一例猪圆环病毒病继发链球菌的诊治

2020-05-12 12:52王佳茵吉尚雷
辽宁农业职业技术学院学报 2020年2期
关键词:圆环琼脂链球菌

王佳茵,李 波,吉尚雷,*

(1.辽宁农业职业技术学院,辽宁 营口 115009;2.盘锦市现代农业发展中心,辽宁 盘锦 124000)

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒引起猪的一种免疫抑制疾病,表现为猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)和皮炎肾病综合征(PDNS),引起母猪繁殖障碍[1]。圆环病毒会破坏机体的免疫系统,出现严重的消化系统、呼吸系统症状,病猪腹泻、呼吸困难、逐渐消瘦,因免疫抑制而导致疫苗接种失败进而继发细菌感染。链球菌是一种有35种血清型能够引起人畜共患的致病菌,如果猪圆环病毒病继发感染链球菌,将给养猪业带来巨大的经济损失,影响养猪业的健康发展[2]。

1 发病情况

辽宁地区某中等规模猪场,7~8日龄仔猪有咳嗽症状,断奶仔猪逐渐消瘦。母猪有咳嗽病史,但已好转,受胎率100%,产仔率较好,保育发病10%。免疫情况:14日龄免疫猪繁殖与呼吸综合征疫苗,21日龄免疫猪瘟疫苗,25日龄免疫猪伪狂犬病疫苗,30日龄免疫猪圆环病疫苗。2019年4月到辽宁农业职业技术学院辽宁动物健康养殖研究中心就诊。

2 临床症状

保育猪会出精神沉郁、食欲下降、体温升高、呼吸困难。一般双侧震颤,睡眠时症状缓解,部分严重者会引起死亡,母猪无明显症状。

3 剖检及病理变化

剖检送检50 d左右病死猪2头,肺组织呈弥漫性间质性肺炎,肺肿胀、变硬,肺边缘出现弥漫性出血,腹股沟淋巴结肿大,眼睑水肿。剖检可见淋巴结肿大,观察到肠系膜淋巴结水肿,见图1。

图1 剖检病变

4 诊断

4.1 临床诊断

通过对猪场生产情况、免疫程序、发病情况、临床症状和剖检变化的分析,初步判断该猪场感染圆环病毒并激发感染沙门氏菌。

4.2 实验室诊断

4.2.1 病原检测

无菌采取患病仔猪病变明显的淋巴结,肾、肺,扁桃体和脾等组织进行低温研磨,将上述病料采用OMEGA试剂盒提取总DNA,根据GenBank数据库已经发表的圆环病毒基因保守序列设计引物,进行RT-PCR扩增。将获得样品按照电压120 v、100mA条件电泳30min。

在紫外灯下观察电泳结果,结果显示样品在750 bp位置处有明显条带,与圆环病毒阳性对照孔位置一致(见图2),所以初步判定为圆环Ⅱ型病毒阳性,说明发病猪体内存在圆环病毒。

图2 猪圆环病毒PCR检测结果

4.2.2 链球菌分离培养

无菌操作采取未被污染的病料组织,在麦康凯琼脂、普通营养琼脂、血琼脂和HE琼脂平板上进行划线分离,在37℃恒温培培养箱中培养24h[3]。培养后在血琼脂培养基可见大量溶血环的菌落。涂片染色镜检可见球形或卵圆形,多数呈链状排列的革兰氏阳性菌,初步判定为链球菌,见图3。

图3 细菌分离培养

4.2.3 药物敏感试验

用30种标准抗生素对分离的链球菌进行药敏试验,按照抑菌圈直径<10 mm为耐药,抑菌圈直径10~15 mm为中度敏感,抑菌圈>15 mm为高度敏感。结果显示该菌株对头孢他啶、头孢曲松钠和哌拉西林高度敏感,对青霉素、阿莫西林、红霉素、庆大霉素和土霉素等6种抗生素产生耐药性。

5 结论

综上所述,本案例根据临床症状、剖检变化和实验室诊断,可以诊断为猪圆环病毒与链球菌并发感染。

6 小结

目前,圆环病毒病尚无特效的治疗药物,通常采取综合治疗方法[3]。且往往容易继发链球菌等细菌性疾病加重病情,因此,预防是关键,做好免疫接种,健康猪要接种PCV2灭活疫苗,要定期进行抗体水平监测,保证免疫效果[4]。针对本次疫情,建议发病严重的仔猪要进行扑杀焚烧深埋处理,切断传染源,防止疫情继续传播。治疗可采用黄芪多糖注射液和猪白细胞干扰素进行肌注,连续注射3 d。链球菌能够引起多种动物感染发病,尤其是II型链球菌毒性最强,自然界分布广泛。研究表明[5],链球菌感染成年猪发病后出现典型的临床症状不明显,造成的危害较小,新生仔猪和断奶仔猪感染后危害最大,发病率和死亡率最高。发病猪主要常见症状为败血症、脑膜炎和淋巴结肿胀,该病对我国生猪养殖业危害十分严重。链球菌属于革兰氏阳性菌,在药理学上,β-内酰胺类、大环内酯类和喹诺酮类等药物具有明显的杀菌作用,但药敏试验显示,青霉素、阿莫西林、红霉素、庆大霉素和土霉素等6种抗生素分离的链球菌无杀菌作用。调查猪场发现,该猪场在生产中主要使用青霉素、四环素类药物进行疾病的治疗和预防,造成耐药菌株的产生。建议猪场使用头孢曲松钠和哌拉西林交替用药进行链球菌的治疗。在今后的生产中,要合理使用抗生素,采取多种抗生素联合使用的措施,避免单一抗生素重复使用催生耐药菌株。猪场按照上述方案治疗后疫情得到控制,整群状态转好。

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