4种植物粗提物对粘虫及小菜蛾的毒力作用

黄守敏，胡向奇

(安庆职业技术学院园林园艺系，安徽安庆 246003)

0 引言

为了降低化学农药对环境的污染，实现人类可持续发展，国内外学者在不断探索寻找植物源农药作为绿色农药研究和开发的发展方向[1-2]，在我国化学农药零增长政策的实施下，植物源农药因其对人畜安全、环境相容性好、低残留等优点而备受人们的重视与青睐[3-4].我国植物资源丰富，据报道目前做过调查研究的植物仅占物种10%左右，因此开发利用植物资源用于有害生物防治的潜力巨大[5-6].从不同种植物中筛选具有较好杀虫活性的植物资源是研制植物源类农药的一项重要基础性工作,皖西南地区虽然植物种类丰富,但关于乡土植物作为植物源杀虫剂研究较少,有些植物虽描述具有杀虫作用，但并未进行深入研究，致使很多植物的杀虫活性尚未开发利用[7].本文试验植物均采自植物资源丰富的皖西南地区.本次研究主要分析了水苏(Stachysjaponica)、草木犀(Melilotusofficinalis)、小窃衣(Torilisjaponica)和马蹄金(Dichondrarepens)4种植物的粗提物，对粘虫(Mythimnaseperata)、小菜蛾(Plutellaxylostella)2种害虫的触杀、熏蒸及体重的影响.以期筛选出具有较好杀虫活性的植物, 为研制防治粘虫和小菜蛾害虫的植物源杀虫剂奠定研究基础.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试试剂 95%乙醇，上海禾颖化工有限公司.

1.1.2 供试仪器 Gzx-9076 MBE型数显鼓风干燥箱，上海一恒科学仪器有限公司；BIC-300智能人工气候培养箱，上海博讯实业有限公司医疗设备厂；上海坤天实验仪器有限公司；FW135中草药粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司；IKA®RV10旋转蒸发仪，艾卡(广州)仪器设备有限公司；BSM420.3电子天平,上海卓精电子科技有限公司；40目筛，东莞市华兴筛网滤布总汇；eppendorf移液枪，培养瓶(带透气盖，400 mL).

1.1.3 供试害虫 粘虫(Panonychuscitri)采自安庆市周边，放入人工气候箱里以新鲜小麦苗进行饲养，饲养2～3代后用于试验.气候箱温度设置为(25±1)℃，湿度维持在60%～80%；光周期∶暗周期为=12 h∶12 h.小菜蛾(Plutellaxylostella)采自安庆市郊区菜地，放入人工气候箱里饲养，成虫给予10%的蜂蜜水作为补充营养，对幼虫每天给予适量新鲜的甘蓝叶片，饲养2～3代后用于实验.气候箱温度设置为(25±1)℃，湿度维持在60%～80%；光周期∶暗周期为=12 h∶12 h.

1.1.4 供试植物 实验所用水苏、草木犀、小窃衣和马蹄金4种植物，采自安徽省西南地区，几种植物供试部分为叶片.

1.2 试验方法

1.2.1 粗提物的制备 将采集的新鲜供试植物洗净烘干，用粉碎机粉碎，粉碎后过40目筛，将一定量的植物干粉放入玻璃容器中，加2倍无水乙醇室温避光下浸泡4 d，然后过滤.去除残渣后得到的滤液，在旋转蒸发仪中蒸馏(50℃，100 r/min)30 min获得植物粗提物浸膏待干燥后称重，避光保存于4℃冰箱中备用[1-2].

1.2.2 室内毒力测定方法

(1)测试水苏、草木犀、小窃衣、马蹄金提取物对粘虫的毒杀作用.将这4种粗提物浸膏分别用清水稀释成2.00、1.00、0.50、0.25、0.125 g·mL-1各5个浓度梯度，设清水对照.对粘虫的触杀作用：用移液枪点滴药液于粘虫前胸背板，每头虫点药液0.5 μL，处理后置虫于培养瓶中，在人工气候箱里培养观察分别于24、48、72 h检查试虫死亡情况，每处理10头3龄幼虫，重复3次，并喂以新鲜小麦苗饲养分别于24、48、72 h检查死亡虫数[8-9].计算其LC50值.

