肺癌自身抗体对肺结节良恶性鉴别的临床价值

蔡学琴 王保龙

在全球所有癌症中，肺癌的发病率和死亡率排名第一[1]。因为肺癌早期的临床特征不明显，70%～80%的肺癌患者在中晚期才能被诊断出来，5年总生存率较低[2]。因此，肺癌的早期诊断十分关键，这就需要一个相对完善的早期肺癌诊断方案来辅助临床医生诊断，从而及时进行干预和治疗，改善肺癌患者预后。 LDCT技术是临床上应用最广泛的肺癌早期筛查方法，但LDCT检查对肺小结节的良恶性鉴别诊断能力较差，常常造成早期肺癌的漏诊或误诊[3]。在肿瘤发展的早期阶段，肿瘤细胞表面会表达一些异常抗原物质，患者的免疫系统识别这些抗原并产生相应的抗体。经体液免疫的扩大效应影响后，可在患者血清中检测到高表达的自身抗体[4]。本文重点介绍肺癌自身抗体在鉴别肺结节良恶性中的临床意义。

资料与方法

1 一般资料 选取2018年10月～2019年2月住院的71例胸外科无症状肺结节患者，手术前采集外周血分离得到血清标本，最终病理结果通过组织学方法确诊，其中58例为肺恶性肺结节，13例肺良性肺结节。对照组选取同期健康人10例。所有患者在采集外周血标本时未经过任何治疗（手术治疗、放、化疗和药物治疗），未诊断出其他组织或器官的癌症。

2 方法 从无症状肺结节患者和健康受试者体内采集4 mL空腹静脉血，分离出血清后-80℃冻存。采用ELISA试剂盒（杭州凯保罗生物技术有限公司）对标本进行集中检测，读取酶标仪位于450 nm处的吸光度值。自身抗体正常参考范围：P53：0～13.1 U/mL、PGP9.5：0～11.1 U/mL、SOX2：0～10.3 U/ mL、GAGE7：0～14.4 U/mL、GBU4-5：0～7.0 U/mL、MAGE：0～11.9 U/mL、CAGE：0～7.2 U/mL，任意一种自身抗体浓度超过其参考范围即为阳性，七种自身抗体浓度均在参考值范围内即为阴性。

3 统计学处理 应用SPSS 22.0软件，因连续型变量呈非正态分布，使用中位数（四分间距）表示，Kruskal-Wallis检验用于组间比较，计数数据用例（%）表示，χ2检验用于率的比较。使用接受者操作曲线（ROC）分析七种自身抗体的诊断性能，检验水准α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

1 不同临床特征的肺恶性结节患者自身抗体阳性率对比 不同临床特征（年龄、性别、结节大小、结节数量、结节性质）恶性肺结节患者血清自身抗体阳性率无差异（P＜0.05），见表1。

表1 不同临床特征的肺癌患者血清自身抗体阳性率比较

2 血清自身抗体表达水平对比 肺恶性结节患者血清自身抗体的表达水平高于另外两组，而非肺良性结节患者与健康人的自身抗体表达水平无差异（P＞0.05）见表2。

表2 肺癌组和对照组7项自身抗体表达水平[M(P25～P75)]

3 肺恶性结节与良性结节ROC曲线 七种自身抗体 P53、 PGP9.5、 SOX2、 GAGE7、 GBU4-5、MAGEA1、 CAGE的曲线下面积（AUC）分别为0.791、0.759、0.775、0.792、0.729、0.805、0.762，都大于0.5，且7种自身抗体联合检测的诊断效能增加（AUC=0.822，P＜0.05），具有一定的诊断意义，总体灵敏度和特异性分别为81.0%和76.9%，见图1。

