家禽胚蛋注射技术的应用研究(综述)——矿物质篇

贾良梁 译自，97(2018)：2331～2333

夏俊花 校

1 电解质

为了检测电解质作为商品化生产的家禽入孵种蛋胚胎注射稀释液的应用潜力，McGruder等测定了多种生理电解质溶液的多个注射剂量和浓度以及一种电解质-碳水化合物复合溶液(Electrolyte-Carbohydrate Complex Solution，ECC)对肉鸡的入孵种蛋胚胎发育和所孵出雏鸡生产性能的影响。他们将不注射的入孵种蛋和仅注射117 mmol生理盐水的入孵种蛋作为对照组，将注射一种电解质溶液或ECC的入孵种蛋作为试验组。这些电解质分别为枸橼酸三钾、氯化钾和磷酸二氢钠，ECC含有氯化钾、枸橼酸三钾、氯化镁、醋酸锌、硫酸铜、枸橼酸钠、氯化钠、葡萄糖和蔗糖。虽然入孵种蛋注射电解质或ECC后胚胎的含水量提高了，但在孵化第18天将200 μL含5.0 mmol枸橼酸钠 或含1∶400亦 或1∶800 ECC的 溶液注入入孵种蛋胚胎的羊膜腔中，孵化第18天时胚胎相对于种蛋的重量(简称“胚胎相对重”，%)未受到有害的影响；此外，注射200 μL的生理盐水溶液(含量为117 mmol)、氯化钾溶液(含量为4.0 mmol～5.5 mmol)或磷酸二氢钠溶液(含量为0.5 mmol～2.0 mmol)不会影响入孵种蛋胚胎的发育或所孵出雏鸡的生产性能。虽然注射的200 μL或2 000 μL生理盐水(含量为117 mmol)可以减少孵化第0天到第18天入孵种蛋的重量损失量，并可提高胚胎的含水量，但是注射200 μL的氯化钾溶液(含量为5.5 mmol)、枸橼酸三钠溶液(含量为5.0 mmol)、磷酸二氢钠溶液(含量为1.0 mmol)或ECC溶液(浓度为1∶400)不会影响这两项指标。

于孵化第18天给试验组入孵种蛋的胚胎注射含5.5 mmol氯化钾的ECC 溶液(1∶400)或注射浓度为117 mmol的生理盐水溶液，所孵出雏鸡3日龄和10日龄时的血浆折射率高于对照组入孵种蛋所孵出雏鸡的，但是注射氯化钾浓度为5.5 mmol的枸橼酸三钾溶液(含量为5.0 mmol)不会出现上述情况。我们可以断定，给入孵的肉鸡种蛋胚胎单独注入200 μL的氯化钾溶液(浓度为5.5 mmol)或枸橼酸三钾溶液(浓度为5.0 mmol)或两者联合注射具有较大的商用价值。McGruder等进一步指出，在进行入孵种蛋胚胎注射时，注射液的剂量应小于2 000 μL，这些溶液中的氯化钾实际上起到了电解质的作用，且该作用优于氯化钠的。

2 微量元素

硒是一种非金属必需微量元素，对家禽的健康具有重要的作用。Lee等给入孵的肉鸡种蛋胚胎注射了硒，随后将所孵出雏鸡置于坏死性肠炎感染的试验性环境下后进行攻毒，并检测硒的胚胎注射效果。他们将试验种蛋分成不添加硒组、添加10 μg硒组和添加20 μg硒组，在孵化第18天用消毒的注射针和真空注射系统分别将不含、含10 μg亚硒酸钠或含20 μg亚硒酸钠的100 μL磷酸盐缓冲生理盐水注入入孵种蛋的胚胎羊膜腔内，随后于所孵出雏鸡14日龄时，用巨型艾美耳球虫(Eimeria maximaoocysts)以及18日龄时用产气荚膜梭状芽孢杆菌(Clostridium perfringens)进行攻毒，每羽雏鸡的巨型艾美尓球虫和产气荚膜梭状芽孢杆菌攻毒剂量分别为1.0×104个孢子化卵囊和1.0×109CFU。结果发现，由孵化期间注射不含硒的溶液的种蛋所孵出的雏鸡和用上述两种病原体攻毒的雏鸡20日龄时的体重均轻于孵化期间入孵种蛋或雏鸡出雏壳后采用其他处理方式处理的雏鸡的体重。然而，与孵化期间种蛋胚胎注射不含硒的溶液并在出壳后接受上述两种病原体攻击的雏鸡相比，孵化期间种蛋胚胎注入20 μg硒可以显著提高所孵出雏鸡的体重。在接受两种病原体攻毒的雏鸡中，孵化期间种蛋胚胎注入10 μg硒可以使雏鸡的病变评分值明显小于孵化期间种蛋胚胎注射不含硒的溶液的。此外，10 μg硒组雏鸡的血清过氧化氢酶活性以及丙二醛和过氧化物歧化酶的水平下降，20 μg硒组雏鸡的血清过氧化物酶活性和丙二醛水平降低。10 μg硒组和20 μg硒组入孵种蛋所孵出的雏鸡体内的白细胞介素-8转录水平、一氧化氮合成酶表达水平以及血清中抗产气荚膜梭状芽孢杆菌α-毒素和抗NetB毒素的抗体水平提高，但谷胱甘肽过氧化物酶7的mRNA表达水平下降。因此，当生长环境受到坏死性肠炎等致病因子污染时，雏鸡的生长速度、免疫应答水平和抗氧化反应水平可以通过在孵化第18天向入孵种蛋胚胎注射硒元素来改善。

