索磷布韦关键中间体的合成工艺研究

胡明通，郭 猛，王笃政

(正大天晴药业集团股份有限公司，江苏 连云港 222000)

丙肝是一种丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎。据世界卫生组织统计，全球丙肝的感染率约为3%，约1.8亿人感染HCV，每年新发丙型肝炎病例约3.5万例[1-2]。丙型肝炎呈全球性流行，可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，100名患者中有1%～5%可发展为肝硬化甚至干细胞癌二死亡。2013年，索磷布韦是首批获美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于丙肝全口服治疗的药物，对特定基因型丙肝治疗，脱离对干扰素的依赖，丙肝患者的生活得到极大提高，可谓丙肝治疗药物领域的重大突破，具有广泛的市场应用前景[3-4]。

图1 索磷布韦的合成路线Fig.1 Sythesisroute of sofosbuvir

关于索磷布韦的合成报道有很多，其中，以化合物 I-S(N-[(S)-(2,3,4,5,6-五氟苯氧基)苯氧基磷酰基]-L-丙氨酸异丙酯)为关键中间体，与化合物Ⅱ(1-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-(羟甲基)-3-甲基四氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮)反应得索磷布韦是目前较优选的合成路线(图1)[5-6]。在化合物I-S的制备方法中，所含产物包含非对映异构体杂质化合物I-R(图2)，WO2011123645公开了一种将化合物I-R转化为化合物I-S的方法，但该方法操作繁琐，所得产物收率需要进一步提高，残留式化合物I-R较多，难以除去，影响后续反应所得产物索磷布韦的手性纯度[7]。

图2 化合物I-S的合成路线Fig.2 Sythesisroute of compound I-S

为解决上述问题，本研究以二氯磷酸苯酯、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐等作为起始原料，制备得关键中间体手性磷酸酯混合物(I-R和I-S)，在亲核性碱甲醇钠存在的情况下，将化合物I-R转化为化合物I-S，具有收率高，产品手性纯度高的优点(见图2)。

1 仪器与试药

1.1 仪 器

BRUKER AVANCEⅢ HD 500 型核磁共振仪，德国Bruker公司；Waters ACQUITY UPLC H-Class+eλ PDA+XEVO G2-XS QTof液质联用仪，美国Waters公司；JJ-1增力电动搅拌器，江苏省金坛市医疗仪器厂；海道夫LR4000型旋转蒸发仪，德国Heridolph公司。

1.2 试 药

1-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-(羟甲基)-3-甲基四氢呋喃-2-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮、二氯磷酸苯酯、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐，江苏宇田医药有限公司；五氟苯酚、二氯甲烷、甲醇钠、三乙胺、乙酸等均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司、阿拉丁等公司。

2 方法与结果

2.1 五氟苯酚溶液的制备

于500 mL反应瓶内，加入109.8 g五氟苯酚(1.0 eq)和250 mL二氯甲烷(2.5倍量(v/m))，降温至10 ℃以下。

2.2 手性磷酸酯混合物(I-R和I-S)的制备

于2 L反应瓶内，加入二氯磷酸苯酯125.9 g(1.0 eq) 和900 mL二氯甲烷(9倍量(V/m))，氮气保护下降温冷却至-60～50 ℃，加入100.0 g L-丙氨酸异丙酯盐酸盐的二氯甲烷(400 mL，4倍量(V/m))溶液，降温至-60～50 ℃，滴加126.8 g三乙胺(2.1 eq)的二氯甲烷(200 mL，2倍量(V/m))溶液，滴加结束后，保温-60～50 ℃反应1.5 h，然后升至-40～30 ℃，滴加五氟苯酚溶液，滴加结束后，自然升温反应2 h。向反应液中加入10.8 g乙酸(0.3 eq)，搅拌20 min，用冷水(600×3，6倍量(V/m))洗涤3次，有机相(有机相经气相检测未检出三乙胺，色谱柱：DB-624(30 m×0.53 mm×3.00 μm，进样口温度：180 ℃，检测器温度：250 ℃，流速3.5 mL/min，分流比5:1，程序升温：50 ℃保持4 min，以15 ℃/min升至180 ℃保持3 min)用无水硫酸钠干燥8 h，过滤，滤液25～35 ℃减压浓缩至无液体流出，加入正己烷(300 mL，3倍量(V/m))继续减压浓缩至无液体流出，浓缩完得混合目标产物(I-R:I-S约为1:1)。

2.3 化合物 I-S的制备

将2.2中10.0 g混合目标产物(I-R:I-S=约1:1)在乙酸乙酯/正己烷(30 mL，1:4，V/V)的混合溶剂中搅拌分散，并加入0.119 g甲醇钠(0.1当量)20～30 ℃搅拌12 h，加入0.132 g 乙酸(0.1当量)搅拌20 min，过滤，滤饼(化合物I-S纯度99.19%，化合物I-R纯度0.18%)40 ℃鼓风干燥，得白色固体7.33 g(I-S化合物纯度99.34%，化合物I-R纯度0.06%)，收率73.3%。MS[ESI](m/z):452.1[M-H]+。1H-NMR(500 MHz，DMSO-d6)：δ=1.16(6H，d)；4.87(1H，m)；3.93(1H，m)；1.28(3H，d)；7.42(2H，t)；6.86(1H，dd)。

3 结 论

以二氯磷酸苯酯、L-丙氨酸异丙酯盐酸盐等作为起始原料，制备得关键中间体手性磷酸酯混合物(I-R和I-S)，将I-R转化为I-S，收率达73.3%。该方法操作点单，具有收率高，纯度高的优点，适用于工业化生产。