破铜钱药材的生药学鉴别研究*

王仕梅，徐 梅，周雅雪，严福林，魏升华

(贵州中医药大学 药学院，贵州 贵阳 550025)

破铜钱来源于牻牛儿苗科植物东亚老鹳草GeraniumnepalensisSweet. var.thubergii(Sieb.et Zucc.)Kudo的干燥全草[1]，为尼泊尔老鹳草的变种，民间作为药用的老鹳草多指老鹳草属植物。本属全世界约400种，据《中国植物志》[2]记载我国约55种和5变种，主要分布于西南贵州、云南的内陆山地和温带落叶阔叶林区，多地本草不乏记载。《滇南本草》[3]记载：老鹳草用于“祛诸风皮肤发痒，筋骨疼痛，手足痉挛，麻木。”《纲目拾遗》[4]谓：“祛风，伸筋骨，通经络，治损伤，麻木，浸酒常饮。” 《中国药典》[5]2015版一部收载牻牛儿苗、老鹳草、野老鹳草以供药用。

老鹳草属植物作为破铜钱之名载于《贵州民间方药集》[6]，为贵州苗族、布依族等习用药物。用于治疗跌打损伤，刀伤出血，益肺气。据文献查阅与民间调查，贵州民间常用白酒浸泡老鹳草，制成药酒以外擦或内服，治疗肩关节周围炎、风湿性关节炎、跌打损伤、坐骨神经痛等，疗效显著。亦有用于治疗黄疸、痘疹疥癞、痢疾等疾病。破铜钱为贵州省少数民族用药，收载在2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》中。目前有关破铜钱的研究报道较少，主要集中在化学成分[7-11]及总黄酮工艺优化[12-14]方面，尚未见生药学鉴别方面的报道。鉴于此，笔者对破铜钱的外观性状、显微特征、薄层色谱进行了研究，以期为破铜钱药材的鉴定及质量控制提供理论依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器与试剂

LaiKaDMi1显微镜(莱卡显微系统(上海)有限公司)、GoodLooK-1000薄层色谱成像系统(上海科哲生化科技有限公司)、万分之一电子分析天平(上海佑科仪器仪表有限公司，YS1609256)、HH-6数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司)、DFT50A-中草药粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司)。

1.2 试药

山奈酚对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，S-014-160708，HPLC>98%)，5%三氯化铝溶液、10%硫酸、无水乙醇、乙酸乙酯、甲苯、甲酸(均为分析纯)，硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂分厂、批号20180115)，水为实验室自制纯水。

1.3 材料

所用样本来至于贵州省贵阳市、龙里县、盘州市、威宁县、水城县等不同地区野外采集的药材样品。由贵州中医药大学药学院魏升华教授鉴定为东亚老鹳草GeraniumnepalensisSweet. var.thubergii(Sieb.etZucc.)Kudo的干燥全草。凭证标本存放于贵州中医药大学中药材种植(养殖)及加工研究所。具体药材样品来源见表1。

表1 样品信息

2 方法与结果

2.1 性状鉴别

破铜钱茎纤细，长10～50 cm，节微膨大。表面灰绿色或紫红色，有纵沟，被茸毛。质脆，断面黄白色，有的中空。叶具长柄，叶片卷曲皱缩，质脆易碎，完整叶片展平后呈掌状3～5深裂，两面被茸毛。5个分果环绕中轴组成椭圆形蒴果。种子椭圆形，暗褐色。药材形态图详见图1。

图1 破铜钱原植物(A)、药材图(B)Fig.1 Plants (A) and medicinal materials (B) of Herba Geranii

2.2 显微鉴别

根横切面：1)木栓层由类长方形细胞3～4列组成，皱缩，最外层颜色深，栓内层由类方形细胞1～2列组成，较大；2)皮层甚宽，占根部2/3，由类圆形薄壁细胞数列组成，簇晶散在，许多淀粉粒分布在整个根部细胞中；3)韧皮部窄；4)不明显束中形成层；5)韧皮射线窄；6)木质部中导管集中分布于韧皮部下方，呈二原型分布。见图2。

图2 破铜钱根横切面显微图Fig.2 Microscopic image of the transverse section ofthe root of Herba Geranii

茎横切面：1)表皮由1列类方形细胞组成；2)皮层由较大的类圆形细胞5～6列组成；3)中柱鞘由壁厚且木化的纤维2～4列组成连续的环层；4)维管束外韧型10个，位于外侧的5个较小，淀粉粒分散在维管束四周；5)髓部由类圆形薄壁细胞组成。见图3。

