镇巴县不同品种野生资源淫羊藿质量研究

袁洪超，高显超，徐 进，成世强，贺菁菁

(1.陕西金慧方中药科技有限公司，陕西 镇巴 723600；2.镇巴县科技进步促进中心，陕西 镇巴 723600)

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicomu Maxim.)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum (Sieb.et Zucc.) Maxim.)、巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim.)或朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)的干燥叶。夏、秋季茎叶茂盛时采收，晒干或阴干[1]。是中国药典规定基源最多的药材之一。主要用于阳萎早泄，腰酸腿痛，四肢麻木，半身不遂，神经衰弱，健忘，耳鸣，目眩等症。淫羊藿喜阴湿环境，适生于林下、沟边等湿度和遮阴度较高的生境。野生资源主要分布陕西、甘肃、山西、河南、青海、湖北、四川、广西、吉林、辽宁、浙江、安徽等地。栽培主要分布在陕西、重庆、湖北等地[2-4]。淫羊藿对土壤有极为严格的要求，以中性酸或稍偏碱、疏松、含腐殖质、有机质丰富的土壤油沙壤土为好[5-7]。药典规定淫羊藿有效成份主要是总黄酮和淫羊藿苷[1]，已有研究表明：现有分布的淫羊藿有效成份含量绝大多数都不符合药典标准[3]。本研究针对镇巴县分布的不同品种淫羊藿有效成分进行测定，从而了解镇巴县不同品种淫羊藿质量情况，为今后镇巴县淫羊藿产业发展、品种选育和种植提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

淫羊藿苷(成都普思生物科技股份有限公司，批号：16081202)，乙腈(色谱纯，美国赛默飞公司)，甲醇(色谱纯，美国赛默飞公司)。

1.2 主要仪器

美国Agilent 1260 高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)；细胞型18108 摩尔超纯水机(重庆摩尔水处理设备有限公司)；JA26038 电子天平(上海精科天美科学仪器有限公司)；KQ-500E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；LK-2000A 小型粉碎机(常州德杜精密仪器有限公司)。

1.3 实验材料

实验材料来自于陕西金慧方中药科技有限公司对镇巴县淫羊藿资源考察采样，淫羊藿(Epimedium brevicomu Maxim.)来源于镇巴县长岭镇中坝村；箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatum (Sieb.et Zucc.)来源于镇巴县小洋镇白河村；巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)来源于镇巴县盐场镇柳家河村。取干燥叶，低温烘干，粉碎过3号筛，备用。

1.4 实验方法

1.4.1 色谱条件

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱(5um，250mm×4.6mm)；流速：1.0mL/min；柱温箱：30℃；检测波长：270；流动相为乙腈-水(30：70)等度洗脱。

1.4.2 标准样品溶液的制备

精密称取淫羊藿苷对照品1.0007mg，置于10mL的棕色容量瓶中，加入一定量的甲醇后置于超声溶解，在用甲醇稀释至刻度。

1.4.3 样品溶液的制备

精密称取粉碎过筛备用的巫山淫羊藿、箭叶淫羊藿、淫羊藿样品0.2g，精密称定，置于带塞的锥形瓶中，精密加入稀乙醇20mL，称定重量，超声处理1小时，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取过滤液，备用。

1.4.4 精密度实验

取对照溶液，按照1.4.1的色谱条件，连续进样5次，每次进样相同的体积，记录标准品的峰面积。

1.4.5 重复性实验

称取同一批号的药材，按照1.4.2方法，依法制备5份。在按照1.4.1的色谱条件测定淫羊藿苷的含量。

1.4.6 加样回收率

精密称取5份淫羊藿样品各0.1g，加入1mL淫羊藿苷对照品溶液，按照1.4.3的方法制备，测定含量，计算加样回收率(%)。

1.4.7 含量的测定

称取不同品种淫羊藿样品各0.2g，按照1.4.3方法制备，制备样品溶液，在1.4.1色谱条件下，测定含量，采用外标法计算淫羊藿苷的成分含量(%)。

2 结果与分析

2.1 淫羊藿苷标准品图谱

如图1所示，淫羊藿苷标准品色谱图。

图1 淫羊藿苷标准品色谱图

2.2 精密度考察

淫羊藿苷的峰面积平均分别为2292.67，RSD值为0.27%；结果表明仪器精密度良好。

2.3 重复性考察

淫羊藿苷的含量为0.63%，RSD值为1.8%；结果表明该方法测定结果重复性良好。

2.4 加样回收率

淫羊藿苷加样回收率为100.4%，RSD值为0.38%；淫羊藿苷的加样回收率在95%～110%之间，RSD值小于3%，符合要求。

表1 淫羊藿苷加样回收率实验

2.5 含量测定

中国药典质量标准规定，按照干品计算，本品含淫羊藿苷不低于0.5%，本实验结果表明，淫羊藿苷含量在淫羊藿和巫山淫羊藿中符合药典规定，箭叶淫羊藿中淫羊藿苷的含量未达药典规定。综合以上分析显示，镇巴县淫羊藿和巫山淫羊藿的品质符合药典要求。

表2 镇巴县不同品种淫羊藿样品中淫羊藿含量的测定

3 结论与讨论

淫羊藿苷含量是药典规定评价淫羊藿质量的重要指标，秦为瀚[3]等通过对不同产地15个品种淫羊藿的质量评价研究表明：仅有黔北、天平山、柔毛3个品种达标，其中天平山仅有30%的样品达标，柔毛仅有46%样品达标；本研究针对镇巴县域内3个不同品种的淫羊藿品质研究表明，通过对3个品种淫羊藿的淫羊藿苷的含量测定并对数据进行处理分析；结果表明：镇巴县域内分布的3种淫羊藿，其中淫羊藿和巫山淫羊藿的有效成份淫羊藿苷含量均达到药典标准。