派特灵与奥平栓治疗宫颈高危型、低危型HPV感染的疗效及对免疫功能的影响

刘 吉，陈 辉

(1.无锡市第五人民医院妇产科,江苏无锡 214073;2.无锡市第二人民医院妇产科，江苏无锡 214002)

人乳头瘤病毒(HPV)属于常见的DNA环状病原体，常经性交的方式感染人体黏膜和皮肤上皮细胞，偶可经母婴传播。女性宫颈HPV感染临床表现通常不明显，且大部分为自限性，可自我清除，而持续感染状态下则可导致尖锐湿疣或癌前病变等。临床上HPV可分为高危型与低危型，低危型常导致宫颈肿瘤、生殖器疣等，而高危型则可导致癌前病变、宫颈癌等[1-2]。奥平栓属于干扰素栓,可激活人体抗病毒基因，并与人体靶细胞受体合成具有抗病毒作用的蛋白，常用于妇科疾病的治疗，但对潜伏期HPV清除效果有限，且预防复发效果亦不理想[3]。派特灵作为中药类制剂，对感染HPV的人体皮肤黏膜有良好的抑制和清除作用，可提高持续HPV感染患者转阴率[4]。此外，人体免疫调节功能在HPV相关的宫颈疾病中亦有重要作用[5]。在此背景下，本文主要探讨派特灵联合奥平栓对宫颈高危型、低危型HPV感染患者的治愈效果以及对机体免疫功能的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年10月至2019年4月于无锡市第五人民医院妇科门诊就诊的HPV感染患者168例为研究对象，根据HPV检测结果，高危型108例，低危型60例，将高危型和低危型分别按照随机数字表法分为高危型的观察组和对照组各54例，低危型的观察组和对照组各30例。其中，高危型观察组患者年龄44～52岁，平均(47.87±1.39)岁；平均病程(3.02±0.34)个月；慢性宫颈炎(CCS)13例，宫颈柱状上皮异位(CE)10例，CINⅠ期(宫颈轻度非典型增生)15例，CINⅡ期(宫颈中度非典型增生)8例，CINⅢ期(宫颈重度非典型增生)8例。高危型对照组年龄44～52岁，平均(48.02±1.33)岁；平均病程(3.10±0.29)个月；CCS 12例，CE者11例，CINⅠ期16例，CINⅡ期7例，CINⅢ期8例。低危型观察组患者年龄39～50岁，平均年龄(43.55±1.76)岁；平均病程(3.27±0.56)个月；CCS 10例，CE 12例，CINⅠ期8例。低危型对照组患者年龄38～48岁，平均年龄(42.97±1.81)岁；平均病程(3.31±0.51)个月；CCS 11例，CE 12例，CINⅠ期7例。高危型与低危型两组患者年龄、病程及病理分型等一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本次试验方案经本院伦理委员会审核并批准通过，所有受试者均了解试验方案并签署知情同意书。

1.2纳入和排除标准

1.2.1入组标准 (1)HPV检测为阳性，且宫颈液基薄层细胞学(TCT)检测未见癌细胞；(2)均为首次就诊患者;(3)年龄为39～52岁，有规律性生活史和月经史，且无生育及哺乳需求;(4)可积极配合至试验结束，治疗期间确保无性生活，且自愿签署知情同意书。

1.2.2排除标准 (1)恶性肿瘤患者；(2)严重的脏器病变性疾病；(3)有生殖系统急慢性炎症；(4)有免疫缺陷性疾病。

1.3方法

1.3.1治疗方法 高危型与低危型对照组：采用奥平栓(重组人干扰素α2a栓，武汉维奥制药有限公司，国药准字10980006，6万IU/粒)进行治疗，清洁治疗人员双手和患者外阴部后，用指套置药物于患者阴道后穹窿及宫颈表面，每次一粒，间隔1 d使用，连续使用21 d，经期不使用。高危型与低危型观察组：观察组在对照组基础上将北京派特博恩生物技术开发有限公司提供的派特灵(产品批号：20120118)于月经结束后第3天宫颈部给药，方法为将阴道分泌物清洁干净，利用无菌纱条充分浸润派特灵原液并于宫颈管内约2 cm处置入,然后利用尾线棉球充分浸润原液放于宫颈部，每天1次，湿敷3 h，然后取出，连续使用4 d，停用3 d，共计16次，经期不使用。

1.3.2观察指标 (1)临床疗效评价：高危型患者均于治疗前及治疗结束1周后采用宫颈刷于患者宫颈口旋转6～8圈，将收集的分泌物置于专用脱落细胞保存液中，进行病毒载量检测，其中高危型HPV DNA低于1.0 ng/L即为转阴；高危型HPV DNA高于1.0 ng/L且高危型HPV DNA 改善率在33%以上即为有效；高危型HPV DNA改善率低于33%或高危型HPV DNA较治疗前升高即为无效。有效率=(转阴例数+有效例数)/总例数×100%。(2)患者免疫因子监测：所有患者均于治疗前及治疗结束后1周采集空腹静脉血，制备外周血单个核细胞，经避光孵育后采用流式细胞仪分别对患者Th17、Treg、骨髓来源的抑制性细胞(MDSC)水平进行检测。(3)不良反应：观察所有患者治疗期间出现低热、腰部酸痛、阴部不适、肝肾功能异常等不良反应状况，对比总发生率。

2 结 果

2.1高危型患者治疗前后HPV病毒载量对比 治疗前，高危型观察组和对照组患者HPV病毒载量差异无统计学意义(P>0.05)，经治疗，各组表达水平均较治疗前明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)，且高危型和低危型观察组的HPV病毒载量均明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2高危型与低危型各组患者治疗后有效率对比 经治疗，高危型与低危型观察组患者治疗有效率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表1 高危型患者治疗前后病毒载量比较