叶横切面：1)表皮：上表皮和下表皮各由1列类方形细胞组成，上表皮细胞较大。主脉处各有1列厚角组织分布在上下表皮内侧。2)叶肉：异面型。栅状组织由1列排列整齐的宽长方形细胞组成。海绵组织由排列疏松的类圆形细胞3～4列组成。簇晶分布于栅状细胞。3)主脉：维管束外韧型。木质部位于上方，排成新月形。见图4。

图3 破铜钱茎横切面显微图Fig.3 Microscopic image of the transverse section of the stem of Herba Geranii

图4 破铜钱叶横切面显微图Fig.4 Microscopic image of the transverse section of the leaf of Herba Geranii

叶的表面观：叶的上下表皮细胞垂周壁深波状弯曲。非腺毛多为单细胞，少数2～3细胞，长67～420 μm，直径8～20 μm。腺毛多见，头部单细胞，长圆形或类圆形，直径5～16 μm，腺柄1～3细胞。气孔不定式或不等式，副位细胞4～6。见图5。

图5 破铜钱叶上表皮(A)和下表皮(B、C)显微图Fig.5 Microscopic images of upper (A) and lower (B， C)epidermis of Herba Geranii leaves

粉末：本品粉末呈黄褐色或黄绿色。1)非腺毛：平直，单细胞，有的稍弯曲，易破碎。壁具疣状突起。短的非腺毛较多。2)腺毛：头部单细胞，椭圆形或长圆形。柄2～3个细胞，有的弯曲。3)簇晶：多成群存在。4)导管：螺纹和网纹导管。5)淀粉粒：圆形、椭圆形、类圆形。脐点线状，层纹不明显。多单粒。见图6。

图6 破铜钱粉末图Fig.6 Powder diagram of Herba Geranii

2.3 薄层色谱鉴别

2.3.1 供试品溶液的制备

精密称取本品粉末2 g，加80%乙醇80 mL，超声提取1 h，滤过，加5 mL 10%H2SO4水浴挥干，用1 mL乙醇溶解，作为供试品溶液。

2.3.2 对照品溶液的制备

精密称取对照品山奈酚6 mg，加乙醇制成浓度为0.6 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。

2.3.3 鉴别方法

按照(《中国药典》2015年版四部通则0502)[7]薄层色谱法试验，吸取对照品溶液、供试品溶液各1 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯∶甲苯∶甲酸(5∶4∶1)溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%AlCl3显色，在105℃下烘2 min，放冷，置365 nm下检视，供试品与对照品在同一位置上呈相同颜色的斑点。结果见图7。

图7 破铜钱薄层色谱图Fig.7 Thin layer chromatography (TLC) of Herba Geranii

3 小结及讨论

本研究对6批破铜钱药材显微特征和薄层鉴别进行了研究，破铜钱根的主要鉴别特征为：木栓层由3～4列类长方形细胞组成，皱缩，皮层甚宽，占根部2/3，由数列类圆形薄壁细胞组成，含有簇晶。韧皮部较木质部小。木质部呈二原型分布。茎的主要鉴别特征为：表皮由1列类方形细胞组成，皮层由较大的类圆形细胞5～6列组成。中柱鞘由壁厚且木化的纤维2～4列组成连续的环层。维管束外韧型10个，位于外侧的5个较小，髓由类圆形薄壁细胞组成，有胞间隙。叶的主要鉴别特征为：上表皮和下表皮各由1列类方形细胞组成，上表皮细胞较大。叶为异面叶，栅状组织由1列排列整齐的宽长方形细胞组成。海绵组织由排列疏松的类圆形细胞3～4列组成。簇晶分布于栅状细胞。维管束外韧型。木质部位于上方，排成新月形。叶表皮的主要鉴别特征为：上表皮无气孔，下表皮有气孔，且腺毛与非腺毛较上表皮多。薄层色谱法研究考察了不同展开剂对薄层鉴别的影响，以乙酸乙酯∶甲苯∶甲酸(5∶4∶1)溶液为展开剂，6批不同产地破铜钱样品与标准品(山奈酚)在相应的位置上显相同的斑点且斑点清晰，重复性好。

本研究采集了6 批不同产地的样品进行详细的对比观察，并用现代仪器来研究药材性状、显微特征以及薄层特征，结果具有充分的代表性和准确性，可为鉴别及制定破铜钱药材质量标准提供依据。