不同病情进展慢性HBV感染患者外周血乙肝病毒标志物及HBV DNA定量水平的变化分析

薛峰，薛芬

（1.南阳市宛城区疾病控制中心体检科，河南 南阳473000；2.南阳市第一人民医院理疗康复科，河南 南阳 473000）

乙型病毒肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的，以肝脏炎性病变为主的传染病[1]。临床诊断主要依赖于血清特异性抗原抗体的定性检测及HBVDNA的定量检测[2,3]。慢性HBV感染临床转归呈现多样性，包括：慢性化及重症化，慢性化表现为携带者、慢性乙型肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌等[4,5]。重症化表现为重症肝炎、肝衰竭等。不同病情进展的慢性HBV感染患者的临床特点及实验室辅助检查指标不尽相同[6]。为探讨不同病情进展慢性HBV感染患者外周血乙肝病毒标志物、HBV-DNA定量水平变化及其临床意义，本研究选择我院2017年1月-2018年12月收治的102例不同病情进展的慢性HBV感染者为研究对象，比较乙肝病毒标志物及HBV-DNA定量水平，以阐明慢性乙型肝炎病毒感染的临床规律。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院2017年1月-2018年12月收治的102例不同病情进展的慢性HBV感染者为研究对象，其中肝癌患者26例（A组），肝硬化24例（B组），慢性乙型肝炎 25例（C组），慢性HBV携带者27例（D组）。A组男16例，女10例；年龄 20~75岁，平均年龄（52.85±6.53）岁。 B 组男15例，女 9例；年龄 21~75岁，平均年龄（53.15±6.58）岁。C组男16例，女9例；年龄20~75岁，平均年龄（53.08±6.52）岁。 D组男17例，女12例；年龄 21~75岁，平均年龄（53.12±6.54）岁。 四组患者性别、年龄等基础资料比较，差异无统计学意义。

1.2 纳入、排除标准 纳入标准：⑴符合肝硬化、慢性乙型肝炎、肝癌临床诊断标准；⑵HBV-DNA载量检测阳性；⑶血清乙肝病毒标志物检测阳性；⑷对研究知情同意。

排除标准：⑴存在心、肾、肺等其他脏器严重疾病；⑵无法同时接受乙肝病毒标志物与HBVDNA检测；⑶存在其他非HBV病毒感染；⑷妊娠及哺乳期女性。

1.3 研究方法 乙肝病毒标志物检测。采用免疫化学发光免疫分析法检测HBV血清标志物，包括：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。试剂购自北京万泰生物药业有限公司。采用美国BIO-TEKELX800全自动酶标仪检测。严格按照试剂盒操作说明操作。

HBV-DNA检测。采用实时荧光定量PCR检测，仪器型号为Roche LightCycle 480。试剂购自湖南圣湘生物科技有限公司。

生化指标检测。采用美国贝克曼AU-680型全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。

1.4 统计学分析 统计学分析采用SAS9.3统计学软件,多组间计量资料的比较采用单因素方差分析。组间比较采用LSD-t检验。计量资料的相关性分析采用Pearson相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组患者外周血乙肝病毒标志物水平比较四组 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb 水平差异均有统计学意义（P<0.05）。A组HBsAg含量高于B、C、D组。C组HBeAg含量高于A、B、D组。A组HBeAb含量高于B、C、D组。C组HBcAb含量高于A、B、D 组（P<0.05）。 见表 1。

表1 四组患者外周血乙肝病毒标志物水平比较

2.2 四组患者HBV-DNA定量水平比较 A组HB V-DNA含量均高于B、C、D组（P<0.05）。 A组HB V-DNA 含量高于 B、C、D 组 （P<0.05）。 B、C、D 组HB V-DNA含量差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

2.3 四组血清ALT、AST水平比较 四组ALT、AST水平差异有统计学意义（P<0.05）。A组ALT、AST水平显著高于 B、C、D 组（P<0.05）。 C 组 ALT、AST水平显著高于B、D 组（P<0.05）。 B组ALT、AST水平显著高于D组（P<0.05）。见表3。

