，对药物敏感性都有价值。

综上所述，粘液型细菌是值得重视的病原菌，本文所用方法，所统计的结果，在临床上用一定的应用价值，对感染性疾病的治疗，预后都有指导意义。