GDM患者肠道微生物分布特征及与妊娠结局关系

张锋英 邵秀兰 吴春峰 徐凤英

上海市金山区亭林医院(201505)

肠道菌群一般分布在胃、十二指肠、空肠、回肠以及结肠等部位，在生物机体正常生理功能中具有重要作用，尤其是在代谢性疾病人群中的调控作用也逐渐成为医务人员关注重点[1-3]。妊娠期糖尿病(GDM)对新生儿健康、成长可造成严重的影响[4]。GDM发病机制复杂，普遍认为与妊娠期膳食结构不合理、能量过剩有关，传统治疗多以饮食控制、适度运动为主，虽然能控制产妇体重但血糖控制效果不佳，影响妊娠结局[5-7]。既往对娠期糖尿病患者肠道微生物的研究不多[8]。故本次研究分析GDM患者肠道微生物分布特征，探究肠道微生物对妊娠结局以及新生儿的可能影响。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月—2019年1月本院妇产科产前检查孕妇作为研究对象，根据孕妇是否存在GDM分组行前瞻性研究分析。纳入标准：①GDM患者符合相关诊断标准[9]；②单胎，初次妊娠；②年龄22～32岁；④孕周23～32周；⑤妊娠期间未采用其他干扰治疗。排除标准：①孕前存在糖耐量异常病史；②合并严重心、肺等器官疾病，合并严重感染性疾病以及血液系统疾病，合并严重肠道疾病；③有肠道手术史；④长期服用抗生素、激素或使用过益生菌相关制剂史。孕妇或孕妇家属知情并签署知情同意书；本研究提交本院医学伦理委员会审核并通过。

1.2 治疗方法

GDM组采用综合治疗，包括饮食控制、胰岛素皮下注射以及适量运动，要求孕妇尽量减少糖的摄入量，并根据孕妇的实际病情注重膳食搭配以及营养均衡，尽可能保证胎儿在孕妇体内正常发育。一旦血糖超出范围，饮食治疗手段不能有效控制血糖时及时注射胰岛素。经确诊后采集孕妇空腹静脉血，采用免疫比浊法测定超敏C-反应蛋白(hs-CRP)，酶联免疫吸附试验测定白细胞介素(IL)-6、IL-10以及肿瘤坏死因子(TNF-α)，采用美国曼库尔特DxFLEX流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8以及CD4/ CD8)；无菌收集新鲜粪便培养计数，根据菌落形态、格兰染色鉴定菌群。

1.3 观察指标

①血糖控制标准，空腹血糖<5.6mmol/L，餐后血糖<6.7mmol/L；②妊娠结局，包括妊娠期高血压综合征、羊水过多、早产、产后出血以及产褥感染，新生儿影响判断需比较两组新生儿巨大儿情况、新生儿畸形情况、新生儿低血糖情况以及胎儿窘迫情况。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 基本情况

共纳入160例孕妇，GDM组83例，年龄(28.3±2.4)岁，孕周(27.8±4.9)周，体质指数(25.0±3.2)kg/m2；对照组77例，年龄(28.3±2.4)岁，孕周(27.8±4.9)周，体质指数(24.9±3.2)kg/m2；两组孕妇上述指标比较无差异(P>0.05)。

2.2 两组炎症因子表达水平

GDM组hs-CRP、TNF-α及IL-6表达水平均高于对照组，IL-10表达水平低于对照组(均P<0.05)。见表1。

2.3 两组T细胞亚群比较

GDM组CD3、CD4及CD4/CD8表达水平低于对照组，CD8表达水平高于对照组(均P<0.05)。见表2。

表1 两组炎症因子表达水平比较

表2 两组T细胞亚群比较

2.4 两组肠道菌群培养情况

GDM组肠杆菌以及酵母菌高于对照组，双歧杆菌、乳杆菌以及拟杆菌低于对照组(均P<0.05)。见表3。

2.5 两组妊娠结局

GDM组妊娠期高血压综合征发生、羊水过多、早产、产后出血及产褥感染比例均高于对照组(P<0.05)。见表4。

表3 两组肠道菌群培养情况比较(IgN/g湿便，

表4 两组妊娠结局比较[例(%)]

