五味消毒饮对奶牛夏季隐性乳房炎的疗效、生产性能和安全性评价

刘延鑫 ， 王义翠 ， 郝万清 ， 孙世豪 ， 孙 宇

[1.河南中医药大学基础医学院(仲景学院) ， 河南 郑州 450046 ； 2.河南中医药大学药学院 ， 河南 郑州 450046 ； 3.河南农业大学牧医工程学院 ， 河南 郑州 450046]

奶牛隐性乳房炎是生产上常见的问题,患病牛的奶中体细胞数(Somatic cell count,SCC)异常增高。生产5胎次以上、低产和散养户的奶牛发病率较高[1]，且夏季高发[2]。细菌病原体的入侵感染是引发奶牛乳房炎的主要病因[3-4]。随着乳中抗生素残留问题日益严重，人们对无抗生素奶的要求越来越高，采用中草药进行夏季奶牛隐性乳房炎的防治是畜牧生产的发展趋势。单味或者组合中药对引起奶牛隐性乳房炎的细菌具有良好的体外抗菌活性[5-6]，生产上采用中草药方剂[7-10]或植物提取物[11-13]对奶牛隐性乳房炎具有良好的疗效，不仅可以减少牛乳SCC，而且还可提高奶产量和乳品质。五味消毒饮见于《医宗金鉴》，属于具有清热解毒功效的经典方剂，由金银花、蒲公英、野菊花等五味药组成，其应用于夏季奶牛隐性乳房炎防治未见报道。本试验探究五味消毒饮对夏季隐性乳房炎奶牛的疗效和生产性能影响，并同时测定试验奶牛的肝、肾功能指标，进行安全性评价，为生产上解决夏季奶牛隐性乳房炎问题提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 试验药品均购自河南禹州市青山药业有限公司，五味消毒散的药物比例：金银花40%，蒲公英15%，野菊花15%，紫花地丁15%，紫背天葵15%。使用前先将上述各组分分别粉碎成粒度在0.5 mm 以下的粉状，再进行混匀。

1.2 试验动物选择与分组 根据奶牛群体改良计划(Dairy herd improvement，DHI)报告，按照泌乳阶段﹑胎次、体重相近原则，选择SCC>50万个/mL、2～4 胎次、体重600 kg左右、由河南农业大学奶牛场饲养的荷斯坦奶牛12头，随机均分为对照组和给药组，预试期3 d，正试期14 d(2019.7.11—2019.7.24)。

1.3 试验处理 试验奶牛均采用全混合日粮饲喂制度，试验牛只统一在一栋牛舍进行管理，给药组每天每头牛在饲料中添加120 g五味消毒饮，对照组添加相应数量的东北羊草粉，由专人负责试验牛只采食。

1.4 饲养管理 所有试验牛只采用挤奶机单独挤奶，每日早、晚各1次，饲养管理制度一致。

1.5 指标的测定及方法

1.5.1 乳样本和血液样本的采集 在试验第1、7、14天，分别采集所有试验牛早乳样25 mL、晚乳样25 mL，混合后共50 mL，同时尾静脉采血10 mL，用冰盒迅速带回实验室,用于加州乳房炎检测法(California mastitis test，CMT)和肝、肾功能指标测定。

1.5.2 CMT检测 十二烷基磺酸钠30 g溶于1 000 mL 蒸馏水，之后用1 moL/L的NaOH调节溶液 pH为6.4，同时加入溴甲酚紫染色液0.1 g，制成CMT诊断液。检测时先取2 mL奶样于乳白色诊断器皿内，随后加入等量的CMT诊断液，呈同心圆摇动诊断盘，根据表1的判定标准最后判定结果。

表1 CMT诊断标准

1.5.3 生产性能指标的测定 试验期间每天记录日产奶量，平均产奶量计算方法为试验期间日产奶量的平均数。乳样采用FOSS FT120型全乳成分分析仪测定乳脂率、乳蛋白率和非脂乳固体指标。

1.5.4 肝肾功能指标的测定 采用全自动生化分析仪(奥林巴斯AU400)测定奶牛血液的肝功能指标：谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、碱性磷酸酶(ALP)和谷酰转肽酶(GGT)；肾功能指标：血尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)和尿酸(UA)。

1.6 数据分析 试验数据采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，测定结果以平均值±标准差(Mean±SD)表示，2组样本平均数比较采用t检验，P<0.05 判定为差异显著，P<0.01判定为差异极显著。

