香菇多糖对外周血肌酸激酶和尿素氮以及骨骼肌抗氧化能力影响

张高杰，覃 圆

（1.周口师范学院体育学院，河南 周口 466001；2.广西外国语学院体育教学部，广西 南宁 530000）

预防运动性疲劳，维持机体正常的生理运转，是运动科学领域重要课题。研究证实，大强度运动会造成机体运动性疲劳，体内自由基增多，细胞内能量运转障碍等，严重影响比赛与训练[1-2]。香菇多糖是香菇中提取的活性成分物质，具有抗肿瘤、抑菌消炎、抗氧化、改善肠道功能等多重功效[3-5]。有关香菇多糖在运动医学领域的研究较少，以香菇多糖为预防性药物，观察香菇多糖预处理对大鼠运动能力、肌酸激酶（CK）、尿素氮（BUN） 及骨骼肌抗氧化能力的影响，为香菇多糖在运动医学领域的应用提供试验基础。

1 材料与方法

1.1 试验动物及分组

30只成年雄性SD大鼠，购自广西医科大学，体质量 （207±15） g。

大鼠自由饮食、进水，大鼠随机分为3组：安静组10只（A组），运动组10只（B组），运动低给药组10只（C组），试验前，对3组小鼠的体质量进行比较，组间无显著差异。

1.2 主要仪器和主要试剂

大鼠电动跑台，SA101，江苏赛昂斯生物科技；转速冷冻机，DL-46RC，中科生物医学高科技开发公司；高速电动匀浆机，FSH-2，中科生物医学高科技开发公司；荣升冰箱（BCD-203A，荣升冰箱有限公司。

香菇多糖为干香菇粉碎，称重，石油醚脱脂。脱脂香菇90℃水浸提2次（香菇与水比例为1:20），收集滤液。滤液加无水乙醇放置12 h，过滤沉淀。再用80%乙醇洗涤多次，干燥后得香菇多糖粗品，粉状，测定多糖含量87%。

谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）测试盒、超氧化物歧化酶（SOD） 测试盒、丙二醛（MDA） 测试盒、Na+/K+-ATP试剂盒、Ca2+/Mg2+-ATP试剂盒购自南京建成生物工程研究所等。CK试剂盒、BUN试剂盒购于中生北控生物科技股份有限公司。

1.3 动物训练方案与给药方案

A组不运动，正常进食饮水。B组、C组进行为期6周的大强度跑台训练，每周6 d，周日休息。前3周为递增负荷训练，速度分别为15 m·min-1、15.2 m·min-1、26.8 m·min-1，坡度均为 0、5%、5%，时间均为25 min·d-1；后3周为大强度训练，速度均为31 m·min-1，坡度均为5%、5%、10%，时间均为30 min，最后1 d训练至力竭。训练后期，受训练强度、灌胃不当的影响，B组、C组大鼠各有1只死亡。

C 组在每天上午 9∶00～11∶00，灌服剂量为 30mg·kg-1的香菇多糖（剂量根据前期试验有效性确定，给药前，先用蒸馏水将香菇多糖配置为5 mg·mL-1溶液），A组、B组按照同样的方式给予同体积的蒸馏水。

1.4 动物取材和指标的测定

1.4.1 大鼠外周血CK、BUN的测定

末次训练后，麻醉，腹腔主动脉血经约2.0 mL，静置 25 min，以 4℃，3 500 r·min-1速度离心 15 min，取上清液，待测肌酸激酶（CK）、尿素氮（BUN） 含量。

1.4.2 骨骼肌组织匀浆的制备

3组大鼠在末次训练后，65 mg·kg-1戌巴比妥钠麻醉后断头处死。迅速剥离小腿三头肌，生理盐水冲洗干净血渍，滤纸吸干，冰箱保存待测。称量脑组织5 g，按1∶9加入生理盐水，低温离心15 min（4℃，6 000 r·min-1），分离提取上清液，冰箱保存待测[6]。

1.4.3 指标的测定

CK采用速率法测定[7]；BUN采用酶偶连塑速率法测定[7]；骨骼肌组织总蛋白采用考马斯亮兰法测定[8]；MDA采用比色法测定[8]；SOD采用黄嘌呤氧化酶法测定[8]；GSH-Px采用化学比色法测定[8]；Na+/K+-ATP、Ca2+/Mg2+-ATP的测定采用定磷法测定[8]。测试过程严格按试剂盒说明进行。