2.6 两组新生儿情况

GDM组新生儿存在3例四肢畸形，2例头面部畸形，2例循环系统畸形；对照组新生儿存在1例四肢畸形。GDM组新生儿出现巨大儿、新生儿畸形、新生儿低血糖以及胎儿窘迫比例高于对照组(P<0.05)。见表5。

表5 两组新生儿情况比较[例(%)]

2.7 GDM患者肠道微生物分布与妊娠结局关系

采用皮尔森距离分析GDM孕妇肠道微生物分布与妊娠结局的相关性，孕妇不良妊娠结局包括妊娠期高血压综合、羊水过多、早产、产后出血以及产褥感染。分析结果，妊娠期高血压综合、羊水过多、早产、产后出血以及产褥感染均与GDM孕妇肠道微生物分布无相关性(P>0.05)，见图1(1936页)。

3 讨论

既往研究表明，妊娠期肠道细菌数量、多样性以及分布状态会随着妊娠时间的延长逐渐出现变化，通常表现为孕妇肠内益生菌减少、致病菌增多等现象[10]。既往研究认为糖尿病的发生、发展与人体体内肠道菌群失调有一定相关性[11]。肠道菌群平衡在机体代谢中起到至关重要作用，能成为天然屏障抵御外来病原菌侵袭，同时保护黏膜相关淋巴组织进而达到改善黏膜免疫屏障功能的作用；其中双歧杆菌、乳杆菌具有改善人体肠道酸性环境、抑制肠杆菌、球菌以及酵母菌的生长繁殖等作用，是具有维持肠道菌群稳定的一类菌群[12-14]。既往研究表明，糖尿病患者通常伴随严重的肠道菌群失调，故考虑肠道菌群失调与糖尿病存在一定相关性[15]。

本次研究GDM组孕妇肠杆菌以及酵母菌均高于对照组，双歧杆菌、乳杆菌以及拟杆菌低于对照组，提示GDM孕妇存在肠道菌群失调现象，可能与肠道微生态环境遭受破坏有关；GDM组孕妇妊娠期高血压综合征发生、羊水过多、早产、产后出血以及产褥感染等不良妊娠结局高于对照组，分析原因：孕期孕妇血糖控制不佳会造成一系列血管病变进而导致孕妇血压升高、水肿，导致妊娠期高血压；且孕妇血管严重病变、血管内皮出现增厚、组织出现供血不足、血管痉挛以及妊娠高血压综合征，增加了产后大出血风险[16]。妊娠期糖尿病对新生儿的生命健康会造成一定不利影响[17]。本次研究GDM组孕妇的新生儿出现巨大儿、新生儿畸形、新生儿低血糖以及胎儿窘迫等发病率高于对照组，提示GDM对新生儿生命健康有严重影响[18]。 既往研究提示，GDM孕妇肠道微生物分布与妊娠结局有一定相关性，GDM孕妇肠道炎性疾病发生风险高于非GDM者，但本次研究结果，妊娠期高血压综合、羊水过多、早产、产后出血以及产褥感染与GDM孕妇肠道微生物分布未见到相关性，考虑本次研究样本量较少且为单中心样本等局限性，今后将可加大样本量并选取多中心进行深入研究。

另外，本研究还探讨了炎性因子与T淋巴细胞亚群与妊娠期糖尿病的关系。妊娠期胰岛素抵抗是妊娠期糖尿病的发病基础，微炎性因子水平升高是胰岛素抵抗的主要表现结果之一，以IL-6、TNF-α等促炎性因子释放为中心的慢性炎性反应过程为主，但临床上通常不会出现明显临床症状。本次研究中GDM组孕妇hs-CRP、TNF-α及IL-6表达水平均高于对照组，IL-10低于对照组，表明以上各炎症指标与GDM的发生发展有关。CD4和CD8 是T淋巴细胞亚群主要组成成分，对维持机体的正常免疫功能具有至关重要的意义。本次研究中GDM组CD3、CD4及CD4/CD8水平均低于对照组，CD8表达水平高于对照组，提示GDM可对机体细胞免疫功能造成一定程度紊乱。

综上所述，GDM孕妇存在肠道菌群紊乱现象，表现为肠道益生菌数量减少，致病菌数增加，对妊娠结局以及新生儿均会造成不良影响，但与患者妊娠期高血压综合、羊水过多、早产、产后出血等发生未见到相关性；另外患者伴随有炎症因子异常以及细胞免疫功能下降现象，应加强孕期保健并采取有效干预措施。