抗核抗体与体外受精-胚胎移植的结局分析

陆碧玉 黄诚 李忻琳 唐妮 严提珍( 通讯作者)

（广西柳州市妇幼保健院<柳州市生殖与遗传研究所；广西科技大学附属妇产医院、儿童医院> 广西 柳州 545001）

随着不孕不育夫妇的日益增多，辅助生殖技术的应用越来越广泛。体外受精—胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）广泛应用于辅助生殖技术中，尽管促排卵方案和胚胎培育技术有了很大改善，但临床妊娠率却始终徘徊在30%～40%。目前对于抗核抗体与胚胎种植结局的相关性仍不明确，而其对于卵子发育和胚胎发育的影响存在争议。本文主要采用多重微球流式免疫荧光法对反复种植失败的患者进行抗核抗体的检测，同时观察ANA 阳性组和ANA 阴性组的IVF/ISCI 患者的一般情况、促排卵情况及胚胎发育及妊娠结局，探讨ANA 对反复种植失败患者IVF/ISCI 胚胎移植结局的影响。

1.资料与方法

1.1 对象

选取2017 年5 月—2019 年12 月来我院生殖助孕中心进行IVF 和/或ICSI 移植的患者200 例，本方案经伦理学委员会批准，对象已经知情同意并签署知情同意书。纳入标准：符合IVF-ET适应症，两次或更多次胚胎种植失败的患者，无卵巢手术史及放化疗史；排除标准：双方染色体异常，女方子宫形态异常、自身免疫性疾病。

1.2 ANA 检测方法

使用AtheNA Muti-Lyte ANA 测试系统（Zues Scientific）同时测定ANA 和9 种不同的抗核抗体谱（SSA，SSB，Sm，RNP，Scl-70，Jo1，dsDNA，Centrometric B 和组蛋白）。

1.3 IVF-ET 和黄体支持

在阴道B 超引导下，采用单腔取卵针取卵，行IVF 或ICSI授精。

1.4 观察指标

收集患者的受精数、受精率、正常受精数、正常受精率、优胚数和优胚率等情况。

1.5 统计学方法

数据采用SPSS20.0统计学软件分析处理，计数资料采用率（%）表示，行χ2检验，计量资料用均数±标准差（±s）表示，行t 检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 ANA 阳性组和阴性组的胚胎发育情况比较

受精数、受精率、正常受精数、正常受精率两组间比较无统计学差异（P ＞0.05）；优胚数、优胚率阳性组低于阴性组，差异有统计学差异（P ＜0.05）。见表1。

表1 ANA 阳性组和阴性组的胚胎发育情况（±s）

表1 ANA 阳性组和阴性组的胚胎发育情况（±s）

项目 阳性组（n=41） 阴性组（n=159） P受精数 7.51±4.55 7.64±4.25 0.444受精率 72.81(308/423) 72.84(1215/1668) 0.444正常受精数 6.49±3.82 6.50±3.67 ＞0.05正常受精率 62.88(266/423) 61.99(1023/1668) ＞0.05优胚数 2.56±1.97 3.50±2.29 ＜0.05优胚率 40.23(105/261) 54.45(557/1023) ＜0.05

3.讨论

ANA 是一组针对细胞核成分的自身抗体。ANA 主要攻击的是与细胞核内某些结构结合的分子如DNA、RNA、蛋白质和/或其复合物等[1-3]。它们通常存在于自身免疫性疾病和风湿病患者的血清中，并与蛋白质、核酸和蛋白-核酸复合物结合。作为血清学标志物，这些抗体具有诊断和预后意义，并与风湿病的各种表现直接相关。ANA在正常人中的临床意义尚不清楚(患病率为3.8%～12.8%）。虽然许多血清学阳性个体不会发展成自身免疫性疾病，但其他个体可能处于前自身免疫性状态，因为ANA 阳性可能比明显的疾病发生早许多年[4-5]。

近年来的研究显示，自身抗体除与自身免疫性疾病有关外，自身免疫因子还可能在不孕症的发病机理中起重要作用[6]。自身抗体中的ANA 与包括反复自然流产、不孕及IVF-ET 术后的植入失败在内的多种不良事件关系密切[7],为了研究生殖免疫，Zhong 等[8]集中研究了自身免疫因子和体外受精（IVF）/胞浆内精子注射（ICSI）结果，其中重点是针对自身抗体。通过检查特定自身抗体与IVF/ICSI 结果之间的关联，可以揭示潜在的导致IVF/ICSI 失败的致病性自身抗体[9]。ANA 可穿透细胞膜产生细胞毒作用(ADCC)，使细胞有丝分裂进程中断，DNA 合成受阻，导致移植失败。抗dsDNA 抗体具有细胞毒性,诱导细胞凋亡[10]。而自身抗体中的ANA 与不孕不育及种植失败的研究越来越受到重视，其可能导致的妊娠结局也是近年来研究的热点。

本结果显示ANA 阳性组与ANA 阴性组比较，优胚数和优胚率下降.与大部分研究结果类似，ANA 会影响IVF/ICSI 的妊娠结局。本文主要针对两次及两次以上的种植失败的患者，而以往的研究主要针对首次接受IVF/ICSI 的患者，故虽都表明会影响妊娠结局，但是影响的指标不同。ANA 对于不同种植次数，不同分组的IVF/ICSI 患者妊娠结局的影响的指标不同，但提示都具有一定影响。

但是，确切的致病机制尚不清楚，仍需要更多的研究来解释ANA 影响妊娠的具体免疫机制。自身免疫抗体阳性的不育妇女的治疗方法包括阿司匹林，阿司匹林加肝素，肾上腺皮质激素，肾上腺皮质激素加阿司匹林和免疫球蛋白等。Jiao 等[11]的研究显示在诱导排卵前开始联合使用泼尼松和阿司匹林可以提高ANA阳性患者的受精率、妊娠率和着床率，降低流产率。