2.3高危型与低危型各组患者治疗前后免疫因子表达水平对比 治疗前，高危型与低危型观察组和对照组患者Th17、Treg、MDSC水平差异均无统计学意义(P>0.05)，经治疗，各组Th17、Treg、MDSC表达水平均较治疗前明显下降，差异均有统计学意义(P<0.05)，且高危型和低危型观察组Th17、Treg、MDSC水平均明显低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

2.4高危型与低危型各组患者不良反应发生情况对比 治疗期间，高危型与低危型观察组患者不良反应总发生率普遍低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表2 高危型与低危型各组患者治疗后有效率比较

表3 高危型与低危型各组患者治疗前后免疫因子表达水平比较

表4 高危型与低危型各组患者不良反应发生情况比较

3 讨 论

宫颈是女性重要的生理屏障，当机体受致病菌侵袭时起一定的防御作用，但长期接触致病菌则可导致宫颈炎、宫颈癌等慢性疾病,其中HPV感染是宫颈疾病发生的重要危险因素。HPV诱发的宫颈疾病主要经历两个阶段，通常情况下HPV感染为一过性，人体自身免疫可将其清除，当宫颈处于与HPV长期接触的环境中，可导致宿主细胞被感染，HPV复制转录加剧，而病毒复制转录后可于细胞核聚集，进而导致更多周围宿主细胞被感染，使患者宫颈HPV发生免疫逃逸(因HPV不参与血液循环，临床无病毒血症)，宫颈处于持续感染状态，最终导致器质性病变产生[6-8]。HPV基因型较多，不同的基因型导致的临床病变亦有差异。根据其分型检测，分为高危型(如16、18、31型等15种)和低危型(如6、11、14型等12种)两种，其中高危型多与癌前病变、癌变相关，而低危型则多导致宫颈湿疣、鳞状上皮病变等，部分能自然逆转[9-11]。奥平栓是宫颈病毒感染性疾病常用药物，对宫颈糜烂、慢性宫颈炎及宫颈癌的预防均有一定作用，其主要成分为重组人干扰素α2a，是广谱抗病毒药物，尽管取得了一定的疗效，但对高危型HPV感染的阻断作用不明显，且当前尚无针对HPV感染的治疗手段，因此如何进行有效治疗广受医务人员重视，中医药在此领域治疗空间巨大[12-13]。派特灵是由传统中药大青叶、金银花、苦参等经15%～25%的乙醇提取而成，通过作用于人体皮肤表面，加速表皮细胞的更新，促使受感染的细胞迅速脱落，且对HPV有杀灭作用，可防止机体进一步感染，进而发挥治疗作用[14-16]。姚丽[17]通过对80例宫颈高危型HPV感染患者进行分组对照研究，结果表明派特灵联合宫颈环形电切术对高危型宫颈HPV感染患者临床治疗效果优越，可有效清除病毒感染，改善患者宫颈微生态环境。本文中，观察组通过联合使用派特灵，高危型与低危型患者病毒载量显著降低，且治疗有效率较对照组均有明显提高,这说明派特灵无论是对高危型HPV还是低危型HPV均有良好的杀灭作用。

尽管近90%的HPV感染能自行恢复，但当患者免疫功能存在缺陷时，HPV的基因片段可整合到宫颈部上皮细胞染色体上，使其基因调节功能紊乱，进而导致持续感染，诱使细胞加速分裂、恶性增生甚至导致癌变。因此，通过免疫功能的监测可辅助推断人体HPV感染的严重程度与疾病进展。MDSC作为骨髓源性有免疫抑制功能的细胞，可抑制人体树突状细胞和T淋巴细胞免疫活性的发挥，在机体炎性反应、感染、免疫逃逸等病变过程中有重要作用。此外，同为T细胞亚群的Th17与Treg亦参与了宫颈HPV免疫逃逸。Treg 细胞为CD4细胞类型亚群，可分泌转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-10等抑制性细胞因子，可产生穿孔素以及颗粒酶等杀伤效应细胞，对效应细胞正常代谢进行干扰，使其自身功能受抑制，并通过对树突状细胞的调节使Treg细胞正常分化与增殖活动受影响，Treg细胞过度表达进而导致机体免疫识别功能下降。而Th17作为新近发现的效应T细胞，是重要的炎性介导细胞，可诱导机体产生炎性介质(如IL-17)加重炎性反应。IL-17是重要的炎性介质与趋化因子，可使机体细胞组织出现炎性受损。一般情况下， Treg与Th17细胞保持一定的平衡，一旦平衡功能被打破，机体出现恶变的概率随即加大[18-24]。余花艳等[25]通过对120例宫颈HPV阳性患者和20例阴性患者进行分组对照研究发现，Th17、Treg、MDSC的表达水平与患者病情严重程度呈明显正相关。本次研究中，治疗前宫颈高危型患者的MDSC、Treg以及Th17表达水平普遍高于低危型患者，经过治疗，高危型与低危型各组患者各指标均较治疗前明显下降，但观察组通过派特灵与奥平栓的联合使用，其表达水平下降效果更加明显，考虑其作用机制主要在于派特灵在自身细胞毒作用下，可促使HPV感染后病变组织的特异性坏死脱落，其抗病毒作用广泛，细胞异常增殖抑制作用显著，有良好的免疫调节作用，进一步表明派特灵通过局部用药对宫颈HPV感染有良好的治疗效果[26]。

4 结 论

派特灵与奥平栓联合使用，可有效降低宫颈高危型、低危型患者HPV病毒载量，提高治疗有效率，提高机体免疫功能，减轻炎性反应，且不良反应少，安全性较高，值得临床应用推广。