每年9-10月,浙江龙游等地的当年草鱼种经常会暴发草鱼出血病,俗称“十月草鱼瘟”,给草鱼种的养殖造成较大的危害。2019年10月初,浙江鱼老大农业科技有限公司的1口草鱼鱼种池塘出现大量死亡的情况,每天死亡1000多尾,经实验室检测确诊为草鱼出血病病毒并发维氏气单胞菌感染,经处理后取得了较好的效果,现介绍如下。
浙江鱼老大农业科技有限公司的1口草鱼鱼种塘,面积5亩,水深1.5米,共放养草鱼夏花6万尾。前期吃食较好,最多时每天投喂80千克饲料。9月初白露节气期间发生死鱼之后停料15天,从9月20日开始恢复投喂,每天喂40千克饲料,9月底开始每天有3~5尾草鱼死亡现象,发现有部分指环虫和锚头鳋,外泼杀虫剂加硫酸铜的第3天,死亡量迅猛增加,至10月3日,每天死亡增加到1000多尾。现场观察,病鱼规格在100克/尾左右,部分病鱼体表发红,尾鳍外周一圈发白,有明显烂鳃现象(图1),解剖发现肝脏土黄色,肠道被脂肪包裹,剥开发现肠道充血发红,附着在肠管上的脂肪也有发红(图2)。肠壁有弹性,肠内无食物,病鱼鳔壁充血。将病鱼组织用无菌袋加冰包送实验室检测。
图1 患病草鱼外表
图2 患病草鱼解剖
1.细菌检测 无菌操作,取肝、肾组织划线于TSA培养基,30℃培养24小时,培养基上有少量表面光滑湿润、向上隆起的乳白色圆形菌落,为革兰氏阴性杆菌。纯化培养后,经梅里埃VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定为维氏气单胞菌。
2.病毒检测 取病鱼的肝、脾、肾等内脏组织于无菌培养皿中,用无菌眼科剪剪碎,加入10倍体积(V/W)的DPBS(Sigma)转入玻璃均化器内并在冰浴下研磨成组织匀浆液,使用TakaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit试剂盒(TaKaRa)提取RNA,经反转录为病毒cDNA,以草鱼出血病病毒基因Ⅱ型引物(F1-TATGTCACAGCCAGAGGTGG, R1-AAATGCTNAGTACCATGTTCTGC)进 行PCR扩增,获得约590 bp的特异性条带,检测为草鱼出血病病毒阳性。
3.水质检测 经检测,水质指标基本正常,pH 8.2,氨氮0.3毫克/升,亚硝酸盐0.1毫克/升。
4.诊断 经临床检查和实验室检测,该病诊断为草鱼出血病,病原为草鱼出血病病毒感染,并发维氏气单胞菌的细菌感染。病因可能为草鱼种前期吃料过猛,生长太快,导致肝胰脏等代谢障碍严重,加上使用了硫酸铜等刺激性药物后,诱发草鱼出血病病毒的增殖而染病死亡。
1.治疗用药 由于发病比较严重,先外用有机酸、应激素等抗应激稳水,内服抗应激药物应激素,加上抗病毒的板蓝根、金银花,增强免疫的黄芪多糖及保肝胆中药,连续投喂3天,缓解鱼体压力,提高病鱼体质,然后再添加敏感抗菌药物10%恩诺沙星继续内服3天,停两天后继续内服上述中药5天。
2.效果 10月3日死亡1000多尾,10月4日开始用药,当天死亡800多尾,10月9日死亡30多尾,到10月15日仅死亡3尾,之后未见死亡。
1.草鱼出血病的流行规律 草鱼出血病主要在水温为20~30℃的季节发病,尤其是水温为25~30℃时发病最为严重。草鱼出血病全年具有两个明显的高峰阶段:第一个高峰期是5月底-7月初,此时水温超过25℃,主要危害养殖2龄草鱼,即前一年春季投放的夏花鱼种经过一年饲养并越冬以后的春片鱼种,造成大量死亡,该阶段的草鱼以细菌性感染为主,同时有病毒的介导,完全以细菌性治疗,时间很长,在江浙一带直至出梅以后才会停止;第二个高峰期是9-10月,此时水温下降到30℃以下,主要侵害当年的草鱼种,规格为6~10尾/千克及100多尾/千克,规格越大死亡率越高,直至水温下降至20℃以下才会停止。
2.对十月草鱼瘟的控制 十月草鱼瘟以病毒感染为主,有时会有细菌的并发感染。虽然对病毒控制缺乏有效的药物,但如果能够充分调动鱼体自身的免疫功能,利用中草药提取物中有效成分对鱼体进行微调节,使鱼体维持住自身的平衡状态,那即使有病毒感染也不一定会发病,发病了也能控制。因此,我们通过在饲料中添加抗应激、增强免疫、保肝胆的中药,在水体中进行抗应激和有机酸解毒,最终控制了病情。3.对鱼病的防治思考 我们面对多数的鱼病时,往往先考虑杀虫消毒,以为把病原杀了,鱼病就会好。其实一次鱼病的产生,病毒、细菌、寄生虫的感染是次发性的,最主要的病因是鱼类机体的免疫力下降。同时,不合理地杀虫消毒用药,还是促进疾病暴发的一个诱因,特别是一些刺激性的杀虫药物,如养殖户喜欢用的硫酸铜,经常因为硫酸铜药物自身的刺激导致鱼体黏液脱落、杀藻导致的缺氧等诱发病毒、细菌性疾病的发生。其他如天气不稳定、气温变化大,甚至投喂量增加过快也会诱发草鱼出血病的发生。那么,是什么原因导致鱼体的抗病力下降?从检查患病鱼体发现,病鱼几乎都出现肝脏发黄变脆或肿大、体内油脂堆积出现的油包肠的问题,天气一变化就会因刺激出现发病死鱼的现象。究其原因应该是与鱼体的营养代谢出现问题有关,由于草鱼鱼种塘密度高,饲料投喂过多,部分鱼抢食凶猛,生长过快,而表现明显的肝脏受损、脂肪堆积等病理症状,加之缺乏有针对性开展鱼类的肝肠保健工作,特别受2019年鱼价偏低的影响,预防保健工作都被忽略了,出现正常时大量投喂、一有发病死亡又采取长时间的停料措施,导致鱼的体质下降。当环境出现大的应激变化时,鱼体免疫系统出现崩溃,死亡就会激增。而此时,仍采用单一的外用杀虫消毒,只会雪上加霜。
因此,在防控鱼病的时候,首先是缓解鱼的自身体质薄弱的一面,适当停料,用解毒稳水的过硫酸氢钾、有机酸、腐植酸钠以及使用抗应激的药物如应激素、补充营养的维生素、修复肝胆的保肝中草药等外泼。其次内服以促代谢、抗病毒药物刺五加、柴胡、板蓝根末等。在治疗过程中考虑病毒和细菌的同时感染,坚持先调理再处理病毒和细菌,等鱼有部分恢复后,适当增加投喂抗菌药物。虽然时间可能较长,但总体还是可控的。