翦卫星 吴梅青 陈罗湘
湘潭医卫职业技术学院
显微镜物镜头镜片(下称镜片)的清洁和清晰直接关系到实验教学。经常保持镜片的清洁(释义清白,洁净无尘)、清晰(形容词,指看得很清楚,很逼真)是保证显微镜实验教学正常开展和确保实验教学质量的基本条件。为此,课题组2011年开始有计划的对国内常用的四种乙醇乙醚混合清洁液擦拭清洁镜片霉斑.血迹及油污效果的应用研究[1],研究过程中发现乙酸乙酯与乙醇混合后清洁养护镜片也有相同作用,2018年《潭职1号混合液擦拭清洁显微镜物镜头镜片霉斑、血迹及油污效果的应用研究》列入湘潭市科技局研究计划, 现将研究结果报告如下。
1.显微镜物镜头镜片
即高倍物镜头镜片40X,油镜头镜片100X三类,按设计要求分五组共524片。镜片为舜宇XSM―20型生物显微镜镜头配件,淅江宁波生产,先后于2007-2009年购入投入实验教学。其它镜片为重庆等品牌显微镜配足。观察镜片,镜片养护时的清洁状况必需是符合清洁度“差”的镜片,即为观察起点线。
2.“潭职”系列清洁液
即用乙酸乙酯不等量加乙醇不等量(确切含量有待进一步研究确定)混合配成1、2、3、4号清洁液,(无水乙醇,分析纯,安徽安特生物化学有限公司生产,批号1011073601;乙酸乙酯,分析纯,广东光华化学厂有限公司生产,批号20100925)。
1.显微镜物镜头镜片清洁度分度标准[1][2]
2.清洁效果考核指标[2]
分为实验组和对照组。
1.确定观察对象
显微镜物镜头镜片做清洁养护前,凡符合“差”标准的镜片均列入观察对象,每组100个镜片左右,按抽样顺序分配到相关组养护观察,做好实验记录以备查。
2.实验组
实验组镜片的清洁养护采用“潭职”系列清洁液清洁镜片,其中1号组观察98片,2号组观察122片,3组号观察111片,4号组观察105片,共436片。
3.对照组
对照组镜片的清洁养护采用“无水乙醇乙醚”(30%无水乙醇+70%乙醚混合清洁液。新鲜配制,摇匀即用。试剂:无水乙醇,分析纯,安徽安特生物化学有限公司生产,批号1011073601;乙醚,分析纯,衡阳市凯信化工试剂有限公司生产,批号20110630),观察131片。
观察养护的镜片基本上为干片,采用“常规养护方法”[2]的养护清洁流程。
清洁度及清洁效果组间差异统计行X2检验。[3]
“潭职”系列清洁液与对照组的成份和配比含量不一,做为镜片清洁液使用后,其镜片清洁度反应也不一致,显示出各自的特色清洁度分布。具有如下特点:“潭职” 系列 与对照组镜片所示清洁度不一,一是分布角度宽,二是角度离差大,三是组间角度相差悬殊,其中对照组优良率与1组有显著差异(X2= 2.7937,p<0.05),与2组(X2=23.7974,p<0.05),3组(X2=76.6041,p<0.05)和4组(X2=91.3343,p<0.05)其差异均有极显著性。“潭职”1号与对照组谁作为对照组为佳,不能单方面只从差异和显著性方面比较, 重点分析两组各自的內含、构成、组内跨度、组间离差等特色,清洁度分布表一所示对照组角度离差大且宽,表中“优”只占48.5%,而“潭职”1号却占75.5%,但对照组的优良率(88.6%)反超“潭职”1号(80.6%), 失出了在群体中的代表性。所以, “潭职”1号清洁度列为对照液更具有代表性。详见表1。
表1 “潭职”系列清洁液清洁显微镜物镜头镜片后清洁度分布