表3 四组血清ALT、AST水平比较

2.4 慢性乙型肝炎患者HBV血清标志物与HBVDNA的相关性 慢性乙型肝炎患者HBV-DNA水平与 HBsAg、HBeAg水平呈正相关 （r=0.458，r=0.473，P<0.05）。 HBV-DNA水平与HBeAb水平呈负相关 （r=-0.328，P<0.05）。 HBV-DNA 水平与HBcAb 水平无相关性（r=-0.068，P<0.05）。

3 讨论

近年来，随着检验医学技术的不断发展，实验室对HBV感染的诊断技术逐渐增多[7]。目前临床常用的检测HBV感染的技术包括：血清标志物检测、核酸检测、HBV基因型、显微镜检查等[8-10]。多种指标的联合应用,使HBV感染的敏感性、特异度显著提升。HBV血清标志物、HBV-DNA载量、肝功能指标的联合检测为体内HBV复制活跃程度、传染性强弱的判断依据之一[11]，对临床诊断、治疗HBV感染均具有重要的临床意义。

本研究对不同病情进展的HBV感染者分别进行血清乙肝病毒标志物、HBV-DNA载量及肝功能检测。以期为乙型肝炎、肝硬化、肝癌的临床特点提供理论依据。乙肝病毒标志物检测结果显示，四组 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb 水平存在显著差异。肝癌组HBsAg含量高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组、慢性HBV携带者组。慢性乙型肝炎组HBeAg含量高于肝癌组、肝硬化组、慢性HBV携带者组。肝癌组HBeAb含量高于肝硬化组、慢性乙型肝炎组、慢性HBV携带者组。慢性乙型肝炎组HBcAb含量高于肝癌、肝硬化、慢性HBV携带者组（P<0.05）。由于HBsAg阳性为HBV感染的标志,但HBsAg不含病毒核酸成分,主要组成乙肝病毒的外壳部分。HBsAg浓度与肝内共价闭合环状DNA（cccDNA）及肝内HBV-DNA水平明显相关[12-14]。肝癌组中HBsAg水平最高，其次为肝硬化、乙型肝炎、慢性HBV携带者，提示随着患者病情加重，病毒复制活跃程度明显增加,而病毒活跃程度反过来促进病情进展。HBeAg为人体感染HBV后，跟随HBsAg出现的第2个血清学抗原标志物[15]，在乙肝活动期检出率升高,提示肝细胞存在明显的损伤,患者有很强的传染性[16]。慢性乙型肝炎组HBe Ag含量明显高于其他组,与慢性乙型肝炎的传染性强有着密切的关系。HBeAb为机体受HBeAg刺激产生的相应抗体，既往的研究认为[17]，抗-HBe阳性表示体内无HBV存在，无传染性，为预后良好的标志，但有部分患者抗-HBe阴性，因HBV基因存在变异，病毒仍可复制，甚至可出现病情加重[18]。本研究中A组、D组抗-HBe水平均较高，具体原因还有待进一步研究。HBcAb多在HBsAg出现后3～5周开始产生，此时HBsAg已经消失，HBsAb尚未转阳。HBcAb检出提示乙肝病毒正在复制[19]。C组 HBcAb含量高于 A、B、D组，A组HBcAb含量较其他组低，说明随着病情进展HBV复制能力有所改变。肝癌组中ALT、AST水平明显高于其他组，HBV-DNA载量也高于其他组,提示随着病毒复制活跃程度的增加,肝损伤程度也逐渐增加[20]。

进一步观察慢性乙型肝炎患者血清乙肝病毒标志物与HBV-DNA载量的相关性，结果显示，慢性乙型肝炎患者HBV-DNA水平与HBsAg、HBeAg水平呈正相关，慢性乙型肝炎患者HBeAb水平与HBV-DNA载量呈负相关，HBV-DNA水平与HBcAb水平无相关性。说明将HBeAg与HBeAb定量水平与HBV-DNA载量结合起来，分析病毒活跃程度，可有效判断病情进展。

综上所述，不同病情进展的慢性HBV感染者外周血乙肝病毒标志物水平与HBV-DNA水平存在相关性,两者结合检测可作为病情监测的重要指标。