台山地区2 260例妊娠中期唐氏筛查及产前诊断的结果分析

杨月星

【摘要】 目的：探讨本地区孕中期唐氏筛查结果对胎儿染色体异常及不良妊娠结局的影响。方法：对2018年1月-2019年6月2 260例来本院做产前检查的孕中期妇女（15～20+6周）进行唐氏筛查，并对筛查结果高风险孕妇进行羊水细胞染色体核型分析。观察不同年齡段孕妇检查结果以及羊水细胞异常染色体核型分布情况，并跟踪随访妊娠结局。结果：在受检的2 260例孕中期妇女中，高风险检出161例（7.12%），且21-三体综合征高风险检出率随着年龄的增加升高（字2=34.364，P=0.000）。参与羊水细胞染色体核型分析检查的孕妇共171例，共检出异常染色体核型39例，检出率为22.81%。高风险组孕妇不良妊娠结局的发生率为16.77%，高于低风险组的1.19%，差异有统计学意义（字2=15.629，P=0.000）。结论：唐氏筛查作为一种无创性的产前诊断方法，对异常染色体核型和不良妊娠结局的预估具有重要的作用。

【关键词】 孕中期 唐氏筛查 染色体核型分析 妊娠结局

Analysis of Downs Screening and Prenatal Diagnosis in 2 260 Cases of Mid Pregnancy in Taishan Area/YANG Yuexing. //Medical Innovation of China， 2020， 17（10）： -109

[Abstract] Objective： To explore the effect of Downs screening results on fetal chromosomal abnormalities and adverse pregnancy outcomes. Method： From January 2018 to June 2019， 2 260 pregnant women （15-20+6 week） who came to our hospital for prenatal examination were screened for Downs disease. Chromosome karyotype analysis was performed in high-risk pregnant women. The results of Downs screening and karyotype analysis of pregnant women of different ages were observed. The pregnancy outcomes of 2 260 pregnant women were followed up. Result： 161 high-risk pregnant women （7.12%） were detected in 2 260 pregnant women. The high risk detection rate of trisomy 21 syndrome increased with age （字2=34.364， P=0.000）. A total of 171 pregnant women participated in the karyotype analysis of amniotic fluid cells， and 39 abnormal karyotypes （22.81%） were detected. The incidence of adverse pregnancy outcome in high-risk group was 16.77%， higher than that in low-risk group （1.19%） （字2=15.629， P=0.000）. Conclusion： As a noninvasive prenatal diagnosis method， Downs screening plays an important role in the prediction of abnormal karyotype and adverse pregnancy outcome.

[Key words] Mid pregnancy Downs screening Karyotype analysis Pregnancy outcome

First-authors address： Taishan Peoples Hospital， Taishan 529200， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.10.026

唐氏综合征是指胎儿染色体异常导致的出生缺陷，常表现智力低下、发育迟缓、脏器发育不全、合并多种畸形等，不仅严重影响患者生存质量，对家庭、社会也带来沉重的精神压力及经济负担[1-2]。目前医学界对于唐氏综合征尚无明确、有效的预防及治疗措施，因此，必要的产前筛查及诊断尤为重要，必要时建议采取人工终止妊娠，以防新生儿出生缺陷。唐氏筛查主要是在孕中期采集母体血清，检测甲型胎儿蛋白（AFP）、人绒毛膜促性腺激素（β-hCG）、游离雌三醇（uE3）含量，并结合孕妇年龄、体重、孕周等方面来评估危险系数[3]，同时对于高危产妇行羊膜穿刺术提取羊水细胞进行染色体核型分析以进一步确诊。本研究通过分析本地区孕中期妇女唐氏筛查结果并深入理解唐氏综合征的发生，为如何提高产前诊断及降低出生缺陷提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年1月-2019年6月来本院做产前检查的孕中期妇女2 260例。（1）纳入标准：①孕周15～20+6周;②在本院做产前检查且有意在本院分娩;③对本研究检查项目知情同意;④患者及家属依从性高。（2）排除标准：①精神疾病或严重意识障碍症患者;②心、脑、血管、肝肾等器官或系统患严重疾病者;③资料缺失或无法随访妊娠结局者。本组2 260例孕妇中，年龄21～42岁，平均（29.14±5.27）岁;初产妇1378例，经产妇882例。本研究已获得本院伦理委员会的审核批准。

