M-CSF、CA153、HPV联合检测在宫颈癌早期筛查中的临床意义

陈远平，杜 仲，袁 竟，张兰樱△，徐云芳

(泸州市人民医院：1.医学检验科；2.妇产科，四川泸州 646000)

宫颈癌是临床妇科一种常见肿瘤，发生于女性生殖系统，其发病率与病死率均较高[1]。据有关统计，在发展中国家宫颈癌在女性恶性肿瘤的发病率中仅次于乳腺癌，病死率仅次于乳腺癌与肺癌[2]。我国每年新发病例约有10万，占世界新发病例的1/5[3]。宫颈癌早期筛查可早期发现病例，积极治疗，对于提高宫颈癌患者的生活质量及生存时间均具有重要意义。巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)主要存在于骨髓腔内[4]，是一种具有谱系特异性的细胞因子，对于患者单核细胞的增殖、分化具有一定的意义。有研究认为，M-CSF与宫颈癌以及乳腺癌具有显著相关性[5]。糖类抗原153(CA153)是重要的宫颈癌肿瘤标志物，可以作为术后病情监测指标。人乳头瘤病毒(HPV)已经被证实为宫颈癌患者重要的病原微生物。本研究将通过对M-CSF、CA153、HPV联合检测在宫颈癌早期筛查中的临床意义进行研究，为临床诊断与治疗提供科学依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 将本院2016年3月至2018年10月收治的120例宫颈癌患者作为宫颈癌组，另选取同期于本院体检合格者120例作为健康组，不典型增生患者120例作为CIN组。据宫颈癌病理学分级标准(宫颈癌FIGO分期标准)，Ⅰ级患者67例，Ⅱ级患者53例；患者平均年龄为(45.93±7.31)岁；平均体质量指数(BMI)为(23.18±1.39)kg/m2；文化程度：小学及以下患者29例，中学或中专患者31例，大专及以上患者60例；近1年性生活情况存在患者71例；根据HPV亚型致病力大小或致癌危险性大小，HPV高危型患者77例，HPV低危型患者43例。3组研究对象的年龄、BMI、1年性生活状况、宫内节育器状况、文化程度之间的比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。本研究获得本院伦理委员会批准，所有研究对象已签署知情同意书。纳入标准：(1)宫颈癌组患者均经过病理诊断，符合宫颈癌及癌前病变规范化诊疗指南(试行)[6]中关于宫颈癌的诊断标准；(2)宫颈癌组患者均为首次确诊为宫颈癌；(3)对照组研究对象的血细胞计数、肝肾功能、血脂等均正常。排除标准：(1)合并妊娠者；(2)入院前3个月内进行过免疫抑制相关治疗者；(3)合并其他部位恶性肿瘤或代谢性疾病(如糖尿病等)；(4)入院前进行过放疗或化疗等。

1.2方法 采集所有研究对象静脉血4 mL，3 500 r/min离心15 min，取上清液，使用雅培i2000SR全自动化学发光免疫分析仪对其CA153水平进行检测；采用ELISA检测M-CSF水平，试剂由上海酶联生物科技有限公司提供；HPV分型检测采用PCR+膜杂交法，取保存有宫颈组织标本的细胞保存液使用汇研科创Expure-20全自动核酸提取仪进行核酸提取，取1 μL抽提好的DNA样品用7500Peal-Time PCR System核酸扩增仪进行PCR扩增，再使用HybriMax医用核酸分子快速杂交仪对PCR扩增产物进行膜杂交，最后根据显色对结果进行判断。所有的操作步骤严格按试剂盒说明书进行。

1.3观察指标 分别对3组研究对象的M-CSF、CA153、HPV水平进行比较。

2 结 果

2.13组研究对象的M-CSF、CA153、HPV水平比较 宫颈癌组患者的M-CSF、CA153、HPV水平均显著高于CIN组和健康组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.2宫颈癌疾病与血清M-CSF、CA153、HPV水平相关性比较 宫颈癌疾病与血清M-CSF、CA153、HPV均呈正相关，相关系数分别为0.223、0.334、0.342，且相关性具有统计学意义(P<0.05)。

