多普勒超声血流阻力指数与卵巢肿瘤患者血清ANGPTL4、Ang-2表达的相关性分析

荆立华 魏 晶 李健华 吴春霞 刘以林 张改英

山东省聊城市人民医院(252000)

卵巢癌属病死率最高的恶性妇科肿瘤，70%～75%确诊时已处于晚期，预后较差[1]。鉴别肿瘤良恶性有助于改善卵巢癌患者生活质量，从而提高生存率[2]。肿瘤新生血管形成有可能是恶性肿瘤形成机制之一，与肿瘤侵袭性、转移等密切相关；而超声可清晰观察到滋养血管的来源、数量、走向、分布等，与卵巢肿瘤良恶性明显相关[3]。阻力指数(RI)为临床肿瘤内部血管检测参数，RI≤0.4为恶性指标，是目前用于肿瘤分型的主要手段[4]。血管紧张素-2(Ang-2)影响血管生成从而促进肿瘤的生长、侵袭和转移过程，且与卵巢肿瘤良性、交界性及恶性存在明显正相关[5]；血管生成素样蛋白4(ANGPTPL4)作为分泌性糖蛋白，在肿瘤组织和细胞中水平升高，可抑制血管生成和细胞凋亡，促进肿瘤侵袭和迁移过程[6]。本研究检测卵巢肿瘤中多普勒超声血流RI以及血清中ANGPTL4、Ang-2水平，研究RI与ANGPTL4、Ang-2关系，以期为临床诊断提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集本院2016年10月-2019年10月手术切除病理确诊卵巢肿瘤患者84例为研究对象(病例组)，卵巢肿瘤均经病理切片确诊。同期健康体检85例为对照组。纳入标准：①符合病理切片标准；②首次确诊且未经过放化疗；③资料完整。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②患糖尿病；③合并其他妇科疾病；④妊娠期孕妇。本研究经患者或其家属知情并同意，经本院伦理协会审核通过。

1.2 多普勒超声血流RI检测

多普勒超声诊断仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，型号DC-N2S)行超声检查，观察子宫及附件情况，观察卵巢肿瘤的位置、大小、边界、形态及分隔、回声等情况。对肿瘤内部及周边的RI值多次取样的平均值。

1.3 检测 ANGPTL4、Ang-2水平

健康体检者体检当日，患者就诊当天收集静脉血，室温静置2h，3000r/min离心10min，收集血清，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测，严格按照人ANGPTL4、Ang-2 ELISA试剂盒(英国abcam公司)说明书检测血清中ANGPTL4、Ang-2水平。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 基本情况

病例组84例，病理学结果为良性肿瘤23例、交界性肿瘤28例、恶性肿瘤33例。年龄(53.5±8.9)岁(33～76岁)；对照组85例，年龄(54.1±9.0)岁(31～78岁)，两组年龄无差异(P>0.05)。

2.2 两组检测指标比较

病例组RI低于对照组，血清中ANGPTL4、Ang-2水平高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组各检测指标比较

2.3 病例组RI与疾病程度关系

RI在良性肿瘤(0.63±0.09)、交界性肿瘤(0.54±0.07)、恶性肿瘤(0.37±0.06)存在差异(F=94.264,P=0.000)。Spearman法分析，卵巢肿瘤患者RI与疾病良恶性呈负相关(r=-0.476，P<0.05)。超声表现见图1(插页)。

2.4 病例组血清ANGPTL4、Ang-2与疾病程度关系

良性肿瘤、交界性肿瘤、恶性肿瘤者血清ANGPTL4、Ang-2水平存在差异(P<0.05)。见表2。Spearman法分析，卵巢肿瘤患者ANGPTL4、Ang-2与疾病良恶性呈正相关(r=0.398、0.378，P均<0.05)。

2.5 病例组RI与血清ANGPTL4、Ang-2相关性

Pearson法分析卵巢肿瘤患者RI与ANGPTL4、Ang-2相关性显示，RI与ANGPTL4、Ang-2呈负相关(r=-0.639、-0.313，P均<0.05)，见图2；ANGPTL4与Ang-2呈正相关(r=0.331，P=0.002<0.05)，见图3。

