我国非洲猪瘟防控专利技术分析

余璨 蒋超

摘要：非洲猪瘟（African swine fever，ASF）作为由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的我国一类动物疫病，对其有效的防控对于我国养猪业的长足健康发展有至关重要的作用。在ASF的防控手段中，可根据ASF的发展进程和防控目的分为ASF快速准确的检测和诊断、ASF的有效特异性地预防和治疗以及强有力的养殖体系管理等方面。近年来，随着ASF的疫情的发展，我国为防控ASF而出现的专利技术取得了重大进步，现以专利技术数据为基础对我国ASF防治过程中检测和诊断、预防和治疗以及体系管理的技术进展进行分析，为我国快速有效扑灭ASF疫病提供技术参考。

关键词：非洲猪瘟;非洲猪瘟病毒;诊断;治疗;防控

中图分类号：G306;S858.28文献标识码：A 文章编号：1003-5168（2020）33-0114-03

1 引言

ASFA（African swine fever）是由于ASFV（African swi-

ne fever）而引起一种高度接触性、急性以及烈性传染病，其可通过直接接触、间接接触以及短距离气溶胶方式传染，主要危害家猪和野猪，其传染迅速、病死率可达100%，对养殖业有危害性极大。引发ASF的ASFV是一种DNA病毒，具有典型二十面体对称结构，直径为260nm～300nm，碱基数为170 kb～190 kb，是至今为止所知晓的唯一虫媒DNA病毒[1-2]。

ASF作为世界动物卫生组织规定须申报的动物疫病以及我国一类动物疫病，其防治一直是全球性的难题，对其迅速有效的扑灭也是该全球性疫病防控的目标。在防控ASF的主要手段中，根据ASF的发展进程和防控目的，其主要涉及ASF的检测和诊断、预防和治疗、养殖体系管理等几个方面。近年来，防控ASF疫病的技术取得了巨大的发展，同时专利技术信息作为获取该领域研发技术和产业现状的重要来源，对其全面的分析能为ASF疫病防控提供有价值的参考。因此，本文从专利技术入手对ASF疫病防控手段的技术研究进行整理和总结，以期为扑灭ASF疫病和为该领域的技术创新以及产业发展提供支持。

2 ASF的检测与诊断

2.1 ASF的检测与诊断技术分类

为了防止ASF疫情的扩散，快速精准对ASF实施早期诊断和检测是防控ASF疫病的关键环节。图1显示了我国在ASF的诊断和监测的技术领域专利技术分布情况，其中ASF的诊断和监测技术主要涉及了分子生物学检测、免疫学检测、对诊断检测装置设备的改进和涉及病毒表达载体和细胞株的构建等其他方式。在上述的检测方式中，分子生物学监测、檢测装置设备的改进和免疫学检测是我国在ASF的诊断和监测中的重点和热点技术，其占比分别是64%、23%和10%。在针对分子生物学检测方面，其主要涉及了普通的PCR、实时荧光定量PCR、多重PCR、环介导等温扩增（LAMP）、重组酶介导的等温扩增法（RAA）、重组酶聚合酶扩增（RPA）、基于CRISPR或CRISPR/Cas12a的检测等检测技术;在针对免疫学检测技术中则主要涉及了酶联免疫吸附测定（ELISA）、胶体金免疫层析技术等;而在检测装置设备方面则重点是对涉及上述检测技术的设备仪器，例如对PCR试剂盒、荧光扩增检测仪、LAMP检测的恒温金属浴装置、酶标板加注盒、酶标板清洗装置、胶体金检测卡等的改进。

2.2 重要申请人ASF的检测与诊断技术

通过分析重要申请人可以体现该领域所集中的技术研发主体和技术研发的前沿和重点技术。我国ASF的检测与诊断领域中专利申请主体涉及科研院所、企业、高校以及个人，其占比分别为36%、36%、23%和5%。从该领域中排名前10的重要申请人可以看出，在该领域中的重要研发主体涉及了科研院所、高校以及企业，其中天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心和华南农业大学分别作为科研院所和高校申请主体的代表，同时对于华南农业大学而言，其专利申请大多是与肇庆大华农生物药品有限公司作为联合申请人，可见在该领域中高校与企业通过合作驱动研究和产业创新也是申请主体的创新手段。