4 LDCT与联合自身抗体检测的阳性率对比 对于无症状肺结节患者，LDCT检查对肺恶性结节的阳性检出率为81.7%，联合自身抗体检测后，阳性检出率增加至94.0%（P＜0.05），并且检测的假阳性率降低，见图2。

讨 论

随着全球大气污染加重和吸烟人数增加，每年肺癌的新发病例不断增加，同时由于肺癌缺乏早期诊断方法，其总体预后较差，显著增加了全球医疗负担。因此，肺癌早期诊断的重要性显而易见，而目前临床普遍使用的LDCT检查有明显的局限性。LDCT检查对肺结节的鉴别诊断尤为困难，存在假阳性率过高的问题。美国一项研究报道，LDCT检查肺癌阳性率不足40%，检出肺结节的部分患者在进行非手术有创检查后有76%为良性结节[5，6]。此外，临床常用的血清肿瘤标志物，如NSE、CYFRA21-1、SCC、CEA、ProGRP等，在晚期肺癌的阳性表达率较高，但用于诊断早期肺癌的特异性和敏感性较低[7]。文献报道[8]，肺癌患者血清中的肿瘤抗原激活机体免疫系统，促使浆细胞释放大量自身抗体，在临床尚未诊断的肿瘤发生早期被检测到。周彩存等牵头的多中心临床验证试验结果表明肺癌患者的自身抗体浓度显著高于良性肺结节患者。总体的敏感性为61%，特异性为90%，早期肺癌患者自身抗体的敏感性高达60%[9]。由此可见，肺癌自身抗体是一种较为理想的肺癌早期检测手段。

本研究中，肺恶性结节组的7种自身抗体的表达水平高于肺良性肺结节和对照组，与先前的研究[10，11]一致，提示自身抗体对良性和恶性肺结节的鉴别诊断具有一定的临床意义。在不同性别、年龄、结节大小、结节数量和结节性质的肺恶性结节患者中，自身抗体表达的阳性率差异无统计学意义，表明自身抗体可广泛应用于肺恶性结节的辅助诊断，不受各种临床特征的影响。本研究ROC曲线分析结果显示，7种自身抗体联合检测具有比单一检测更高的诊断效率，AUC为0.822，表明肺癌自身抗体可用于肺恶性结节辅助诊断。此外，LDCT检查联合自身抗体检测后，可显著减低LDCT检查的假阳性率（18.3%降至6.0%），提高肺恶性结节的阳性检出率，提示LDCT联合肺癌自身抗体检测考虑作为一种早期肺癌筛查方案，对于无症状肺小结节患者，可进行肺癌自身抗体检测，若结果阳性则再进一步行有创确诊检查，若结果阴性则定期随访，从而降低LDCT检查的假阳性率和避免过度检查问题。

时广利等[12]研究表明在非小细胞肺癌中，P53、PGP、GBU 4-5和CAGE 在Ⅲ期和Ⅳ期的表达水平显著高于I期和Ⅱ期。本研究收集的病例为无症状肺结节患者，均为早期肺癌患者，因此无法确定肺癌自身抗体在不同的TNM分期方面是否有差异。Chapman等[13]发现P53、CAGE、GBU4-5在非小细胞肺癌和SOX2在小细胞肺癌中的灵敏度和特异度均较高。而由于本研究的标本量较少，收集的肺癌病理类型均为腺癌，后期需进一步加大样本量，以研究肺癌自身抗体与不同病理类型之间的联系。既往研究[14]认为直径大于20 mm的肺结节恶性概率为64%～82%，而本研究结果提示肺癌自身抗体与肺结节大小无显著相关性，一方面可以说明肺癌自身抗体的临床应用不受结节大小的影响，另一方面原因可能是本研究的研究对象是入住我院胸外科、拟行手术切除的无症状肺结节患者，实际上是临床医生根据LDCT影像结果初筛可能是恶性结节的患者，研究对象的范围相对缩小，后期需扩大研究对象的范围来进行进一步研究。

总之，本研究结果表明，联合检测七种肺癌自身抗体在肺结节良恶性鉴别诊断具有一定的临床意义，并具有高特异性和高灵敏度，可以弥补 LDCT检查高假阳性率的不足之处。因此，本研究提出，肺癌自身抗体检测和LDCT检查相结合可考虑作为一种早期肺癌筛查方案，广泛应用于肺癌高危人群，以提高早期肺癌的检出率。