治疗剂量的地噻咪松对雏鸭生长性能及抗氧化能力的影响

杜海江

摘要    选择健康的雏鸭为试验对象，按照完全随机抽样的方法分组成2组，每组15只雏鸭，每天在其饮水中添加治疗剂量的地噻咪松（0.05 mg/只），分期对雏鸭进行称重并对其全血进行生长激素和抗氧化能力的测定，研究治疗剂量的地噻咪松对雏鸭生长性能、雏鸭抗氧化能力、生长激素的影响。结果表明，添加治疗剂量的地噻咪松能较显著地提高雏鸭的生长性能、血清总抗氧化歧化酶活性、生长激素浓度（0.01

关键词    雏鸭;地噻咪松;生长性能;抗氧化能力

中图分类号    S858.32        文献标识码    A

文章编号   1007-5739（2020）06-0191-02                                                                                     开放科学（资源服务）标识码（OSID）

地噻咪松又名氟美松、氟甲强地松龙、德沙美松，是糖皮质类激素[1]。地噻咪松是临床上常用的药物之一，地噻咪松不仅具有强的抗炎、免疫抑制及抗过敏活性，且影响碳水化合物代谢，在一定程度上也影响蛋白质和脂肪代谢[2]。它可以增加体内肝糖原和肌糖原转化成葡萄糖，还可以增加蛋白质分解、抑制蛋白合成[3]。1969年Liggins报道的有关资料显示，地噻咪松促进幼年动物的生长发育，使其体重及内脏的重量增重[4]。研究者们分析造成体重和器官重量上升的原因为：一方面可能影响下丘脑-垂体-肾上腺等多个内分泌轴的功能;另一方面地噻咪松促进细胞的分裂增殖[5]。生长激素是脑垂体前叶分泌的能促进身体生长的一种激素，因而地噻咪松可以影响生长激素的生成。生长素对中间代谢及能量代谢也有影响，可增强对钠、钾、钙、磷、硫等重要元素的摄取与利用，促进蛋白质合成，同时加速脂肪分解[6]。为了弄清治疗剂量的地噻咪松是否对鸭的生长有抑制作用，本试验通过对在雏鸭的饮水中添加治疗剂量的地噻咪松，研究治疗剂量的地噻咪松对雏鸭的体重、生长性能和抗氧化能力的影响，旨在为临床上正确使用地噻咪松提供参考。

1    材料与方法

1.1    供试材料

1.1.1    试验动物。购买于市场上的30只健康花边雏鸭，按完全随机抽样的方法随机分成2组（试验组和对照组），每组15只，在同样的试验环境中饲养，饲喂日粮为“通威牌”鸭全价颗粒料。

1.1.2    主要试验药品及试剂。地噻咪松磷酸钠注射液（西南药业股份有限公司出品），超氧化物歧化酶（SOD）测试盒（南京建成生物工程研究所第一份所），碘[I125]人生长激素放射免疫分析药盒（北京科美东雅生物技术有限公司）。

1.1.3    试验仪器和设备。V-1100可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司），SN-6100型全自动放射免疫γ计数器（上海核所日环光电仪器有限公司），低速自动平衡微型离心机（北京医用离心机厂），隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂），电热恒温水温箱（北京长安科学仪器厂）。

1.2    试验方法

1.2.1    饲养管理。鸭舍通风良好，温度、湿度等条件按饲养规程控制，试验鸭均自由采食，7日龄注射鸭肝炎抗体血清，试验前观察7 d。待试验鸭完全健康后，于7 d后按完全随机抽样的方法随机分成2组（试验组和对照组），试验组中的饮水中添加治疗剂量的地噻咪松（0.05 mg/只）。