基于天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心和华南农业大学在该领域的研发实力，接下来重点分析上述申请人在该领域的重点技术。华南农业大学的研究技术集中在采用分子生物学检测以区分ASFV野毒株与特定基因缺失基因缺失株，CN110804677A、CN110551853A、CN111074000A公开了采用二重PCR扩增ASFVCD2V和360-505R基因或者采用三重PCR扩增ASFVCD2V、P72、360-505R鉴别ASFV野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株。于此同时，CN110885905A、CN110791591A中则是分别采用LAMP技术设计引物以快速特异地分辨ASFV野毒株与MGF360-505R或CD2v和360-505R双基因缺失基因缺失株。此外，CN110777220A中还公开了将RPA技术和侧流免疫试纸条（LFD）结合的RPA-LFD技术的鉴别病毒野毒株与基因缺失株。天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心的研究内容除了分子生物学检测外还包括免疫学检测技术，在免疫学检测技术中，CN101831407A、CN101825633A中公开了建立包括原核表达的重组ASFV P30蛋白作为包被抗原、通过杂交瘤技术获得的保藏号为CGMCC NO.3771杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体的酶标记物的ELISA检测体系，而CN101818129A、CN101833005A中则公开了构建包括包被抗原ASFV P54蛋白以及保藏号为CGMCC NO.3750杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体的酶标记物的ELISA检测体系。在分子生物学检测方面津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心更侧重于采用PCR技术对ASFV的直接检测，CN101463396A、CN104745730A、CN104774953A公开了采用Taqman探针的荧光定量分别诊断ASFV P54、ASFV CP204L、ASFV CP530R基因。为了提高检测效能CN104745729A、CN104745731A分别公开了利用二重或三重荧光RT-PCR同时检出ASFV和猪繁殖与呼吸综合征病毒。

3 ASF的预防与治疗

3.1 ASF的预防与治疗技术分类

面对严峻的ASF疫情，寻求有效特异性地预防和治疗ASF的方法是防控ASF的关键突破點。图2显示在ASF的预防和治疗方法中主要涉及到生物药、中药和化药，其占比分别为57%、27%、5%，由此可见生物药在ASF的治疗和预防中起到了举足轻重的作用。而对生物药进行分析可以发现，疫苗免疫是防控ASF的主要方式，在疫苗中又涉及了蛋白疫苗、核酸疫苗以及病毒疫苗，可见特异性高、安全有效的疫苗凭借其优点在防控ASF的手段中脱颖而出，将在ASF防控中得到长足的发展。

3.2 重要申请人ASF的预防与治疗技术

在ASF的预防与治疗的研发领域中企业的占比最大为43%，其次是研究院所、个人和高校，占比分别为26%、18%和13%。其中，扬州大学在ASF预防与治疗的研方面成果颇为丰富。对扬州大学该领域的专利技术进行分析可以发现，扬州大学的相关研究重点集中在了构建表达ASFV相关基因的重组腺病毒载体并腺病毒载体运用于疫苗的制备，其中 CN108504686A、CN108342414A中就公开了利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP得到表达ASFV EP153R基因或B646L的重组腺病毒载体，并基于携带CMV强启动子的载体从而实现了相应蛋白质在真核细胞中正常表达，并能够为制备得到病毒疫苗做准备。河南省生物工程技术研究中心与郑州倍赛泰生物科技有限公司作为联合申请人则将关注点放在了发现表位多肽、制备融合蛋白疫苗的以及表位疫苗上。由此可见，疫苗作为预防和治疗ASF的重点手段受到了高校、科研中心和企业的青睐。

4 养殖体系管理

除上述ASF的诊断和监测以及ASF的预防和治疗在ASF防控过程中的两类关键手段外，养殖体系的管理也在防控ASF中占有一席之地，其中主要涉及到对饲料的灭菌消毒、饲料的加工处理以及对养殖过程中的生产或监管系统等。此外，由于在该领域中主要涉及到设备和仪器，因此在该领域中实用新型专利申请多于发明专利申请。

5 结语

随着ASF防控手段的相关技术的不断发展，ASF疫病的防控手段涉及到三方面，一是诊断和监测ASF，二是ASF的预防和治疗，三是对养殖体系的管理。本文以专利数据为基础对我国ASF防控的研究进行分析，挖掘我国在扑灭ASF疫病过程中的创新技术手段，为防控ASF以及该领域的技术创新和产业发展提供参考。

参考文献：

[1] 马玉腾，韩玉莹，金鑫，等.非洲猪瘟疫苗研究进展及其难点和突破点[J].中国预防兽医学报，2021，43（3）.

[2] 朱小甫，吴旭锦.非洲猪瘟诊断技术研究进展[J].陕西农业科学，2020，66（5）：97-100.