表2 病例组不同程度肿瘤者血清水平比较

图2 卵巢肿瘤患者RI与血清中ANGPTL4、Ang-2相关性

图3 卵巢肿瘤患者血清中ANGPTL4与Ang-2相关性

3 讨论

卵巢癌生存率仅有25%～30%[7]。卵巢癌的发生、发展，包括细胞增殖、凋亡，血管生成，肿瘤侵袭、迁移和转移等过程[8]，新生血管不仅可为肿瘤细胞提供营养和氧气，且有利于肿瘤细胞进入血液、淋巴管道，扩散至全身各器官，且目前检查微血管密度、检测血管生成因子以及彩色超声检查血管及其血流动力学是检测血管生成在卵巢肿瘤中发生、发展的重要依据，对检测疾病具有重要意义[9]。

超声检查对软组织的分辨率较高，能够快速检查出病变部位；高频探头能够清晰观察到组织中血流情况，分析病灶及其周围组织异常血流信号，可帮助病灶定性，用于鉴别肿瘤良恶性质[10-11]。在卵巢肿瘤中肿瘤细胞不断增殖，造成血管异常新生，肿瘤病灶处血管分布多且杂乱无规律，易造成静脉短路；不断新生的血管易造成较大压力差，新生血管通透性高、血管壁较薄，流速较高，RI较低[12]；相较恶性肿瘤，良性肿块及其周围组织RI较高，血流不丰富，因此低RI可作为鉴别卵巢和子宫良恶性肿瘤的重要标志[13]。本研究，与对照组相比，病例组RI水平降低，提示卵巢肿瘤中可能或多或少都会存在病灶部位新生血管现象，造成RI水平降低，且良性肿瘤、交界性肿瘤、恶性肿瘤RI依次降低，RI与疾病良恶性呈负相关。提示RI与卵巢肿瘤良恶性关系密切，与樊友彬[14]研究结果类似。临床可根据肿瘤新生血管破坏程度用于反映化疗效果。

血管为肿瘤生长提供氧和营养物质，Ang-2强化肿瘤血管新生，可影响肿瘤血管生成的数量和影响肿瘤侵袭、迁移过程[15]；卵巢肿瘤中高表达，促进血管新生[16]。ANGPTL作为分泌蛋白，包括ANGPTL(1-8)，与Ang家族具有一定同源性，其中ANGPTL3在恶性上皮性卵巢肿瘤中低表达，可诱导血管生成，参与肿瘤生长、转移、浸润过程[17]，ANGPTL4是一种多功能因子，参与肿瘤生成、血管通透性等过程，在血管生成中受微环境影响同时具有促血管生成和抗血管生成双重作用[18];卵巢肿瘤中上调ANGPTL4可激活信号通路、增加血管壁通透性从而促进卵巢肿瘤细胞的增殖和转移[19]。本研究中，与对照组相比，病例组血清ANGPTL4、Ang-2水平升高，提示在卵巢肿瘤中Ang-2、ANGPTL4高表达共同促进了肿瘤疾病的发展。卵巢肿瘤患者ANGPTL4、Ang-2与疾病良恶性呈正相关，提示卵巢肿瘤中ANGPTL4发挥促进血管生成作用，促进卵巢肿瘤病灶组织处血管过度生长，造成疾病加重，Ang-2强化了这一效果。

本文进一步分析发现，卵巢肿瘤患者RI与ANGPTL4、Ang-2呈负相关，提示RI水平越低，血管增生越严重、血管壁通透性越强，增加疾病进程；卵巢肿瘤患者ANGPTL4与Ang-2呈正相关，而血管结构的重建和血管生成是卵巢肿瘤进展和转移的重要肿瘤微环境机制，卵巢肿瘤驱动血管通透性变化，增加腹膜积液，进一步促进肿瘤细胞的增殖和转移、扩散、血管渗漏和水肿，促进血管生成血管生成素Ang-2和ANGPTL4的合成和分泌[20]。ANGPTL4与Ang-2共同作用下加速患者血管生成、驱动血管通透性，促进肿瘤细胞的增殖和转移扩散等过程而加重病情。

综上所述，卵巢肿瘤患者多普勒超声血流RI与血清ANGPTL4、Ang-2水平呈负相关，且ANGPTL4与Ang-2关系密切，影响肿瘤良恶性从而影响疾病。本文初步探讨了因子水平与RI关系，且其影响肿瘤发展，但肿瘤血管生成可能亦受到其他因子影响，寻找新的更直接因子是今后研究重点。