1.2.2    观察记录与称量体重。每天观察记录鸭的生长发育情况、死亡只数及其他异常情况。每间隔7 d，试验组、对照组各抽取15只雏鸭，分别称量体重。

1.2.3    血样采集。选择试验组、对照组各15只雏鸭为采样对象，采用心脏采血，置于洁净的试管里，做成抗凝血样，于4 ℃下保存备用[7]。

1.2.4    血清制备。将采集的血液样品，于3 500 r/min离心，15 min，分离血浆，取上清、编号并放于4 ℃冰箱冷藏，待用。

1.3    测定内容与方法

1.3.1    血清中总超氧物歧化酶（T-SOD）活力测定。通过黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧化阴离子自由基（O2-）。后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色[8]。用可见光光度计测其吸光度，当被测样品中含SOD时，则对超氧化阴离子自由基有专一性的抑制作用。取洁净中号试管11只，1只为空白对照，编号为0，其余试管依次1-10编号，各管加入磷酸钠（Na2HPO4-NaH2PO4）缓冲液1 mL;测定管加入血浆样品0.03 mL，空白对照管加入双蒸水0.03 mL，然后各管分别加入双蒸水0.5 mL;接下来各管依次分别加入蛋氨酸（Met）磷酸钠缓冲液、NBT溶液、核黄素溶液各0.1 mL，混匀，37 ℃下水浴40 min，最后各管加入显色剂2 mL，混匀，室温放置10 min，于波长550 nm处，1 cm光径比色杯，蒸馏水调零，比色，读出各管的吸光度值[9]。测定方法：在测定管分别加入磷酸钠（Na2HPO4-NaH2PO4）缓冲液1.0 mL、样品30 μL、蛋氨酸（Met）磷酸钠缓冲0.1 mL、NBT溶液0.1 mL、核黄素溶液0.1 mL，在对照管分别加入磷酸钠（Na2HPO4-NaH2PO4）缓冲液1.0 mL、蒸馏水30 μL、蛋氨酸磷酸钠緩冲0.1 mL、NBT溶液0.1 mL、核黄素溶液0.1 mL，用旋涡混匀器充分混匀，于37°恒温水浴40 min，然后在测定管、对照管均加入显色剂2 mL，混匀，室温放置10 min。于波长550 nm处，1 cm光径比色杯，蒸馏水调零，比色。将测定所得的OD值代入下列公式，求出各测定管样品的总SOD值。计算公式为：

总SOD活力（U/mL）=

÷50%×反应体积稀释倍数×样本测试前的稀释倍数

1.3.2    生长激素（GH）测定。先将校准品（或样品）、标记物和抗体按操作程序依次加入试管中，待反应平衡后，加入分离剂，离心沉淀，使游离抗原与抗原抗体复合物分离，测量沉淀物的放射性强度[10]。随血清中HGH含量的增加，其放射性强度则相应降低。取洁净中号试管12只，一只标记为NSB管，一只标记为S0管，五只标记为S1-S5管，其余的标记为1-5号。加样测定程序：在NSB管分别加入缓冲液200 μL、125I—GH 100 μL，在S0管分别加入缓冲液100 μL、125I—GH 100 μL、抗体100 μL，在S1—S5管分别加入校准品100 μL、125I—GH 100 μL、抗体100 μL，在样品管分别加入待测血清100 μL、125I—GH 100 μL、抗体100 μL，各管振荡摇匀，室温15～28 ℃过夜（18～24 h），在各管均加入分离剂500 μL，充分混匀，室温15～28 ℃下放置15 min，500 r/min（离心力1 500 g）离心20 min，立即吸取上清，测各管的放射性计数（CPM）。将所得的数据代入下列公式，求出B/B0的比值。计算公式如下：

B/B0=

以B/B0为纵坐标，以校准品浓度为横坐标，在logit-Log坐标纸上绘制校准曲线，根据样品B/B0，从校准曲线上查出样品的含量，目前多用r计数仪预先编制的程序直接给出有关参数、校准曲线及样品浓度。