在两篇姐妹论文中，Oliveira等报道了给罗斯708肉鸡的入孵种蛋胚胎注射微量元素锌、锰和铜后对种蛋孵化率、所孵出雏鸡的生产性能和胫骨特性的影响。研究人员将上述三种微量元素的有机态溶于150 μL含有商用稀释剂的溶液中，随后用一次可同时注射56枚种蛋的商用自动多蛋注射机于孵化第17天将注射液注入种蛋胚胎的羊膜腔或肌内中。Oliveira等发现，在孵化的第21.5天，与不注射有机微量元素的对照组种蛋相比，注射含最高浓度有机微量元素(锌、锰和铜的含量分别为0.544 mg/mL、0.260 mg/mL和0.030 mg/mL)的 稀 释液会降低种蛋的孵化率。然而，由注射最高浓度有机微量元素的种蛋所孵出雏鸡在骨骼灰分含量上要高于仅注射稀释液的对照组种蛋所孵出的雏鸡以及注射较低浓度(锌、锰和铜的含量分别为0.544 mg/mL、0.260 mg/mL和0.030 mg/mL)有机微量元素的种蛋所孵出的雏鸡。虽然向入孵种蛋胚胎注射较高浓度的有机微量元素可能会对孵化率产生不利影响，但是这三种有机微量元素具有增强骨骼矿化的潜在作用。有人建议，注射略低浓度的有机矿物质很有可能会促进种蛋胚胎骨骼的矿化而不会影响种蛋的孵化率。

在另一篇论文所述的试验中，Oliveira等(2015a)采用相同的肉鸡品系和微量元素处理方案，但测定了等待入舍的时间(禁饲禁水)对雏鸡生产性能的影响。结果表明，24 h的等待入舍时间和营养摄入受限会对雏鸡出壳后前21 d的生产性能产生不良影响：增重和采食量减少，饲料转化率变差。与Oliveira等(2015b)的发现相似，种蛋入孵时注射低浓度的或高浓度的有机微量元素不会影响所孵出雏鸡的生产性能。然而，注射最高浓度有机微量元素的种蛋所孵出雏鸡1日龄时的骨骼灰分含量高于不注射有机微量元素而仅注射稀释液的对照组种蛋所孵出雏鸡的以及注射较低浓度有机微量元素的种蛋所孵出雏鸡的。此外，入孵种蛋胚胎注射最高浓度的有机微量元素后，所孵出雏鸡21日龄时的骨骼灰分含量高于不注射有机微量元素的入孵种蛋所孵出的雏鸡的。与两个对照组的种蛋所孵出雏鸡相比，两个有机微量元素注射组的种蛋所孵出雏鸡1日龄时胫骨中的锰含量更高，且较高浓度有机微量元素注射组的种蛋所孵出雏鸡7日龄时骨骼中的锰含量高于不注射对照组的入孵种蛋所孵出雏鸡的，21日龄时骨骼中的锌含量高于不注射组和稀释液注射组种蛋所孵出雏鸡的。总而言之，研究表明对入孵种蛋胚胎进行的两种有机微量元素方法均有利于所孵出雏鸡的骨骼矿化作用，但是均不能消除雏鸡等待24 h入舍时禁饲禁水对其增重和饲料转化率的危害。两篇系列论文的综合结果表明，将3种有机微量元素作为入孵种蛋胚胎注射方案组成部分对所孵出肉鸡21日龄前的骨骼矿化作用有潜在的功效，但是这些处理可能无法消除雏鸡推迟24 h入舍对随后生长性能的不利影响。