2.3多因素分析 通过多因素分析，M-CSF、CA153、HPV均为宫颈癌患者的独立危险因素，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

2.4单独检测和联合检测效能比较 M-CSF、CA153、HPV联合检测的诊断灵敏度高于单独检测，通过ROC曲线分析，患者M-CSF、CA153的临界值分别为485.12 pg/mL和317.62 U/mL。见表4。

表1 3组研究对象的基础资料比较

表2 3组研究对象的M-CSF、CA153、HPV水平比较

表3 宫颈癌组患者的多因素分析

表4 单独检测和联合检测效能比较

3 讨 论

宫颈癌是临床常见的女性生殖系统恶性肿瘤，其发病率较高[7]。宫颈癌早期症状不明显，多呈隐匿状态，多数患者在诊断时已经是宫颈癌中晚期，所以早期诊断对宫颈癌患者的预后具有重要意义[8]。目前，对于宫颈癌患者的诊断多采用宫颈细胞涂片、阴道镜检查及宫颈薄层液基细胞学检查[9]。虽然各种检查对于患者的诊断具有一定的意义，但是依然有可能造成患者的漏诊。

肿瘤标志物是在肿瘤的发生、发展过程中由肿瘤患者的肿瘤细胞分泌以及合成或者是患者正常细胞对肿瘤细胞的反应性物质。在恶性肿瘤患者中，肿瘤标志物检测具有举足轻重的作用，同时其检测过程无创、简便，易于被患者接受，目前也成为肿瘤诊断的重要依据[10]。但是肿瘤标志物单独检测对于患者癌症的诊断意义较差，所以临床上多采用联合诊断方法。有研究报道认为，肿瘤标志物联合人附睾分泌蛋白4可以显著提高宫颈癌患者的诊断灵敏度以及特异度，同时对于患者的早期诊断以及治疗效果的评价具有积极的意义[11]。本研究中，患者的肿瘤标志物水平显著高于健康人群。分析认为，相比健康人群，患者的肿瘤标志物水平显著升高，但是从单一的肿瘤标志物水平的升高，并不能对患者的肿瘤情况进行诊断，需要联合其他生物学标志物的诊断才对患者具有积极的意义[12]。

在肿瘤细胞的增殖、分化过程中，细胞周期蛋白以及细胞周期蛋白依赖蛋白激酶和抑制蛋白激酶具有重要的调控意义。在患者肿瘤细胞增殖的不同时相，主要表现为细胞周期G1期持续时间的不同。在以往的研究中发现，细胞M-CSF水平可显著提高患者肿瘤细胞的细胞周期蛋白以及细胞周期蛋白依赖蛋白激酶，进而促进肿瘤细胞的增殖。有研究报道认为，细胞质内较高水平的M-CSF水平可在一定程度上促进肿瘤细胞的增殖[13]。活化P38、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)以及PI3K信号途径，激活NADPH氧化酶，对于肿瘤细胞的增殖、分化具有一定的意义[14]。本研究分析结果显示，患者的M-CSF水平显著高于健康人，提示肿瘤的细胞增殖程度升高，本文与以上研究相互印证。

在以往的研究中已经发现宫颈癌患者的发病与HPV具有显著的相关性，但是HPV的感染与多种疾病均具有一定的相关性[15-17]。通过对HPV的单独检测，对于患者的宫颈癌病变程度并不具有相应的诊断意义，所以本研究通过对3种物质的联合检测发现，观察组患者联合检测诊断效能显著高于对照组。同时通过对其他两种物质的临界值分析，在临床上可作为宫颈癌诊断的依据。

本研究仅仅从患者的诊断进行分析，未能从患者的治疗效果以及预后进行分析，有关患者的M-CSF、CA153、HPV的联合检测对宫颈癌患者的不同阶段以及预后的预测价值，有待在日后的研究中进一步探索。

4 结 论

M-CSF、CA153、HPV联合检测对宫颈癌早期筛查具有重要意义，在一定程度上可对患者的宫颈癌病变程度进行早期预测。