1.5 统计学处理

2 试验结果

2.1 各组大鼠CK、BUN含量的测定结果

不同组大鼠的CK、BUN含量的比较情况，见表1。

表1 不同组大鼠的CK、BUN含量的比较（±s）Tab.1 Comparison of the content of CK and BUN in different groups of rats（ ± s）

表1 不同组大鼠的CK、BUN含量的比较（±s）Tab.1 Comparison of the content of CK and BUN in different groups of rats（ ± s）

注：*与A组相比，P＜0.05；**与A组、B组相比，P＜0.05。下同。Note:*Compared with A group,P＜0.05,**compared with A group and B group,P ＜0.05.It’s the same as below.

组别 数量/只 CK含量/(U·L-1) BUN含量/(mmol·L-1)A 组 10 152.58±12.47 16.77±0.73 B 组 9 263.78±22.13* 45.28±3.08*C 组 9 212.36±21.21** 37.26±2.21**

从表1可以看出，B组、C组CK、BUN含量均高于A组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；C组CK、BUN含量均低于B组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 各组骨骼肌抗氧化的比较结果

不同组大鼠脑组织的抗氧化测定结果，具体见表2。

表2 不同组大鼠脑组织抗氧化测定结果（±s）Tab.2 Anti-oxidation results of rat brain tissues in each group（±s）

表2 不同组大鼠脑组织抗氧化测定结果（±s）Tab.2 Anti-oxidation results of rat brain tissues in each group（±s）

注：*与A组相比，P＜0.05；**与A组、B组相比，P＜0.05。下同。Note:*Compared with A group,P＜0.05,**compared with A group and B group,P＜0.05.It’s the same as below.

组别MDA含量/(μmol·g-1)GSH-Px活性/(U·mg-1)SOD活性/(U·mg-1）A组数量/只101.31±0.24 59.84±4.21 78.94±6.61 B组C组9 9 5.78±0.59* 29.23±2.31* 39.46±3.10*3.66±0.46** 47.28±3.91**67.71±5.17**

从表2可以看出，B组、C组MDA含量高于A组，GSH-Px、SOD活性低于A组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；C组MDA含量低于B组，GSH-Px、SOD活性高于B组，差异具有统计学意义 （P＜0.05）。

3 讨论

测定运动后血中CK含量，间接反映肌细胞对运动的适应。BUN是蛋白质分解时产物，常用血中BUN含量判定机体运动负荷大的承受能力。CK、BUN含量上升，原因可能是运动造成细胞膜牵拉、自由基增多等原因，导致肌细胞膜通透性改变，细胞内的CK渗出细胞外，造成血内CK含量增加。同时，大强度运动促使更多的蛋白质分解供能。而服用香菇多糖后CK、BUN含量降低，上述现象受到抑制。提示香菇多糖具有维持细胞正常生理功能运转的功能，增加机体对运动负荷的承受力，具有抗疲劳功能。

MDA是脂质过氧化产物，是衡量体内自由基代谢的敏感指标。GSH-Px、SOD是机体内常见的抗氧化酶类，其活性的强弱常用来衡量机体抗氧化能力。杨岚[9]的研究认为，香菇多糖具有较强的抗氧化活性，能提升血和肝脏中GSH-Px、SOD活性，减少MDA生成及降低脑单胺氧化酶（MAO）活力。香菇多糖的体内抗氧化实验也表明，香菇多糖促进小鼠体内抗氧化能力的提高[10]。本研究中，大强度运动导致骨骼肌组织自由基生成增多，抗氧化能力下降，作为较强的抗氧化化合物，香菇多糖能有效抑制骨骼肌自由基生成，提升抗氧化能力。原因为香菇多糖的活性成分能改善大鼠的供氧能力，改善机体循环功能，增强机体免疫力，提高抗氧化酶的活性，加快自由基的清除；香菇多糖中的活性成分抑制氧化酶的活性，降低氧自由基的生成。

4 结论

大强度运动导致机体外周血CK、BUN含量降低，骨骼肌组织氧化损伤，香菇多糖能抑制上述现象。结果表明，香菇多糖能维持细胞正常生理功能运转，增加机体对运动负荷的承受力，提高骨骼肌组织抗氧化能力，具有抗疲劳功能。