1.2 方法

1.2.1 唐氏筛查 采集本组2 260例孕中期妇女在清晨空腹状态下静脉血清3 mL，在3 000 r/min条件下进行离心处理，离心后分离血清于-4 ℃环境中保存。12 h内使用化学发光法检测血清中AFP、总hCG、uE3的含量，将检测结果结合孕周、年龄、体重、妊娠史等以Prisca软件进行综合評估21-三体综合征、18-三体综合征、神经管畸形的风险值，21-三体综合征结果提示≥1/270为高风险，18-三体综合征结果提示≥1/350为高风险，神经管畸形结果提示AFP>2.5 MOM值为高风险[4-5]。

1.2.2 羊水细胞染色体核型分析 对于唐氏综合征检测结果阳性的孕妇建议进行羊水细胞染色体核型分析，明确检查方法、风险、注意事项等，经得孕妇及家属同意后方可进行。B超定位后，于无菌条件下经腹壁行羊膜腔穿刺术，取羊水20 mL，置于2支离心管中，每支各10 mL，1 500 r/min离心处理10 min后，摒弃上清液，接种于双线羊水细胞培养基中，在37 ℃、5%CO2培养箱中培养5～7 d，密切观察细胞生长情况，当羊水细胞贴壁生长旺盛，镜下可见多个克隆时，进行传代、收获制片、G显带等操作，然后上机扫片进行核型分析。一般而言，计数30个分裂相，分析5个核型，如有疑似异常核型，则观察并计数50～100个分裂相。

1.3 观察指标 比较不同年龄段孕妇21-三体综合征、18-三体综合征、神经管畸形的高风险率，并观察羊水细胞异常染色体核型的分布情况。对本组2 260例孕妇进行跟踪随访妊娠结局，统计产前诊断高风险及低风险孕妇不良结局的发生情况。

1.4 统计学处理 本研究采用SPSS 21.0统计软件进行数据处理，计数资料以率（%）进行统计描述，组间比较采用字2检验、Friedman秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同年龄段孕妇产前检查结果比较 在受检的2 260例孕中期妇女中，21-三体综合征高风险检出125例（5.53%），18-三体综合征高风险检出13例（0.57%），神经管畸形高风险检出23例（1.02%），总检出161例（7.12%）。其中21-三体综合征高风险检出率随着年龄的增加而升高，对不同年龄段孕妇21-三体综合征高风险率进行趋势性字2检验发现，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 羊水细胞异常染色体核型的分布情况 同意参与羊水细胞染色体核型分析检查的孕妇共171例，分别是21-三体综合征高风险115例，18-三体综合征高风险13例，神经管畸形高风险20例，高龄（年龄≥35岁）孕妇23例。共检出异常染色体核型39例，检出率为22.81%，其中15例21-三体综合征，4例18-三体综合征以及20例其他异常染色体核型。在39例异常染色体核型中，有27例来源于21-三体综合征高风险孕妇，占比69.2%。见表2。

2.3 产前诊断高风险与低风险孕妇不良妊娠结局发生情况比较 高风险组孕妇不良妊娠结局的发生率为16.77%，高于低风险组的1.19%，差异有统计学意义（字2=15.629，P=0.000）。见表3。