2 结果

2.1 五味消毒饮对奶牛隐性乳房炎的疗效 结果见表2，五味消毒饮对奶牛隐性乳房炎的治疗具有较好效果。对照组有1例在第14天检测时由弱阳性转为阳性。而给药组经过治疗后，第7天给药组治愈率为66.67%，有效率为80%；第14天给药组的治愈率为83.33%，有效率为100%。

2.2 五味消毒饮对奶牛生产性能的影响 结果见表3，第1天对照组和给药组的奶牛样本平均产奶量、乳脂率、乳蛋白和非脂乳固体指标无显著差异(P>0.05)；第7天给药组的产奶量高于对照2.38 kg(P>0.05)， 对照组和给药组的各项乳成分指标差异不显著(P>0.05)；第14天给药组的产奶量高于对照组6.25 kg(P<0.05)，此外，试验期间给药组乳脂率、乳蛋白有一定的改善效果(P>0.05)。

2.3 五味消毒饮的安全性评价 结果见表4，试验期间，对照组、给药组的肝、肾功能指标略有波动，均无显著差异(P>0.05)。

表2 五味消毒饮对奶牛隐性乳房炎的治疗效果

表3 五味消毒饮对奶牛生产性能的影响

表4 五味消毒饮的安全性评价

3 讨论

目前已报道的奶牛乳房炎病原菌超过150种，但主要致病菌为金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌等[4]。从中兽医角度，奶牛隐性乳房炎属于乳痈，多由热毒引起，五味消毒饮具有清热解毒、消散疔疮的功效，功专力宏，是历代中医治疗火毒结聚而引起痈疮的首选方剂。据报道，五味消毒饮对母兔乳房炎和子宫炎具有良好的效果[14]。五味消毒饮中的金银花、蒲公英、野菊花、紫花地丁和紫背天葵[15]对奶牛乳房炎常见致病菌均有良好的体外抗菌活性。牛隽等[8]认为，中草药是通过活血化淤改善乳房局部血液循环，清热解毒，清除病原微生物，补气益血调节机体免疫力，从而达到治愈隐性乳房炎的作用。本试验表明,饲料中添加120 g/(头·d)的五味消毒饮对奶牛隐性乳房炎具有较高的有效率和治愈率。

奶牛隐性乳房炎不仅仅造成乳中SCC升高，而且也会造成产奶量降低、乳品质下降等一系列问题，给生产带来损失。侯昆等[11]2019年采用竹叶黄酮和青蒿提取物对患有隐性乳房炎奶牛进行治疗，发现二者不仅具有降低SCC的作用，而且4%乳脂校正乳产量和第14天乳蛋白率显著提高(P<0.05)。本课题组之前的研究也发现，红岩草提取物具有治疗奶牛隐性乳房炎的效果，且有提高隐性乳房炎奶牛产奶量，改善乳品质的作用[12]。本试验中结果表明，在试验期间，对照组的产奶量下降，而给药组奶牛在试验第14天产奶量显著上升(P<0.05)，乳脂率和乳蛋白具有一定程度的改善，表明日粮添加120 g/(头·d)五味消毒饮可以有效治疗奶牛隐性乳房炎，同时对提高产奶量，改善乳品质具有一定作用。

中草药添加剂应用于生产上往往需要进行安全性评价。孙启英[16]通过急性毒性试验和亚急性毒性试验检测了奶牛抗热应激中草药添加剂的安全性，发现该制剂水提物给小鼠灌胃，其毒副作用很小，但给小鼠腹腔注射，却出现了毒性反应。牛国庆等[17]2018年进行了自制防治奶牛隐性乳房炎复方中药的安全性试验，证明复方中药毒副作用小，具有较高的安全性，短期起到一定的促进生长效果，长期使用也无不良影响。吴永魁等[18]通过检测试验动物的肝、肾功能指标来评价抗疲劳中药复方制剂的安全性，证明了中药复方制剂无毒，无致突变性。本试验选择的五味消毒饮，其中5种中药大部分属于药食同源，试验期间，给药组的肝、肾指标均在正常范围，表明在饲料中混饲120 g/(头·d)的五味消毒饮对奶牛治疗是安全的，不会产生毒理损伤。

综上，日粮添加120 g/(头·d)五味消毒饮对夏季隐性乳房炎奶牛具有较好疗效，能够显著提高其产奶量，具有改善奶牛乳品质作用，符合安全性，为生产上解决夏季奶牛隐性乳房炎危害提供了参考依据。