白花蛇舌草注射液在中晚期肺腺癌治疗中的作用及对血清中miR-155的影响研究

唐洪成 罗刚 和平海 武伟华 李岩

[摘要] 目的 探討中晚期肺腺癌患者辅助应用白花蛇舌草注射液的临床效果，关注其对血清中miR-155的影响。方法方便选择该院2018年1—12月收治的82例中晚期肺腺癌患者，按入院顺序分为观察组（41例）和对照组（41例），对照组应用顺铂联合长春瑞滨治疗，观察组在上述基础上加用白花蛇舌草注射液进行治疗，治疗2个周期观察疗效，同时关注治疗前、后血清中微小RNA-155（miR-155）的表达水平。结果 观察组共38例、对照组共38例完成治疗及观察。两组治疗总有效率﹙55.3% vs 28.9%﹚，差异有统计学意义（χ2=5.398，P=0.020）。两组在骨髓抑制（26.3% vs 48.6%），（χ2=3.996，P=0.046）及呕吐III和IV度（23.7% vs 55.3%），（χ2=7.930，P=0.005）的发生率比较中有差异统计学意义（P<0.05）。治疗后两组血清中miR-155的表达均下降，但是观察组的下降值明显高于对照组（t=4.020，P=0.012）。结论 中晚期肺腺患者在顺铂联合长春瑞滨治疗方案的基础上积极应用白花蛇舌草注射液，临床效果明显，可降低化疗的不良反应，并能有效下调血清中miR-155的含量，临床中可以积极应用。

[关键词]白花蛇舌草注射液;中晚期肺腺癌;miR-155;临床疗效

[中图分类号] R737          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2020）01（b）-0020-03

The Role of Hedyotis Diffusa Injection in the Treatment of Advanced Lung Adenocarcinoma and Its Effect on Serum miR-155

TANG Hong-cheng， LUO Gang， HE Ping-hai， WU Wei-hua， LI Yan

Department of Oncology， Beijing Zhenguo Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine， Yizhuang， Beijing， 100176 China

[Abstract] Objective To investigate the clinical effect of adjuvant application of Herba Hedyotis extract in patients with advanced lung adenocarcinoma， and to observe its effect on serum miR-155. Methods Convenient selection eighty-two patients with advanced lung adenocarcinoma from January to December 2018 were enrolled in our hospital. They were divided into observation group （41 cases） and control group （41 cases）. The control group was treated with cisplatin combined with vinorelbine. The observation group was treated with Hedyotis diffusa injection on the above basis. The therapeutic effect was observed in two cycles， and the expression level of microRNA-155 （miR-155） in the serum before and after treatment was also considered. Results A total of 38 patients in the observation group and 38 patients in the control group were treated and observed. The total effective rate of the two groups （55.3% vs 28.9%） ，the difference was statistically significant （χ2=5.398， P=0.020）. There was a statistically significant difference between the two groups in the incidence of myelosuppression （26.3% vs 48.6%），（χ2=3.996， P=0.046） and vomiting III and IV （23.7% vs 55.3%），（χ2=7.930， P=0.005）. The expression of miR-155 in the serum of both groups decreased after treatment， but the decrease of the observation group was significantly higher than that of the control group （t=4.020， P=0.012）. Conclusion The patients with advanced lung adenocarcinoma are actively applied to the treatment of Herba Hedyotis extract on the basis of cisplatin combined with vinorelbine treatment. The clinical effect is obvious， which can reduce the adverse reactions of chemotherapy and effectively down-regulate the content of miR-155 in serum. It can be actively applied in clinical practice.

[Key words] Hedyotis diffusa injection; Advanced lung adenocarcinoma; miR-155; Clinical efficacy

肺腺癌临床常见的恶性肿瘤，化疗是重要的治疗方法，但是其疗效不确定，且不良反应多。白花蛇舌草注射液近年应用于肿瘤治疗中的药物，对提高化疗药物的敏感性及减少不良反应均有重要作用[1]。近年学者也观察到肺腺癌病变形成和进展时血清和内环境中形成较多的细胞因子[2]。微小RNA（miRNAs）是与肿瘤形成和进展相关的因子，其表达升高不仅促进肿瘤的进展，还对疗效判断及预后评估有重要价值[3]。该实验应用TCGA软件对肺腺癌患者血清中miRNAs的表达进行筛查，选择与肺腺癌关联性最强且可能与中药治疗相关的miR-155进行相实验。基于此，该实验应用前瞻性研究，方便选择2018年1—12月2共82例在该院诊治的中晚期肺腺癌患者，应用对照研究，观察在顺铂联合长春瑞滨（NP）方案基础上加用白花蛇舌草注射液治疗的效果及对血清中miR-155的影响，以期为临床治疗提供帮助，报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便收集在该院治疗的肺腺癌患者82例作为对象。纳入标准：①有病理学或细胞学证实符合肺腺癌的明确诊断，患者为中晚期;②有可测量的病灶;③无其他明显的严重疾病;④肝肾功能指标不超过正常值2倍;⑤白细胞4.0×109/L，血小板>100×109/L，无出血倾向;⑥体力状况尚好，KPS评分≥60分，无其他明显禁忌证。排除标准：①诊断不明确或病理类型中混有其它类型肿瘤;②临床病灶不可测量;③依从性差;④有严重的其他器官的内科疾病。该组中男44例，女38例，年龄40～88岁，平均﹙61.4±8.5﹚岁。按患者入院顺序编号，单号为观察组，双号为对照组，各41例。观察组男21例，女20例，年龄40～86岁，平均年齡﹙61.1±7.5﹚岁。对照组男23例，女18例，年龄41～88岁，平均年龄﹙61.7±8.9﹚岁。两组在性别、年龄等常规因素的比较中差异无统计学意义。研究经医院伦理委员会批准，患者或家属签定知情同意书。

