高效液相色谱常见故障及处理方法

徐显利 李凤玉

摘 要：高效液相色谱广泛应用于食品安全、药品检验、环保及工农业领域。本文主要概述高效液相色谱仪使用过程中的故障诊断和排除方法。

关键词：高效液相色谱；故障诊断；故障排除

色谱学作为现代分离分析的一个重要领域，高效液相色谱已成为食品、药品、环保及工农业等学科领域的重要分离分析技术[1]。为让老百姓吃得安全、吃得放心、吃得健康，高效液相色谱仪在保障食品安全和解决食品安全问题中起到了至关重要的作用。随着液相色谱的广泛应用，在使用过程中如何进行故障排除就显得尤为重要。

1 仪器各指示灯均为红灯，提示漏液

1.1 接头处漏液

检测仪器各部件的漏液探测器部位，用滤纸擦拭是否有液体存在。若有液体则先擦拭干净，并用吹风机吹干或自然风干。有液体存在即为漏液部位，用扳手拧紧螺丝，再开机观察是否还有漏液现象。

1.2 色谱柱漏液

实际工作中色谱柱需要经常更换，色谱柱尾端接头会容易松动出现漏液的现象。这时需要稍微拧紧一下螺丝，如果还是漏液需要更换卡套螺丝[2]。

1.3 进样阀漏液

液相色谱通用的进样阀为六通阀。六通阀漏液可能是：①定量环柱塞，需更换定量环；②进样针头不合适需更换成匹配的进样针；③废液管阻塞需更换或疏通废液管；④废液管中产生虹吸时需保持废液管高于废液液面；⑤密封圈松动或磨损需进行调整或更换。

2 压力过高

高效液相色谱仪在使用过程中经常出现压力波动的现象，这是因为系统无法提供稳定准确的流量，可通过以下方式进行排查。

2.1 检查流速

破气阀打开排气时流速设置比较高，若关闭破气阀而流速没有调小，就会导致压力瞬间飙升，而导致停泵，将流速调小重新启动泵即可。

2.2 破气阀滤芯堵塞

拆下破气阀将金属垫片挑出，会看到白色的过滤芯，过滤芯上有黑的脏东西就说明需要更换过滤芯了，换好后安装好问题基本就可以解决。

2.3 色谱柱堵塞

拆下色谱柱没有压力，说明柱前压是正常的。在安装上一根短柱，若压力正常，在安装上自用的色谱柱后压力还是变得很大，则色谱柱堵塞的可能性很大，就需要反冲或是更换色谱柱。

2.4 检测器

检测器的流通池时间久了会被微生物或盐析等污染，拆下后对着光可以看到上面有黑色的脏东西，对其进行超声处理后这类问题就可以解决。

2.5 缓冲盐的析出

流动相经常用缓冲盐溶液时，若缓冲盐浓度过高，在与有机相混合的时，有时会出现局部有机相比例过高，导致缓冲盐析出，导致压力波动的现象。有盐析出时可采用60～80 ℃的热水冲洗管道，用大流量从破气阀排出。

3 管路中的气泡排不尽

管路中气泡比较多时，可先打开破气阀，设置在5mL/min的流速下运转，将气泡排出；或用一个较大的注射器在泵的出口处抽出气体，使气泡排出。

泵运行管路中没有流动相流出，这时管路把流动相管线进泵头的分流器ABCD拧下来，用仪器带的一个白色接头接上针筒抽出来即可。

用上面两种方法处理后气泡还是排不尽，可能是流动相中的气泡没有排干净，可以用超声波进行脱气后再开机使用。开机后若还有气泡，需检查在线真空脱气机是否能达到真空度，是否还有脱气功能。

4 基线漂移較大

①系统流动相没有平衡好，液相色谱若长时间没用，基线平衡需要的时间较长，需增加平衡的时间。②色谱柱被污染，色谱柱在使用过程中可能因为样品或流动相而被污染，从而导致柱效下降或柱压升高，这时可以通过冲洗来再生色谱柱。冲洗后检查色谱柱是否恢复；如果没有，需考虑更换色谱柱。③样品没有走完，有些样品成分比较复杂，保留时间比较长，这时若提前进入下一针样品，就会导致样品没有走完而造成基线漂移，这时需要对系统进行清洗。④检测器污染，当检测器的流通池被污染时，应将色谱柱卸下，用大的注射器注入试剂对其进行清洗。⑤流动相处理不合格，在仪器的使用过程中，可能会出现流动相被污染、试剂不纯、未对流动相进行脱气或过滤的现象，这时需对流动相进行脱气使其符合流动相的使用要求。⑥氘灯能量不足，氘灯具有一定的使用寿命，使用时间到达使用时限时，就需要购买新的氘灯对其进行更换。

5 结语

本文从实际出发，分析高效液相色谱仪漏液、压力过高、气泡排不尽和基线漂移较大方面出现错误的原因，可为仪器使用、维护和保养人员在工作中解决相应问题提供参考。

参考文献

[1]赵立平.液相色谱仪器的维护与故障排除[J].现代仪器.2004（2）：56-58.

[2]王佳雯.浅谈液相色谱仪常常见故障的检测与排除[J].计量与测试技术，2013，40（11）：55-56.

基金项目：黑龙江省教育厅高等教育教学改革项目《仪器分析》课程改革的研究与探索（编号：SJGZY2019104）。

作者简介：徐显利（1981—），女，黑龙江肇东人，本科，讲师。研究方向：仪器分析。