3 讨论

引发唐氏综合征的因素较多，如高龄孕妇、不良孕史、地域及种族差异、生活环境、卵子老化等均与唐氏综合征存在一定程度的关联[6-7]。由于当前针对唐氏综合征尚无明确的临床治疗方法，导致家庭、社会对唐氏综合征患儿需要付出大量的人力、物力、财力[8]。唐氏综合征产前筛查是诊断唐氏综合征的有力手段，主要包括孕早期颈项透明层（NT）及孕中期唐氏筛查。近年来，无创产前基因检测（NIPT）技术在产前诊断中逐渐被报道[9-10]，其主要是通过对母体静脉血血浆中游离的胎儿DNA片段进行测序及生物信息分析，得到胎儿的遗传信息，具有较高的灵敏度，但是由于操作复杂、对专业性以及设备要求高、受父母遗传因素干扰等原因，目前尚未得到广泛应用。在唐氏综合征产前筛查中，主要的血清学指标为AFP、β-hCG、uE3，但是在孕早期（10～13+6周），AFP、β-hCG对唐氏综合征的检率较低，也有学者指出，在此基础上结合NT检查，有利于提高孕早期唐氏综合征的检出率[11]。本研究主要采取了孕中期的三联筛查法（AFP+β-hCG+uE3），该方法在国内的普及率较高，操作方便，且能获得较为理想的筛查结果。本研究通过采集台山地区2260例孕中期妇女静脉血清，分别对AFP、β-hCG、uE3进行检测，并结合孕周、体质量、生活习惯、疾病、年龄等情况进行评估，结果显示，高风险检出率为7.12%，与既往检出率相符[12]。其中21-三体综合征高风险检出率随着年龄的增加而升高（P<0.05），这可能与卵细胞老化、分裂不均等或异常卵子受孕有关，母体生殖细胞在进行减数分裂时，染色体不分离而导致胎儿宫内发育异常。AFP是胎儿的一种特异性球蛋白，可预防胎儿受到母体排除，母体血清AFP主要来源于羊水和胎血，在妊娠早期，母体血清AFP含量较低，随着孕周增加逐渐升高，若AFP过低则可能提示胎儿脏器发育异常[13]。β-hCG是由胎盘细胞合成的人绒毛膜促性腺激素，女性在受孕后，hCG进入母体血清，含量逐渐升高，于孕中期左右保持稳定，怀有唐氏综合征胎儿的母体β-hCG往往呈现升高势态[14]。尽管孕中期唐氏筛查是产前诊断唐氏综合征较为普遍的方法，但由于其是通过结合孕妇综合因素进行评估的一个风险值，影响因素较多，误差较大，且无法直接确诊。因此，对于唐氏筛查高风险的孕妇，通常建议进行羊水细胞染色体核型分析，以进一步确诊。

羊水细胞染色体核型分析主要是通过羊膜穿刺术采集羊水细胞经培养后进行核型分析，能准确了解胎儿染色体数目、结构，灵敏度较高[15]。一般临床上对于唐氏筛查高危孕妇、高龄孕妇（年龄≥35岁）建议做染色体核型分析检查，有利于准确筛查宫内先天愚型胎儿，但是弊端在于其属于有创检查，羊膜穿刺可能导致流产或宫腔感染而引发不良事件的发生[16-17]。这也是本研究唐筛高危161例，高龄孕妇183例，而参与羊水细胞染色体核型分析检查的总共171例的原因，部分孕妇对于产前有创检查存在抵抗心理，对胎儿宫内发育异常存在侥幸心理。另外，从本研究羊水细胞染色体核型分析结果来看，共检出异常染色体核型39例，检出率高达22.81%，且未发生流产、宫内感染等不良事件。从染色体核型分析结果来看，不仅可以发现胎儿染色体数目异常，如21-三体、18-三体、47，XXY等，同时对于发现胎儿染色体结构异常也有较高的敏感性，包括易位、倒位、嵌合、双随体等结构，这也说明对于高危孕妇、高龄孕妇进行羊水细胞染色体核型分析的必要性，同时也提示唐氏筛查对于预估染色体疾病具有一定的价值。刘洁等[18]通过研究1 837例不同产前诊断指征与胎儿染色体异常的关系，提出高龄孕妇、唐筛高危孕妇、超声异常孕妇、无创DNA高危孕妇均应该进行羊水细胞染色体核型分析，以减少染色体疾病患儿的出生。另外，本研究通过跟踪随访唐筛高风险孕妇及低风险孕妇妊娠结局发现，高风险组不良妊娠结局的发生率显著高于低风险组（P<0.05），由此可以看出，唐氏筛查结果不仅对胎儿染色体检查有一定的指导作用，而且高风险孕妇与低风险孕妇不良妊娠结局也存在明显差异，这与Zeng等[19]研究结果相一致。同时，笔者观察到，在低风险组发生不良妊娠结局的25例孕妇中，唐筛低风险的高龄孕妇有11例，占比44%，这也再次呼应了上述高龄产妇建议做胎儿染色体检查的结论。另外，值得注意的是，在本研究5例人工引流的孕妇中，仅有1例来自高龄孕妇，这可能是因为高龄孕妇妊娠率相对较低，对胎儿的珍惜度较高。有学者指出，不良妊娠结局与胎儿染色体异常有密切的关系，胎儿染色体异常导致胎盘功能障碍，从而影响宫内胎儿的正常发育，同时也可能导致胎盘早剥、羊水过多等并发症[20-21]。