(2)测试水苏、草木犀、小窃衣和马蹄金提取物对小菜蛾的熏蒸作用.采用广口瓶密闭熏蒸的方法，测定水苏等植物无水乙醇溶剂提取物对小菜蛾3龄幼虫的熏蒸活性.将试虫放入广口瓶中，每瓶中10头小菜蛾幼虫，用无水乙醇将4种提取物分别稀释为50.00、25.00、12.50、6.25、3.125 g.mL-15个梯度浓度，取各试液10 μL均匀地滴在已准备好的滤纸条上，停留30 s待有机溶剂挥发后，将滤纸条悬放入瓶中，密封瓶口，以等量乙醇为对照，每处理3次重复.并将处理后的试虫放入人工气候箱中，温度设置为(25±1)℃ ，湿度维持在60%～80% ；光周期∶暗周期为=12 h∶12 h.记录试虫24 h的死亡情况，计算其LC50值[10-12].

(3)测试水苏、草木犀、小窃衣和马蹄金提取物对小菜蛾体重的影响.将新鲜甘蓝叶片(5g)分别在稀释成2.00、1.00、0.50、0.25、0.125 g.mL-15个浓度梯度植物提取物稀释液中浸渍5 s，自然晾干后每个培养皿(9 cm×9 cm)分别接5头2龄小菜蛾，3 d天后换成新鲜叶片，每个处理重复5次，并将处理后的试虫放入人工气候箱中，温度设置为(25±1)℃ ，湿度维持在60%～80% ；光周期∶暗周期为=12 h∶12 h分别于3，5，7 d称体重，计算体重减退率[13-15].

1.3 数据处理

试验数据采用SPSS20.0软件求出毒力回归方程、LC50值、相关系数r及95%置信区间.

2 结果与分析

2.1 4种植物提取物对粘虫的毒杀作用

试验测定水苏、草木犀、小窃衣和马蹄金种植物粗提物对粘虫72 h的毒力活性，结果如表1所示，4种植物提取物对粘虫均表现较好的毒杀活性，其中,水苏提取物相比较于草木犀提取物、小窃衣提取物、马蹄金提取物对粘虫的毒杀效果明显.

表1 4种植物提取物对粘虫的室内毒力测定Tab.1 Indoor Virulence Determination of 4 Kinds of Extracts Against Mythimna Seperata

2.2 4种提取物对小菜蛾幼虫的熏蒸作用

试验测定水苏、草木犀等4种植物粗提物对小菜蛾幼虫24 h的熏蒸毒力活性，结果如表2所示，小窃衣和马蹄金两种植物提取物对小菜蛾表现出相似的熏蒸效果，其中,水苏提取物相比较于其他提取物对小菜蛾的熏蒸效果明显.

表2 4种植物提取物对小菜蛾的熏蒸毒力测定Tab.2 Indoor Virulence Determination of 4 Kinds of Extracts Against Plutella Xylostella

2.3 4种植物提取物对小菜蛾影响

试验测定水苏、草木犀等4种植物粗提物对2龄小菜蛾体重的影响，结果如表3所示，4种植物提取物对小菜蛾体重都有影响，比较而言，水苏提取物对小菜蛾体重影响更为明显.

表3 4种植物提取物对小菜蛾生长发育影响
Tab.3 Effects of 4 Plant Extracts on Growth and Development ofPlutellaXylostella

粗提取液处理前体重/mg 处理后3 d 处理后5 d 处理后7 d 体重/mg体重减退率/%体重/mg体重减退率/%体重/mg体重减退率/%水苏12.120.020.230.438.125.773.4 草木犀10.618.327.7826.036.332.029.6小窃衣9.819.324.034.728.328.363.8马蹄金11.921.335.229.750.021.050.8ck9.419.336.153.8

注：表中数据为10头幼虫的平均体重.

3 小结与讨论

随着人们生活水平的提高，对农产品质量安全关注日益密切，对农药在各种农作物和蔬菜瓜果上的安全性使用非常重视，从丰富的植物资源中筛选开发的植物源类农药对环境友好，安全性优点使其未来具有更为广阔的开发前景，国内外科研人员也在不断地研究和开发植物源农药， Kim等从22种植物甲醇提取物中筛选出多种具有杀虫活性的植物[16].张宏利等对采自秦岭山区的204种植物样品的筛选中发现有87种对粘虫有较好的拒食或毒杀效果[17]，丁建海等从我国宁夏六盘山区的15种植物中筛选出6种对小菜蛾具有50%以上的触杀活性[18]等.

本研究利用皖西南丰富的植物资源，筛选出水苏、小窃衣、马蹄金和草木犀4种植物提取物在杀虫活性上具有一定的优势，尤其是水苏提取物相比较于其他提取物对小菜蛾的熏蒸效果和体重影响明显.关于水苏的杀虫作用文献报道较少，仅张中信等报道了水苏具有杀虫作用[7].将水苏作为一种植物源农药研究其杀虫活性和杀虫机理的研究则出现比较迟.水苏作为皖西南境内生长的一种植物，具体杀虫活性物质的确定需待进一步的试验探索.以期为开发植物源农药提供有价值的植物材料.