1.4    数据处理

用SPSS统计学软件对试验数据进行统计学分析。

2    结果与分析

2.1    治疗剂量的地噻咪松对雏鸭体重的影响

添加治疗剂量的地噻咪松14 d后，2组差异不显著（P>0.05）。试验21 d，试验组雏鸭体重显著高于对照组（0.01

2.2    对雏鸭机体内总超氧物歧化酶（T-SOD）活力的影响

添加治疗剂量的地噻咪松试验14、21 d，2组处理差异不显著（P>0.05）。试验28 d，对照组与试验组呈显著差异（0.01

2.3    对雏鸭机体内生长激素（GH）浓度的影响

添加治疗剂量的地噻咪松试验14、21 d，2组处理差异不显著（P>0.05）。试验28 d，对照组与试验组呈显著差异（0.01

3    结论与讨论

添加治疗剂量的地噻咪松（0.05 mg/只）可提高雏鸭的体重增长。Liggins研究表明，地噻咪松可促进雏鸭的生长发育，增加其体重及内脏的重量。地噻咪松对于中枢神经系统的正常发育有不可替代的调节作用，对增强机体的免疫功能，提高抗菌力和健康水平有良好作用，但过高循环水平的地噻咪松则可导致神经毒性作用[11]。本试验中的剂量为临床上的治疗剂量，可对雏鸭产生较显著的促生长作用，提高饲料的利用率，这与上述的结果一致。

超氧化物歧化酶（SOD）是一种催化超氧化物阴离子自由基发生歧化，生成氧和过氧化氢，从而清除氧自由基的一种酶，它具有一清四抗的作用即清除体内多余的自由基，抗肿瘤，抗疲劳，抗病及抗衰老，是清除超氧阴离子自由基对细胞损伤的一种重要物质。自由基是机体代谢过程中产生的副产品[12]。通常生理条件下，机体自由基的产生与清除（氧化与抗氧化作用）处于动态平衡，而在病理情况下，这一平衡状态往往被打破[13]。正常雏鸭体内含有足够的SOD、VC、VE等抗氧化物质，以对抗体内的MDA等自由基产物。但当自由基的生成增加时，体内自由基的产生与清除失去平衡，导致体内T-SOD的含量随之发生改变[14]。本试验结果显示，治疗剂量的地噻咪松对雏鸭机体内的总超氧物歧化酶（T-SOD）活力可产生较显著的促进作用。与李国富等[13]在肺炎患者血清中的超氧物歧化酶上的報道一致，地噻咪松能提高机体内总超氧物歧化酶的活力。

通过检测雏鸭血液中的理化变化，很大程度上反映了机体营养物质代谢及机体内酸碱平衡的情况。在雏鸭的生长发育过程中，生长激素的作用是促进生长，促进生长的效果主要表现在骨、肌肉、肾、肝和脂肪组织等方面[15]。

地噻咪松能提高生长激素的表达水平，增加GH细胞内分泌颗粒的积聚。当浓度达到一定程度时，可以增强地噻咪松对GH细胞的诱导分化作用。地噻咪松能够促进生长细胞的体外分泌，并具有一定的剂量依赖性[16]。本试验中治疗剂量的地噻咪松（0.05 mg/只）可提高雏鸭的生长激素浓度，对雏鸭的生长具有促进作用。与Rotruck JT等[17]的报道一致，一定剂量的地噻咪松能够提高机体内的生长激素的浓度。

本试验在饮水中添加地噻咪松能较显著的提高总超氧物歧化酶（T-SOD）活力、生长激素（GH）浓度，增强雏鸭机体的抗氧化能力，促进了雏鸭的生长。试验结果表明，治疗剂量的地噻咪松并不会抑制鸭的生长，相反还可以促进其生长。因此，在治疗鸭病时，可以配合使用地噻咪松进行治疗，地噻咪松药物的使用并不会给鸭带来生长上的副作用。

4    参考文献

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