泌尿生殖道支原体感染特点及药敏分析*

尚雨姗,聂正超,施 岚

1.安徽医科大学第二附属医院检验科,安徽合肥 230601；2.中国科学技术大学附属第一医院检验科,安徽合肥 230001

支原体是一类可以引起新生儿、儿童及成人呼吸道和泌尿生殖道广泛炎症的病原体。近年来，主要由解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)引起的泌尿生殖道感染在人群中的发病率明显升高[1],且不同地区、不同人群的支原体感染状况存在明显差异。为了解本地区支原体感染状况及药敏情况,现对安徽医科大学第二附属医院与中国科学技术大学附属第一医院2007-2009年11 279例、2016-2018年21 893例疑似泌尿生殖道感染患者送检标本进行支原体培养、鉴定及药敏试验,探讨其变化特点。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2007-2009年和2016-2018年安徽医科大学第二附属医院与中国科学技术大学附属第一医院门诊就诊的疑似泌尿生殖道感染患者作为研究对象,患者临床症状有尿道刺痒、尿频、尿痛和阴道分泌物增多、白带异味等,且所有研究对象留取标本前1周未使用过抗菌药物。

1.2仪器与试剂 Uu和Mh培养、鉴定和药敏试剂盒由珠海丽珠生物工程有限公司提供,内含9种药物:强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星。

1.3方法 男性患者取尿道口2～4 cm处分泌物或前列腺液、精液,女性患者取宫颈或阴道分泌物,取样后立即送检。按照试剂盒说明书进行操作,将含有标本的拭子插入含液体培养基的小瓶中,沿瓶壁挤压旋转拭子数次,弃拭子,每孔加培养液50 μL,每个小孔加一滴石蜡油,盖上试剂条盖子,35 ℃恒温箱中培养,于24 h观察Uu结果，48 h观察Mh结果。试剂条小孔中培养基由黄色变为红色,且透明清亮,无明显浑浊判为阳性,提示Uu和(或)Mh生长；培养基颜色不发生变化为阴性,提示无Uu和(或)Mh生长。每组药设低浓度孔(上孔)和高浓度孔(下孔),高低浓度孔均无支原体生长报告敏感(S),低浓度孔有支原体生长、高浓度孔无支原体生长报告中介(I),高低浓度孔均有支原体生长报告耐药(R)。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据处理及统计分析,计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1基本情况 2007-2009年和2016-2018年送检的33 172例疑似泌尿生殖道感染患者标本中11 055例阳性,检出率为33.33%,其中Uu阳性8 352例(75.55%),Mh阳性558例(5.05%),Uu+Mh阳性2 145例(19.40%)。

2.2支原体感染变化情况 2007-2009年共送检疑似感染患者标本11 279例,其中男5 467例,女5 812例,共3 593例阳性,总检出率为31.86%。男性阳性1 162例(21.25%),其中Uu阳性616例(11.27%),Mh阳性170例(3.11%),Uu+Mh阳性376例(6.88%)；女性阳性2 431例(41.83%),其中Uu阳性1 417例(24.38%),Mh阳性238例(4.09%),Uu+Mh阳性776例(13.35%)。女性患者支原体检出率(41.83%)明显高于男性(21.25%),差异有统计学意义(χ2=549.237,P<0.05)。

2016-2018年共送检疑似感染患者标本21 893例,其中男10 510例,女11 383例,共7 462例标本为阳性,总检出率为34.08%。男性阳性1 741例(16.57%),其中Uu阳性1 500例(14.27%),Mh阳性50例(0.48%),Uu+Mh阳性191例(1.82%)；女性阳性5 721例(50.26%),其中Uu阳性4 819例(42.34%),Mh阳性100例(0.88%),Uu+Mh阳性802例(7.05%)。

与2007-2009年数据相比,2016-2018年支原体总检出率上升(χ2=16.634,P<0.05),其中女性支原体检出率明显上升(χ2=109.713,P<0.05),而男性支原体检出率明显下降(χ2=53.195,P<0.05)，Uu仍是主要感染病原体,且以女性感染者为主,与10年前(24.38%)相比,2016-2018年Uu检出率明显升高(42.34%),差异有统计学意义(χ2=464.184,P<0.05),而Mh和Uu+Mh检出率明显降低,差异有统计学意义(χ2=386.985,P<0.05；χ2=438.496,P<0.05)。见表1。

2.3药敏试验及结果分析

2.3.12007-2009年和2016-2018年支原体对抗菌药物的敏感率 2007-2009年和2016-2018年Uu、Mh和Uu+Mh感染对9种抗菌药物的敏感率,见表2。

表1 2007-2009年和2016-2018年两个时间段支原体感染构成情况[n(%)]

表2 2007-2009年和2016-2018年支原体对抗菌药物的敏感率[n(%)]

2.3.2支原体药敏分析及耐药性变迁 2016-2018年，Uu感染对克拉霉素(96.39%)的敏感率明显高于Mh(5.33%)和Uu+Mh感染(2.92%),差异有统计学意义(P<0.05),且与10年前相比,Mh及Uu+Mh感染对克拉霉素的敏感率明显降低(P<0.05)；Uu、Mh和Uu+Mh感染对交沙霉素敏感率均在90%以上,且敏感率较10年前明显升高(P<0.05),但对罗红霉素和阿奇霉素的敏感率则较差。2016-2018年，Uu、Mh及Uu+Mh感染对喹诺酮类药物(司帕沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星)敏感率均低于30.00%,与10年前相比敏感率明显下降(P<0.05)。近10年间Uu、Mh及混合感染对四环素类(强力霉素、美满霉素)药物敏感率一直很好,敏感率一直在80.00%以上。2016-2018年，Mh及Uu+Mh感染仅对大环内酯类的交沙霉素敏感率较好,其他药物敏感率均较低。