1.2  治疗方法

对照组确诊后采用顺铂联合酒石酸长春瑞滨（NP）方案，应用经皮支气管动脉内灌注化疗术。酒石酸长春瑞滨注射液（规格：10 mg， 国药准字：H20067722），用量25 mg/m2，d1动脉灌注，21d一周期。注射用顺铂（冻干型，规格：20 mg， 国药准字：H20023460），用量75 mg/m2，d1动脉灌注，分别溶于0.9%的生理盐水250 mL中于第1天动脉灌注。观察组在上述基础上加用白花蛇舌草注射液（ 国药准字：Z22022101）肌内注射， 2次/d，每4 mL。积极对症处理相关并发症。以21 d作为一个周期。共治疗2个周期后观察疗效。

1.3  疗效评价标准

两组均在2个周期后进行评价，依据WHO实体瘤疗效评价新标准，即完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、无变化（NC）和进展（PD）。以CR和PR评定为有效，计算总有效率。

1.4  miR-155的检测

观察组患者于确诊后（治疗前）、治疗2个周期期结束后的1周内抽取3 mL空腹静脉血，3 000 r/min 离心20 min分离血清，-20℃冰箱中冻存备用。血清标本均于1个月内检测。miR-155的检测应用实时荧光定量PCR法。引物合成由上海吉玛科技有限公司完成。引物上游：5'-TACTGGTGGACGTTTAG-3'，下游：5'-TCATGCGCAAACCCTA-3'。U6为内参。引物上游：5'-GGAACAGAGAAAGAGC-3'下游：5'-TTGGAATTC AATTCCG-3'。应用TRIzol法提取总RNA，检测RNA浓度，cDNAs由TaqMan MicroRNA反转录试剂盒合成。miR-155试剂购自美国Initrogen公司。PCR循环参数：95℃ 10 min，循环1次;95℃ 30s，59℃ 30 s，72℃ 30s，共35个循环，72℃延伸7min。在60℃时收集信号。记录Ct值，通过2-ΔΔCt法计算目的基因的相对表达量。

1.5  统计方法

应用SPSS 17.0统计学软件进行数据分析， 计量资料用（x±s）表示，组间比较行t检验，计数资料用[n（%）]表示，组间比较行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  两组疗效比较

观察组38例（1例死亡，2例改变治疗药物，排除观察）、对照组38例（2例改变治疗药物，1例转院，排除观察）完成治疗及观察。观察组的总有效率明显高于对照组，见表1。

2.2  两组不良反应发生率的比较

两组在骨髓抑制及呕吐III和IV度的发生率比较中差异有统计学意义（P<0.05），见表2。两组在肝功能损害[2/38（5.3%） vs 3/38（7.9%），χ2=0.214， P=0.644]、肾功能损害发生率[3/38（7.9%） vs 4/38（10.4%），χ2=0.157， P=0.692]的差异无统计学意义（P>0.05）。

2.3  两组治疗前、后血清中miR-155变化的比较

两组治疗前血清中miR-155的表达差异无统计学意义（P>0.05），治疗后两组血清中的表达均下降，但是观察组的下降值更明显。见表3、图1。

3  讨论

肺腺癌是发生于肺泡上皮细胞的肿瘤，部分患者发现时即为中晚期，并伴有转移及胸腔积液，预后较差。标准的治疗方案对缓解症状及延缓肿瘤进展有重要意义。临床上常应用含铂的多药联合治疗方案为着选[4]，近年来顺铂联合长春瑞滨逐渐得到认可。顺铂起作用时与肿瘤细胞中的鸟嘌呤进行结合，使用DNA交联出现异常，引起其结构发生破坏，发挥杀灭肿瘤细胞的作用。长春瑞滨抗肿瘤作用是在细胞内经过核苷激酶作用转化，使DNA 合成终止、断裂直至细胞死亡，达到抗肿瘤的目的。但是常规化疗药物治疗的有效性及不良反应仍是临床需要解决的问题，治疗后机体的化学损伤也较明显。中药制剂的辅助治疗对对化疗效果起到增效的作用。

