苜蓿黄酮对肉兔生长性能、肉品质和脂质氧化的影响

汤佩芬，李三要

近年来，有关动物饲料中含有天然生物活性物质的问题受到重视，这将丰富动物源性产品，并在一定程度上改善动物健康状况。黄酮类化合物是存在于植物和水果中的天然物质，是动物和人类饮食中有价值的成分，是一类广泛存在的大分子，具有抗氧化活性，其平面结构、数量和羟基位置对自由基清除能力和抑制自由基产生酶起至关重要的作用（邹丽秋等，2016）。紫花苜蓿是具有较高产量和良好营养品质的一种植物，在饲料作物中发挥重要作用，是一种很有前景的植物化合物资源。黄酮类化合物是紫花苜蓿的生物活性成分之一，迄今为止，在紫花苜蓿的不同植物部位已鉴定出多种黄酮类化合物（何峰等，2014）。紫花苜蓿黄酮类化合物中最重要的是黄酮类化合物有麦黄酮和芩黄素糖苷，它们具有比传统抗氧化剂如丁基羟基甲苯更高的抗氧化活性。麦黄酮和芩黄素糖苷在多种低密度脂蛋白氧化体系中表现出良好的抗氧化性能，并与抗坏血酸等抗氧化剂起协同作用（Hwang等，2001）。苜蓿及其制品是目前研究的一个热点课题，而在动物营养试验中使用苜蓿提取物的研究较少，且主要以家禽为研究对象。苜蓿黄酮还具有雌激素作用，在一定范围内可显著促进家畜生长性能，改善胴体质量，清除自由基，提高机体抗氧化能力，增强免疫力（Xiong等，2014）。Chen等（2016）报道，在 28～ 70日龄鹅日粮中添加苜蓿萃取物可以提高采食量，对屠宰性能、脏器和血液生化指标无负面影响。肌肉脂质氧化是兔肉生产的主要问题，由高多不饱和脂肪酸含量较高引起，可能导致脂质氧化，使货架期降低。紫花苜蓿黄酮类化合物对生长肉兔生产性能、胴体特性、肉质和脂质氧化的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计 试验选择160只42日龄的杂交肉兔，随机分为4组，每组4个重复，每个重复10只肉兔。对照组饲喂基础日粮，处理组在基础日粮中分别添加0.04%、0.08%和0.12%苜蓿黄酮，试验从断奶（42 d）开展到屠宰（102 d），共60 d。试验日粮配方及营养水平见表1。试验期间，肉兔自由采食3种等氮、等能量日粮，试验日粮储存在避光、阴凉、黑暗处，以防止饲料脂质氧化。

表1 试验日粮原料组成及营养水平

1.2 生长性能和屠宰特性 试验期间，每两周分别记录活重和采食量。生长性能数据记录为60 d。整个试验期间，每天记录死亡率。试验结束后计算日平均采食量、日平均增重和饲料转化率。在肉兔102日龄时，每组随机选择12只体重接近平均体重的肉兔（3只/重复）进行放血处死，收集血浆。切除皮肤、生殖器、膀胱、胃肠道和腿部远端。对胴体称重，记录皮肤和全胃肠道重量，并表示为屠体重量的百分比。屠体（包括头部、胸腔器官、肝脏和肾脏）在4℃的冰箱中冷藏24 h。记录冷冻胴体重量，按冷屠体重与屠体重的比值计算屠宰率。头部和肝脏重量以冷屠体重百分比表示。

1.3 肉质和抗氧化指标测定 采用便携式pH仪测定屠宰后最长肌pH，在第7腰椎水平切开的腰部表面，测量肉的颜色，颜色测量以亮度（L）、红度（a）和黄度（b）表示。每个样本测定3个值，平均后得到肉的颜色值。采用硫代巴比妥酸反应性物质（TBAR）法，对冻藏30 d后的肌肉样品进行脂质氧化测定，样品分为一式两份，用分光光度计在532 nm处读取吸光度。TBARS值由标准的 1，1，3，3-四乙氧基丙烷曲线计算，氧化产物被量化为丙二醛当量（mg 丙二醛/kg肉）。根据Seljeskog等（2006）的研究方法测定肝脏和血浆丙二醛的浓度。即，用蒸馏水1：10（样品和水）在室温下对肝脏样品进行匀浆，为丙二醛的提取做准备。50 μL血浆和肝脏样本与高氯酸混合后加入150 μL硫代巴比妥酸，用力动摇10 min后放置在沸水浴中60 min，之后冷却，-20℃保存20 min。加入300 μL甲醇和100 μL 20%三氯乙酸，样本在10000 rpm离心机中离心6 min，之后取10 μL的上层清液通过高效液相色谱法进行分析。

