张泽锦,唐 丽
(四川省农业科学院园艺研究所,四川 成都 610066)
白芨(Bletillastriata)为兰科白芨属多年生草本植物,植物干燥块茎为入药部位,主要治疗咳血、吐血、外伤出血、疮疡肿痛等症状。现代研究表明,白芨具有愈合伤口、抗溃疡、止血、抗炎、抗氧化、调节免疫等药理作用[1,2]。
由于长期人为的掠夺式采挖和缺乏保护,白芨野生资源日趋减少,白芨的药用原料出现严重紧缺,现已列为中国30种稀缺瀬危天然药物之一。本研究通过在培养基中添加不同浓度的萘乙酸(NAA),探讨对白芨种子成苗的影响,为快速繁殖白芨种苗提供技术支撑。
试验材料选用白芨种子,将采集的白芨蒴果先用流水冲洗20min,再用小毛刷,刷洗其表面,用流水冲洗干净。在超净工作台上,用75%的酒精溶液浸泡30s,再用无菌水冲洗2次,然后转入1g/L的HgCl2溶液中进行表面消毒,再用无菌水冲洗3~5次,用灭菌过的滤纸吸干表面水分,用摄子将果实拨开,将种子均匀接于培养基中。培养基以MS为基础,添加不同浓度萘乙酸(NAA),培养35d后,再进行间苗。间苗后的培养基全部采用MS培养基,每个培养瓶移栽15株苗,在组培室内培养100d,进行指标测量。
在基础MS培养基中添加不同浓度的萘乙酸(NAA),处理见表1。
表1试验处理
培养间内采用三基色荧光灯,光照强度约为100μmol/m2/s,光期为12h/d,温度为25℃左右。
由图1可以看出,添加1mg/L NAA白芨根长最长,是不添加NAA处理的5.7倍。添加0.5mg/L NAA处理白芨根长1.3cm,显著低于处理5,高于其余处理。添加1mg/L NAA白芨种子生根数最多,达到5.8,显著高于其余处理,其添加NAA的处理3与未添加NAA的处理1的根数无显著差异。由此可见,在MS培养基中添加0.5mg/L以上的NAA,能显著的促进白芨根的伸长,添加1mg/L的NAA能显著促进白芨根数的。
由图2可以看出,添加0.2mg/L NAA白芨鳞茎宽最小,为4.1mm,显著小于未添加NAA的处理1。添加0.1mg/L NAA白芨鳞茎宽最大,为5.4mm,但与处理1无显著差异。随着添加NAA浓度的增高,白芨株高逐渐增高,当添加1mg/L NAA的时候,白芨株高与未添加NAA处理1无显著差异。由此可见,添加1mg/L NAA不仅可以促进白芨种子根的生长,在鳞茎大小和株高两方面与未添加NAA的处理1无显著差异。
白芨种子细小,无细胞器及原生质,胚处于原胚阶段,胚柄退化,无胚乳,在自然状态下若缺少必要的共生真菌等先天萌发条件难以成苗[3]。因此,用种子进行白芨快速繁殖是白芨培育的主要方法,在MS培养基添加1mg/L NAA可以促进白芨种子的生根,且与对照处理相比不影响鳞茎和株高,可以作为白芨种子快繁培养基配方选用。