高效液相色谱法测定蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸

邹力 严烨 范芳芳 吴坤

摘 要：建立了外标法测定蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸的高效液相色譜检测方法。10-羟基-2-癸烯酸经乙醇超声提取后，以甲醇∶甲酸（0.1%）=55∶45为流动相，经C18色谱柱分离，紫外检测器检测。结果显示，在50～500 μg/mL浓度范围内，线性关系良好，r=0.999 9，RSD<3%，加标回收率97%～105%。

关键词：蜂王浆；10-羟基-2-癸烯酸；高效液相色谱法

10-羟基-2-癸烯酸是蜂王浆及蜂王浆冻干粉的重要检测指标，国家标准[1-2]要求蜂王浆优等品的10-羟基-2-癸烯酸含量≥1.8%，合格品≥1.4%，蜂王冻干粉优等品的10-羟基-2-癸烯酸含量≥1.8%，合格品≥1.4%，但国家标准检测方法为内标法，极其繁琐，且内标检测成本昂贵，因此研究快速准确检测蜂王浆及蜂王浆冻干粉中10-羟基-2-癸烯酸的外标法具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 仪器

安捷伦1260型高效液相色谱仪带紫外检测器，超声波清洗仪。

1.2 试剂

10-羟基-2-癸烯酸标准品（厂家：alfresa，纯度：100%），甲醇（色谱纯），无水乙醇（色谱纯），甲酸（分析纯）。

1.3 色谱条件

色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇∶甲酸（0.1%）=55∶45；流速为1.0 mL/min；柱温为35 ℃；检测波长：210 nm；进样量20 μL。

1.4 样品前处理

称量0.5 g样品，加入无水乙醇定容至50 mL，超声15 min混匀，经孔径为0.45μm的有机滤膜过滤后上机检测。

2 结果与讨论

2.1 标准曲线绘制

分别取1 mg/mL的10-羟基-2-癸烯酸储备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL与5.0 mL于10 mL容量瓶中，用无水乙醇定容至10 mL，随后按照1.3条件上机检测，得到图1所示的结果，根据结果绘制标准曲线，浓度范围在50～500 μg/mL时，线性良好，r=0.999 9。

2.2 实际样品分析

采用本方法对蜂王浆进行10-羟基-2-癸烯酸含量检测（图2）、加标回收试验及重复性试验，结果表明回收率可达97%～105%，样品重复测定6次，RSD<3%。

3 结论

本实验建立了测定蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸含量的方法，该方法使用高效液相色谱法外标法定量，操作便捷、前处理简单、成本低、结果稳定，适用于蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸的测定。

参考文献

[1]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB 9697-2008 蜂王浆[S].北京：中国标准出版社，2012.

[2]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB/T 21532-2008 蜂王浆冻干粉[S].北京：中国标准出版社，2008.