“潭职”系列清洁液各组清洁镜片的总有效率高,波动在70.5%-98.0%之间,其中1组最高(98.0%)、对照组次之(95.4%),两组比较无显著差异(X2=1.0722,p>0.05),1组与2、3、4组清洁液比较差异均有极显著性。显效率波动范围更大(27.6%--88.5%),对照组(88.5%)最高,1组(80.6%)与2组(62.3%)次之,4组最低(27.6%)。对照组与1组显效率有显著差异,与“潭职”2、3、4组清洁液比较差异均有极显著性,无效率低(2.0%),1组优于对照组(X2=2.7937,p<0.05),优于“潭职”系列2、3、4组清洁液,差异均有极显著性。所以,总有效率、显效率、无效率高低是筛选最佳清洁液最重要的三大效果指标。见表2。
表2 “潭职”系列清洁液清洁显微镜物镜头镜片效果的比较
保持镜片的清洁和清晰,关键是选择什么样的镜片清洁液擦拭和养护。作者收集国内近30年相关的研究论文[4],较全面掌握国内相关方面的资料,开展对国内常用的四种乙醇乙醚混合清洁液,擦拭清洁镜片霉斑.血迹及油污效果的应用研究[1],在研究过程中同时发现乙酸乙酯与乙醇混合后清洁养护镜片也有一些作用。无水乙醇、乙酸乙酯无色透明具有刺激性气味的液体,是强挥发性的,具有优异的溶解性、快干性,它的作用就是增加挥发速度。乙醇的作用是清洁镜面,如果仅仅使用乙醇,那么乙醇在挥发的过程中会吸附空气中的水分凝结在镜面上,严重影响清洁效果。
观察结果表明潭职1号混合清洁液擦拭清洁镜片沾污的霉斑.血迹及油污效果好, 总有效率高(98.0%),显效率高(80.6%),无效率低(2.0%),除显效率1组(80.6%)比对照组(88.5%)略低,三大指标均优于对照组和“潭职”系列2、3、4组清洁液,差异均有极显著性。两高一低的效果指标是筛选最佳清洁液最重要的三大指标之一。潭职1号既能养护清洁显微镜镜头镜片,又能清洁相机、摄像机镜头镜片和眼镜片霉斑.血迹及油污的效果好,去油污、霉斑、血迹一次完成,既省时又省力,是一种既不污染环境、又对人体健康无损害的环保清洁液。研究具有先进性、科学性、实用性、可重复性。见表2。
笔者在前文中曾提出“关于镜片最佳清洁液”的标准问题,这个指的模糊欠全面,国内文献查询目前尚无镜片最佳环保清洁液和相应的标准。个人认为应以下面提法为妥。名称应改为“显微镜物镜头镜片最佳环保清洁液”,简称最佳环保清洁液。最佳环保清洁液应具有三个条件。第一是两高一低的效果指标,第二是不污染环境,第三是对人体健康无损害。谭职1号组与对照组清洁液具备“显微镜物镜头镜片最佳环保清洁液”的三个条件,可确定为镜片最佳环保清洁液。
镜片清洁度分度标准国内尚未见报导。课题组人员从事显微镜实验教学管理和带教实践20多年,在镜片清洁度方面积累了一些经验,创建了学校的显微镜镜头镜片清洁分度标准,分为“优、良、中、差”四级。用肉眼在显微镜下观察,从四个方面决定镜片清洁度。同时考虑肉眼主观观察镜片清洁度时可能出现误差,应用定量(视野面积),定性和视野图像模糊语言等;如视野图像应用图像一目了然,图像欠清晰、视野欠清晰、可视图像、视野不清晰、图像模糊。“标准”在院内实验教学、实验技能考核、科研工作中多次应用效果好,师生满意。[5]
“标准”是显微镜实验室管理的重要内容之一,是显微镜实验教学的重要内容,也是临床、实验教学、科研的重要客观指标,所以,要求各专业及相关教师和医卫类学生特别是检验专业学生熟练掌握。
清洁效果评价标准设计以镜片清洁度“优、良、中、差”四级为依据,客观评价效果。在《乙醇、乙醚混合液擦拭清洁显微镜镜头镜片霉斑.血迹及油污效果的应用研究》[1]和“潭职1号清洁液清洁显微镜物镜头镜片效果的应用研究”中[1]应用自如,“标准”属国内首创,具有先进性、科学性和实用性,既有实用价值,又有推广价值观察。