该实验结果显示应用白花蛇舌草地注射液后治疗的总有效率为55.3%，明显高于对照组的总有效率28.9%，差异有统计学意义（P<0.05），提示治疗效果明显。这与王露瑶等[5]观察到的白花蛇舌草注射液在肿瘤治疗中的总有效率为54.2%、对照组中的总有效率37.5%的结果相似。结果显示观察组在骨髓抑制III和IV度（26.3%）及呕吐III和IV度（23.7%）的发生率明显低于对照组（发生率分别为48.6%、55.3%），提示白花蛇舌草能减少化疗物治疗时对骨髓和消化系统的影响。白花蛇舌草是近年关注的与肿瘤治疗相关的药物，最早于《广西中药志》中有记录，药性味苦、寒、甘，且入心、脾、肝三经，药物具有解毒清热、利水消肿和止痛的作用。中药注射剂常用于恶性肿瘤的治疗[6-7]。肿瘤患者应用能减少毒副作用、安全、功效显著。白花蛇舌草对提高机体免疫力有明显作用，主要表现为其能提高荷瘤鼠细胞的免疫功能，提高B 细胞介导的体液免疫功能，使T细胞亚群的功能活化，也有研究认为白花蛇舌草能发挥荷瘤鼠抑瘤的作用，其中14.84 g/kg抑瘤作用最好[8]，并能使综合的免疫功能得到明显提升，使机体的抗肿瘤的作用增强。肿瘤形成和进展时局部肿瘤组织和血清中miR-155的表达均升高，该研究显示两组肺腺癌治疗前的表达量分别为﹙2.79±0.35﹚、﹙2.82±0.36﹚，这与龚星[9]通过实验发现肺癌患者血清中miR-155的表达量为2.16±0.85的结果相类似，而治疗后二组miR-155的表达量下降到﹙1.34±0.37﹚、﹙2.01±0.27﹚，此结果较龚星[9]研究中显示的正常人群中﹙0.74±0.36﹚的表达量要高，提示治疗可以下调血清中miR-155的含量。白花蛇舌草注射液应用组的下调效果更明显[观察组下降值为﹙1.45±0.29﹚，对照组下降值为﹙0.81±0.27﹚ ]，可以优化内环境和血清中细胞因子的调节环境，但是均未将miR-155的调节到正常范围。因此miR-155是重要的癌基因，特定的干预使其表达下调可能对控制肿瘤进展有一定作用，可以改变肿瘤患者的内环境，降低由miR-155等因子介导的级联反应，在细胞调节通路中抑制癌细胞生成和侵袭。也有学者认为白花蛇舌草对细胞因子的作用可能更多，如通过IGF-1和VEGF等信号途径抑制肿瘤的生长。当IGF-1下调后，其诱导的肿瘤细胞增殖减弱，细胞生长周期延迟，细胞增生障碍，有效控制肿瘤侵袭和播散[10]。

综上所述，中晚期肺腺患者在顺铂联合长春瑞滨治疗方案的基础上积极应用白花蛇舌草注射液，临床效果明显，可降低化疗的不良反应，并能有效下调血清中miR-155的含量，临床中可以积极应用。

[参考文献]

[1]  文雪梅， 陈瑛， 李婷，等. 白花蛇舌草对宫颈癌细胞增殖、凋亡及Ki-67表达的影响[J].中国老年学杂志，2017，37（3）：561-563.

[2]  Zhang Y， Zhao H， Zhang L. Identification of the tumor suppressive function of circular RNA FOXO3 in non small cell lung cancer through sponging miR 155[J].Mol Med Rep， 2018， 17（6）：7692-7694.

[3]  叶丽君， 喻长法， 赵肖丽. miRNA-223和miRNA-155在非小细胞肺癌患者血浆中的表达研究[J].中国预防医学杂志， 2019， 20（1）：63-67.

[4]  谢忠海， 沈琦斌， 李鸿伟，等.多西紫杉醇联合吉西他滨和顺铂治疗非小细胞肺癌的临床研究[J].中国临床药理学杂志， 2016， 32（11）：972-974.

[5]  王露瑶， 梁凌玲， 莫小强， 等.白花蛇舌草注射液抗肿瘤抗感染的临床探讨[J].世界最新医学信息文摘， 2017， 17（33）： 79-80.

[6]  江静， 肖刚， 侯俊明.基于CASPASE信号通路探讨白花蛇舌草调控胃癌凋亡的影响[J]. 四川中医， 2018， 36（3）：65-67.

[7]  杨弘，靳祎祎，林露敏.复方白花蛇舌草对肝癌细胞增殖和凋亡的影响[J].福建中医药， 2018， 49（4）：66-69.

[8]  覃明雄， 陈洪涛， 蔡丹昭， 等. 复方白花蛇舌草胶囊抗肿瘤作用的初步研究[J]. 广西中医药， 2019， 42（2）： 72-74.

[9]  龔星. 肺癌患者血清及组织中miR指标的变化分析[J]. 实用癌症杂志， 2015， 30（5）： 645-647.

[10]  Tas F， Bilgin E， Tastekin D， et al. Serum IGF-1 and IGFBP-3 levels as clinical markers for patients with lung cancer[J]. Biomed Rep， 2016， 4（5）：609-614.

（收稿日期：2019-10-23）

[作者简介] 唐洪成（1974-），男，满族，辽宁锦州人，硕士，中级，研究方向：恶性肿瘤治则及方药研究。