另外,统计了2016-2018年较2007-2009年支原体耐药性升高的抗菌药物,对比10年前后药敏结果,发现Uu对喹诺酮类药物的耐药率明显升高,Mh、Uu+Mh感染对大环内酯类药物(克拉霉素、罗红霉素、阿奇霉素)和喹诺酮类药物的耐药率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2016-2018年较2007-2009年支原体耐药性升高的抗菌药物(%)

续表3 2016-2018年较2007-2009年支原体属耐药性升高的抗菌药物(%)

3 讨 论

寄生于人类的支原体是目前已知最小的无细胞壁原核细胞型微生物。动植物界已知的200多种支原体中有16种寄生在人体内,但其中只有6种具有致病性,包括肺炎支原体、Uu、Mh、生殖道支原体、发酵支原体和小型脲原体。Uu、Mh和生殖道支原体是人类生殖道中的重要病原体[2-3]。支原体是一种细胞外病原体,通过专门的细胞器附着在宿主细胞上,这种附着可以阻止生物体的纤毛清除[4]。由支原体产生的过氧化氢和超氧化物自由基可引起宿主细胞的氧化损伤,细胞损伤导致先天免疫系统的激活,引发细胞因子释放趋化性和细胞毒性作用,引起非淋球菌尿道炎(nGU)[5-6],也可引起前列腺炎、附睾炎、肾盂肾炎[7]、不育症[8]、盆腔炎、绒毛膜羊膜炎、产后子宫内膜炎和细菌性阴道病[2]等。Uu和Mh也是一类机会病原体,可正常寄居于人体腔道的黏膜上而不引起任何症状。21%～53%的健康成年女性子宫颈或阴道内存在Uu和Mh的定植,在健康男性尿道中的定植率略低。许多感染的女性无症状,但在机体免疫力低下时,可引起各种感染[3,9]。

本研究发现,2007-2009年送检的11 279例疑似泌尿生殖道感染患者标本中共有3 593例为阳性,检出率为31.86%,2016-2018年送检的21 893例疑似泌尿生殖道感染患者标本中共7 462例为阳性,检出率为34.08%,与邻省慈溪市冯维[10]报道的34.79%(2 265/6 513)相近,低于湖北省中医院刘玲等[11]报道的51.1%(157/307)和马鞍山地区潘廷猛等[12]报道的44.12%(1 040/2 357),也低于本地区其他报道[13-14],考虑与样本量、性别比例、检测方法及标本采集等有关,也说明支原体感染地域性差异较大。近10年间支原体感染的主要类型为Uu感染,以女性居多,且相比于10年前(24.38%),2016-2018年女性Uu检出率明显升高(42.34%),而Mh、Uu+Mh检出率呈下降趋势。两个时间段，Uu+Mh的检出率高于单一Mh检出率,提示Mh多以复合感染的形式存在。相比于2007-2009年,2016-2018年支原体检出率升高,其中女性支原体检出率明显上升,而男性支原体检出率明显下降,这可能与男女生殖道生理结构差异有关,且支原体可寄居于健康女性生殖道黏膜[15]。

由于缺乏细胞壁,支原体对β-内酰胺类等作用于细胞壁的抗菌药物有耐药性,抗菌治疗的选择有限,临床首选大环内酯类、四环素类和新型氟喹诺酮类药物[5]。药敏结果分析发现单一Uu感染对四环素类药物强力霉素和美满霉素的敏感率在95.00%以上,其次是大环内酯类药物交沙霉素和克拉霉素,敏感率也在79.00%以上,而对罗红霉素和阿奇霉素敏感率欠佳。单一Mh感染仅对四环素类和交沙霉素的敏感率好。Uu+Mh感染对抗菌药物的敏感率类似单一Mh感染,但其对所有药物的敏感率均低于单一Uu和单一Mh感染,考虑与混合感染时发生交叉耐药有关。Uu、Mh及Uu+Mh感染对喹诺酮类药物氧氟沙星、左氧氟沙星和司帕沙星敏感率均较低,且2016-2018年与2007-2009年相比敏感率明显下降。综合分析,喹诺酮类药物由于其药物代谢特性被广泛用于泌尿生殖道感染治疗,近年来随着临床的不合理使用导致耐药率逐年升高,临床医师在选择喹诺酮类药物治疗时要更加慎重。2016-2018年，Uu、Mh及Uu+Mh感染对四环素类和交沙霉素的敏感率均在90.00%以上,提示四环素类抗菌药物和交沙霉素可作为临床医师怀疑泌尿生殖道支原体感染时的首选用药。

另外,对比近10年前后药敏结果发现Uu对喹诺酮类药物的耐药率明显升高,Mh、Uu+Mh感染对大环内酯类和喹诺酮类药物的耐药率明显升高。因此,本地区临床医师在怀疑支原体感染时,应避免经验性选择这类药物治疗。本次回顾性研究前后跨越10年以上,且相较于同类型研究,本研究样本量大,时间跨度长,对分析本地区近10年间支原体感染状况及耐药性变迁具备一定参考价值。