家禽胚蛋注射技术的应用研究(综述)2

贾良梁

摘  要：本文讨论了给入孵种蛋的胚胎注射睾酮、促甲状腺激素释放激素、甲状腺素、促肾上腺皮质素释放激素、生长激素和胰岛素样生长因子对家禽胚胎出壳后生长性能的影响。

关键词：肉鸡;胚蛋注射;激素

中图分类号：S815 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2020）01-0007-03

研究人员围绕给入孵种蛋的胚胎注射睾酮和甲状腺素对肉鸡胚胎的影响、胚蛋注射促甲状腺激素释放激素（Thyrotropin Releasing Hormone，TRH）和促肾上腺皮质素释放激素（Corticotrophin Releasing Hormone，CRH）分别对火鸡和肉鸡的入孵种蛋胚胎的影响以及注射鸡生长激素（Growth Hormonem，GH）和胰岛素样生长因子1 （type-1 Insulin-like Growth Factor，IGF-1）对初生雏鸡质量的影响进行了研究。

根据雄性鸡胚血清含高水平雄激素能够刺激肌肉发育并可提高鸡胚出壳后肌肉重量的假设，Henry和Burke在孵化前用胚蛋注射法给爱拔益加肉鸡×罗斯肉鸡的入孵种蛋注射睾酮。他们用配置25-G针头的注射器将含0.125 μmol、0.250 μmol或0.500 μmol睾酮的50 μL 70%乙醇人工注入10 mm深处的蛋清中。结果发现，注射睾酮后，鸡胚的死亡率、浅胸肌肌肉特性以及孵化第12天、第16天和第20天时雄性鸡胚的重量未受到影响。然而，雌性鸡胚在孵化第12天时的体重下降，蛋白质含量和孵化第16天时鸡胚浅胸肌的比例降低。

除单独注射睾酮以外，他们还测定了梯度剂量的抗雄激素氟他胺（50 μL 70%乙醇含0、0.58 μmol、1.16 μmol、1.74 μmol或2.90 μmol的氟他胺）与固定剂量的睾酮（0.50 μmol）联合使用的效果。在每项试验中，氟他胺于孵化前或孵化期的第8天注射。尽管注射氟他胺对雄性鸡胚的体重、浅胸肌蛋白含量或DNA含量无显著影响，但雌性鸡胚的这些变量均受到了影响。如果在孵化前注射，这些参数从较低剂量组至1.74 μmol组逐步提高;但是，在注射       2.90 μmol睾酮的雌性鸡胚上，这些参数在孵化期的第16天时下降。孵化第8天时注射氟他胺对鸡胚浅胸肌的DNA含量的影响与之相似，但是在孵化第8天时注射睾酮仅影响雌性鸡胚在孵化第20天时的蛋白质含量和浅胸肌的比例。在这些不同结果上的一致发现是睾酮和抗雄激素仅影响雌性鸡胚，且注射的时机和剂量、鸡胚胚龄会影响所产生的反应。

Christensen和Phelps用1 mL注射器在孵化第24天对火鸡入孵种蛋的胚胎人工注射TRH，以检测TRH在火鸡种蛋胚胎中充當促分泌素的能力。在最初的试验中，他们将含2.15 μg TRH的200 μL生理盐水注射到入孵种蛋的气室中;在后续的试验中，他们将含5.00 μg TRH的200 μL生理盐水从入孵种蛋的底部注入胚胎中。无论采用哪种注射途径，注射60 min后，火鸡入孵种蛋胚胎血清中的甲状腺素浓度均能够在延时30 min后有效提高5 h。研究人员使用类似的试验方案检测了两个不同火鸡品系的入孵种蛋胚胎血清中的甲状腺素对注射TRH的反应。一个火鸡品系的入孵种蛋胚胎血清中的甲状腺素水平轻微下降，而另一个品系的入孵种蛋胚胎血液中的甲状腺素水平持续上升120 min，研究人员认为这种差异是由两个品系在下丘脑-垂体-甲状腺轴系的成熟性上存在细微差异造成的。我们可以认为TRH是控制孵化第24天火鸡胚胎中甲状腺素水平的一个有效的促分泌素。这些结果进一步表明，这种释放激素能够用于调节火鸡雏鸡的出壳水平和出壳时机。