1.4 统计分析 试验数据采用SPSS软件进行单因素方差分析，采用用Tukey法进行多重比较，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 日粮添加苜蓿黄酮对肉兔生长性能的影响由表2可知，在整个试验期间，日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对肉兔末重、日采食量、日增重和料重比均无显著影响（P＞0.05）。

表2 日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对肉兔生长性能的影响

2.2 日粮添加苜蓿黄酮对肉兔屠体特征和肉质的影响 由表3可知，除了0.12%和0.04%苜蓿黄酮组较对照组显著提高最长肌肉色亮度外（P＜0.05），日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对屠体分割重量和其他肉质指标的影响均无显著差异（P＞ 0.05）。

表3 日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对肉兔屠体特征和肉质的影响

2.3 日粮添加苜蓿黄酮对肉兔抗氧化性能的影响 由表4可知，日粮添加苜蓿黄酮显著影响肌肉硫代巴比妥酸反应物（TBARS）值，表现为肌肉丙二醛含量显著降低（P＜0.05），其中0.12%苜蓿黄酮组肌肉丙二醛含量最低，其次是0.08%、0.04%苜蓿黄酮组和对照组。由表5可知，日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对肝脏和血浆丙二醛含量均无显著影响（P＞0.05）。

表4 日粮添加不同水平苜蓿黄酮对肉兔血浆和组织丙二醛含量的影响

3 讨论

在整个试验期间，日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对肉兔生长性能无显著影响，这些结果表明，苜蓿黄酮对生长肉兔生长性能无负面影响，这与Dong等（2007）的研究结果一致，其认为苜蓿提取物对肉鸡生长性能无显著影响。Jiang等（2007）也观察到类似结果，他们发现，添加苜蓿粉对14～49日龄肉鸭的生长性能没有影响。Ouyang等（2016）报道，与对照组相比，在肉鸡日粮中添加苜蓿黄酮可以提高生长性能，尤其是当添加量为15 mg/kg时。本研究肌肉pH在兔肉正常范围内，这在不同研究中都有记录，这些研究都是在兔饲粮中添加含有类胡萝卜素、单宁和类黄酮的植物添加剂（Kovitvadhi等，2016）。本研究日龄添加不同水平的苜蓿黄酮对肉色参数的影响不显著，这与Ouyang等（2016）研究结果一致。

抗氧化剂可以降低肌肉组织对脂质氧化的敏感性，黄酮类化合物是强效抗氧化剂，通过清除和抑制自由基、超氧阴离子和脂质过氧自由基的产生和启动，或通过激活超氧歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶等抗氧化酶来保护细胞（Kumar和 Pandey，2013）。日粮添加苜蓿黄酮显著影响肌肉硫代巴比妥酸反应物值，表现为显著降低肌肉丙二醛含量，这可能与苜蓿黄酮化合物的抗氧化活性有关。Mattioli等（2016）也发现对兔肉脂质氧化的类似积极影响，他们认为这种效应可能与增强肉类抗氧化物质沉积有关。

关于日粮中添加紫花苜蓿对兔肉脂质氧化的影响有限，对猪肉和禽肉脂质氧化的研究较少。Karwowska等（2010）认为，在火鸡日粮中添加15和30 g/kg的紫花苜蓿蛋白叶黄素浓缩物并不能降低胸肌和腿肌的脂质氧化水平。另一方面，Grela等（2009）报道，在猪日粮中添加3%的紫花苜蓿浓缩物可以显著降低最长肌的脂质氧化。丙二醛是组织中氧自由基诱导的脂质氧化反应的脂质过氧化代谢产物之一。Ouyang等（2016）报道，日龄添加苜蓿黄酮降低血清丙二水平，且呈剂量依赖性，当添加水平为15 mg/kg时，血清丙二醛水平最低，结果表明，黄酮类化合物与抗氧化酶活性有关，而紫花苜蓿提取物中含有的某些植物分子（如紫花苜蓿异黄酮）可能与这种活性有关。

4 结论

在本试验条件下，日粮添加不同水平的苜蓿黄酮对生长肉兔生长性能或胴体特征无显著影响。另一方面，日粮补充苜蓿黄酮可以通过剂量-依赖的方式降低TBARS值来改善肌肉氧化稳定性。