家禽胚蛋注射技术的应用研究(综述)

贾良梁

摘  要：本文讨论了多种为提高家禽健康和生产性能对正在孵化的种蛋注射各种不同物质的禽胚注射法或胚蛋注射法，也称卵内注射法。家禽胚胎（又称禽胚或胚蛋）的羊膜已被证实是注射的有效部位，卵内注射通常在孵化的种蛋落盘时进行。注射物质所需的体积和剂量或浓度取决于家禽的种类、胚蛋的大小、注射的时机和部位、孵化系统、注射方式以及物质的类型。业已证明，人工注射或机械注射均能产生良好的效果。然而，商业应用要求注射方式实现自动化。本文所述的注射物质包括过去20年或更长时间内用于禽胚的疫苗、药物、激素、竞争性排斥培养物（competitiv exclusion cultures）、益生元和营养补充剂。被批准用于胚蛋接种的疫苗包括马立克氏病疫苗、传染性法氏囊病疫苗、禽痘苗、新城疫疫苗和球虫病疫苗，其中一些材料已被证明可作为提高家禽免疫力以及促进胚胎发育和雏鸡出雏后生长的有效备选材料。多篇论文指出，益生菌可有效预防家禽肠道感染细菌，而叶酸、卵清蛋白和多种氨基酸（包括L-精氨酸、L-赖氨酸、L-组氨酸、β-羟基-β-甲基丁酸和苏氨酸）的单独使用或联合使用已被证明能够有效促进家禽的胚胎发育或出壳后的生产性能。此外，胞嘧啶鸟嘌呤（Cytosine-phosphate-Guanine，CpG）寡聚脱氧核苷酸、维生素C、维生素E以及百里香和香芹也具有增强家禽免疫力的潜力，碳水化合物可用于提高家禽组织的糖原储备量，肌酸可以用于促进家禽肌肉的生长。微量元素和维生素D3可提高家禽的骨强度，而氯化钾可作为疫苗稀释液中的一种有效替代性电解质。这些物质和其他材料在胚蛋上的应用将会得到推广，并会给养禽业带来更多裨益。

关键词：胚蛋注射;疫苗;家禽

中图分类号：S815 文献标志码：C 文章编号：1001-0769（2020）01-0001-02

大约26年前，入孵种蛋注射技术（有时称“卵内注射技术”、“胚蛋注射技术”或“胚蛋供养技术”）就开始用于肉鸡孵化场雏鸡的免疫接种。在此之前，马立克氏病（Marek's Disease，MD）疫苗一般采用人工方法对出雏后的肉雏鸡进行颈后部皮下接种。Embrex公司制造的Inovoject?注射机是首个引入美国的自动化胚蛋注射系统（图1）。目前，超过90%的美国孵化场采用四家不同公司制造的胚蛋注射机。这些机器具有每小时接种25 000～62 000个胚蛋的能力。Williams和Zedek发表了一篇报道，在考虑种鸡日龄和落盘胚龄的情况下，他们比较了两家美国制造商生产的不同胚蛋注射系统对种蛋孵化率和孵化场废弃物分析结果的影响。胚蛋注射的优势包括：能够更快地免疫接种更多的胚蛋，可降低人工成本以及人为失误，能提前诱导雏鸡产生免疫应答。胚蛋注射通常在入孵种蛋从孵化器转移到出雏器的限定时间内快速进行，一般在孵化第17.5天和第19.2天实行，具体时间取决于所使用的孵化系统。

业已证明，采用胚蛋注射法对入孵种蛋后期胚胎接种疫苗是安全的，对孵化率的影响极小。然而，众多因素均可影响胚蛋注射的效率，这些因素包括接种部位、注射时胚胎所处的发育阶段以及孵化设施、胚蛋接种设备和疫苗制剂的无菌控制水平。Wakenell等证明，当MD疫苗被注射到入孵种蛋的气室或尿囊膜时，疫苗不会产生有效的免疫作用;然而，当其被注射到入孵种蛋的胚胎或羊膜中时，疫苗会产生有效的免疫力。胚蛋的羊膜已被证明是疫苗的最佳注射部位，因为它能让胚胎吸入或吸收疫苗，从而使系统转化更完全。当采用Nature Form和Jamesway孵化系统时，入孵种蛋的羊膜可在孵化的第18.5天有效刺入，相当于胚胎发育阶段评分为2或3时，此时处于胚胎啄壳之前，且胚胎的头正处在两腿中间。为了对准胚蛋的羊膜，Keralapurath等和Zhai等建议从肉用鸡种蛋大头顶端注入约2.49 cm。此外，用于胚蛋注射的溶液的体积很重要。McGruder等建议避免使用体积等于或大于2 000 μL的各种电解质溶液。Zhai等主张，为了使种蛋孵化率达到90%，碳水化合物注射液的体积不应超过700 μL。MD商业化疫苗的常用体积是50 μL。

被批准可用于胚蛋接种的疫苗包括马立克氏病疫苗、传染性法氏囊病疫苗、禽痘苗、新城疫疫苗和球蟲病疫苗。虽然胚蛋注射法尚未得到商业化应用，但是在过去的20年中，不同的实验室对其他疫苗、药物、激素、竞争性排斥培养物以及多种营养补充剂在提高雏鸡免疫力和促进其生长方面的应用进行了不断地研究，这些研究的结果已经发表于多种出版物上。为了调查这些疫苗、培养物和营养补充剂的潜在效力和商业化应用前景，相关研究人员引入了人工接种（人工注射）和自动接种（商用单蛋或多蛋注射）。除了已商业化应用的疫苗外，其他试验性测试疫苗包括禽流感疫苗和鸡败血支原体病疫苗。

众多营养素（如卵清蛋白、氨基酸、缩氨酸、碳水化合物、核苷酸、电解质、维生素、L-肉毒素、肌酸和植物提取物）可通过胚蛋注射法注射促进入孵种蛋的胚胎发育，提高种蛋孵化率和雏鸡出壳后的生产性能。Pinchasov和Noy以及Vieira和Moran指出，在生产中，人们常会在原种鸡场和肉鸡场见到雏鸡由于推迟入舍而无法及时采食和饮水，这可能会对雏鸡随后的生产性能产生不利影响。胚蛋供养已经受到养禽业的关注。Uni和Ferket指出，在出壳后的关键时期（此时它们必须适应新的环境和营养源），出壳雏鸡的死亡率可以通过在胚胎发育后期注射胚蛋营养素来降低。然而，这些营养素的使用均待商业化养禽业的认可和推广应用。

本综述的目的是简要回顾家禽胚蛋注射技术的起源和发展，并评估其在疾病预防和营养补充方面的各种应用以及后续文献报道的相关结果。

原题名：In ovo applications in poultry： a review（英文）

原作者：E. D. Peebles（密西西比州立大学）