结合对蛋壳温度的控制，Afsarian等研究了给胚蛋注射甲状腺素对肉雏鸡应对腹水诱发疾病后的存活力的影响。每枚入孵种蛋被注入含65 ng甲状腺素的0.5 mL灭菌蒸馏水。研究人员在孵化第18天时用配置27-G针头的注射器对入孵种蛋的胚胎羊膜人工注射甲状腺素。注射后，胚胎的卵黄重量减轻，雏鸡出雏和42日龄时的体重提高，次等雏鸡的数量减少。此外，注射甲状腺素能够降低由寒冷诱发的腹水所造成的死亡率。总的来说，这些结果表明，给入孵种蛋的胚胎注射甲状腺素能够提高出壳雏鸡的质量和生产性能，降低由寒冷诱发的腹水的发生率。

在最近针对孵化期最后一周开展的一系列试验中，Watanabe等给入孵种蛋的气室、蛋清或胚胎羊水人工注射了CRH或CRH受体的兴奋剂和拮抗剂。在两项试验中，他们于孵化的第18天向科宝500肉鸡的入孵种蛋气室注射含2 μg CRH的   100 μL 0.9%生理盐水。与注射生理盐水的对照组入孵种蛋相比，注射CRH的试验组入孵种蛋的雏鸡平均提前22 h出雏。此外，注射CRH可以提高雏鸡的出雏成功率和1日龄时的质量，且不会影响7日龄时的体重。相反，在孵化第16天注射低剂量的CRH会对科宝500肉鸡的入孵种蛋胚胎产生相反的作用，在孵化第18天对科宝500肉鸡的入孵种蛋注射CRH受体的激动剂和拮抗剂不会影响入孵种蛋的孵化期。此外，在孵化第18天给罗斯208肉鸡的入孵种蛋气室注射2 μg或10 μg的CRH不会加快雏鸡的出雏速度。这些试验得到的不同结果以及注射后胚胎血清中皮质酮浓度未上升使研究人员认为CRH不能有效通过入孵种蛋的气室膜进入胚胎的循环系统。意外的是，如果采用相似的处理方式注入入孵种蛋的蛋清或胚胎羊膜中，入孵种蛋的平均孵化期不会受到显著的影响。研究人员最后认为，如上所述的入孵种蛋胚胎CRH注射方式不能作为提高商业化孵化场生产性能的实用方法。

正如在大鼠上获得的结果一样，Barbarino等的研究证明CRH能够抑制由生长激素释放激素诱导的GH分泌。该研究的结果还表明不同性别对GH分泌的神经调节可能不同。虽然上述报道中CRH会影响GH的分泌，但是对入孵种蛋胚胎注射CRH不会提高孵化场的生产成绩，我们或许可以认为，对入孵种蛋胚胎注入GH同样不会影响种蛋的孵化率或雏鸡出壳后的生产性能。尽管如此，在孵化第1天、第4天或第7天直到第18天，Kocamis等用配置22-G针头的注射器给哈伯德肉鸡的入孵种蛋胚胎蛋清人工注射含100 ng鸡GH的100 μL缓冲生理盐水，结果观察到肉雏鸡42日龄的体重和组织发育受到了显著的影响。试验肉鸡对不同时期注射GH后产生的应答同样存在性别差异。虽然在孵化期的任何时期注射GH不会影响入孵种蛋的孵化率，但公雏鸡和母雏鸡的累计饲料转化率均得到了提高。此外，在孵化期的第15天和第16天给胚胎注射GH可以提高母雏鸡的体重和胸肌重，在孵化第1天注射则可以提高公雏鸡的体重和母雏鸡的肝脏重，在第11天注射会提高公雏鸡的肝脏重。此外，在孵化第11天或第16天给入孵种蛋的胚胎注射GH，鸡胚体内的羟脯氨酸水平提高，孵出的母雏鸡42日龄时的胫骨横截面积增加。除了CRH和GH分泌之间的相互作用外，GH可能会在肉用鸡入孵种蛋中产生CRH无法诱导产生的生理效应。

Kocamis等报道了利用胚蛋注射法给入孵种蛋的胚胎注射IGF-1对肉鸡长骨生长的影响。他们在孵化第1天、第2天、第3天或第4天用配置22-G针头的注射器人工将含100 ng IGF-1的100 μL乙酸和牛血清白蛋白溶液注射到哈伯德×罗斯肉鸡的入孵种蛋中。此方法能够提高肉用公雏鸡骨骼中的羟脯氨酸浓度，但是会提高它们的体重，并降低42日龄时相对于体重的股骨骨折负荷。我们可以预测，IGF-1对肉鸡骨骼的机械特性的影响具有部位特异性，且IGF-1可以降低股骨的绝对骨折负荷。

原题名：In ovo applications in poultry： A review（英文）

原作者：E D Peebles （密西西比州立大学）