吉林市江南公园圈养棕熊寄生虫感染情况调查及防治※

●孙青松 马超凡 王 佟 常昭宇 林自涵 李沐森

（吉林农业科技学院动物科技学院 吉林 吉林 132109）

棕熊亦称灰熊，是陆地上食肉目体形最大的哺乳动物之一，头大而圆，体形健硕，肩背隆起。棕熊属环北极分布的喜寒冷动物，主要栖息在寒温带针叶林中，在高山草甸也能生活[1]。我国许多动物园都驯养有棕熊，由于圈养条件改变了棕熊的生活环境，致使棕熊不同程度患有棕熊圆线虫、棕熊蛔虫、棕熊蛲虫和棕熊球虫等常见的寄生虫病，对棕熊的健康造成很大危害。轻者可使棕熊消化不良，消瘦，贫血，重者破坏其肠道，引起出血、水肿，更严重者会造成机体细胞的破坏。如蛔虫可破坏棕熊的肠道上皮细胞，引起出血性肠炎，也可以引起蛔虫性肺炎；蛲虫不断刺激棕熊的肝脏和胆管，会引起棕熊胆管炎、胆囊炎甚至肝硬化。为了更好地保护棕熊，本研究对吉林市江南公园内的棕熊进行了寄生虫感染状况调查，旨在研究棕熊的寄生虫流行情况及制定科学的寄生虫防治措施，使棕熊健康生活，改善公园内棕熊的生活福利。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验器械 玻璃烧杯、玻璃试管、试管夹、试管架、玻璃棒、胶头滴管、火柴、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、离心机、光学显微镜、锦纶筛兜、40 目金属筛、60 目金属筛。

1.1.2 试验试剂 10%的氢氧化钠溶液、饱和蔗糖溶液、50%的甘油水溶液、煤油。

1.1.3 样本采集 根据吉林市江南公园棕熊的生活环境特点，在2019 年7～10 月，每个月采集4 份粪便，每份大约500g，编号后装入自封袋中，共计16份，并收集棕熊当日脱落的体表皮屑和毛发放入冰箱中待检。

1.2 检查方法

1.2.1 消化道寄生虫检查

1.2.1.1 直接涂片检查法。于载玻片上将少量棕熊粪便与1～2 滴盐水混匀，涂布成透过其能看到纸上字迹的薄层。用玻璃片捣碎大的杂质颗粒后盖上盖玻片，分别用10 倍和40 倍物镜检查。

1.2.1.2 饱和蔗糖溶液漂浮法。取棕熊粪便20～30g，置于200～300mL的烧杯中，先加入少量饱和蔗糖溶液（5～10mL），用玻璃棒捣成浆糊状，然后加入200～250mL的饱和蔗糖溶液，搅拌均匀，通过40～60目铜筛过滤，滤液收集于烧杯中，静置15～30min。再用铁丝圈蘸取液体表膜，落在载玻片上，盖上盖玻片，进行镜检。

1.2.1.3 离心沉淀法。取棕熊粪便 20～30g，置于200～300mL的烧杯中，先加少量自来水（5～10mL），用玻璃棒捣成糊状，然后加入清水200～250mL，搅拌均匀，通过40～60 目铜筛过滤，滤液用烧杯收集，然后分装于离心管中，用天平配平后放入离心机中离心，转速为 2 000～3 000r/min，时间为 1～3min，取出后倒出上清，沉淀物加清水搅拌，再离心，反复操作至上清液透明为止，最后倒去上清液，留取两倍沉淀量溶液，吹打混匀后吸取粪液镜检。

1.2.1.4 锦纶筛兜淘洗法。取棕熊粪便20～30g，加水搅拌均匀，先经粪筛滤去粗渣，将滤液倒在网兜里淘洗，沥干，除去色素及其他杂质，取兜内容物镜检。

1.2.2 虫卵计数 利用麦克马斯特氏法进行计数，将 4g棕熊粪便与 56mL漂浮液混合，使体积达60mL，充分搅拌，用纱布或粪筛过滤，用胶头滴管吸取混合液，立即注满麦克马斯特计数板的每个计数室，静置计数板至少5min，完成漂浮过程，开始对两个计数室里的虫卵计数，将两个计数室虫卵数之和乘以200，再除以4，即得每克粪便中的虫卵数（EPG)。

1.2.3 体表寄生虫检查

1.2.3.1 煤油浸泡法。用镊子取少量的棕熊皮屑置于载玻片上，滴几滴煤油于载玻片上，在其上加盖另一片载玻片，用手搓动两片载玻片，互相挤压和摩擦，使皮屑破碎，置于低倍光学显微镜下观察[2]。

1.2.3.2 皮屑溶解法。取少量的棕熊皮屑或毛发加入到玻璃试管中，再向玻璃试管中加入适量10%的氢氧化钠溶液，然后放置于酒精灯火焰上加热溶解，一边加热一边呈“8”字形匀速晃动玻璃试管，等待皮屑溶解，之后弃去上清液，用胶头滴管吸取少量沉淀物滴于载玻片上，盖上盖玻片后放置于光学显微镜下，用低倍镜检查是否有螨虫或者虫卵[3]。

2 试验结果

2.1 寄生虫虫卵及形态特征

在低倍镜下观察到的寄生虫虫卵及形态特征，见图1。

图1 锦纶筛兜淘洗法检出的棕熊粪便中的寄生虫卵

2.2 结果分析

检查结果表明，江南公园内圈养的棕熊均感染了寄生虫病，以线虫为主。粪样中的线虫卵有3 种，球虫卵囊1 种，感染情况见表1；寄生虫总感染率及感染强度见表2。

本试验从江南公园的棕熊体内共检出4 种寄生虫，分别为棕熊圆线虫、棕熊蛲虫、棕熊蛔虫和棕熊球虫。棕熊圆线虫的感染率为50%，感染强度为500 枚/g；棕熊蛲虫感染率为31.25%，感染强度为300 枚/g；棕熊蛔虫的感染率为25%，感染强度为250 枚/g；棕熊球虫的感染率18.75%，感染强度为180 枚/g。无体表寄生虫寄生。

表1 江南公园棕熊寄生虫感染情况调查

表2 棕熊粪检寄生虫总感染情况

3 分析与讨论

通过对棕熊粪便进行直接涂片法、饱和蔗糖溶液漂浮法、离心沉淀法及锦纶筛兜淘洗法检查，以及对棕熊皮屑采用皮屑溶解法、煤油浸泡法等方法检查，结果表明江南公园的棕熊分别感染了棕熊圆线虫、棕熊蛔虫、棕熊蛲虫和棕熊球虫寄生虫病，其中以棕熊圆线虫感染最为严重，棕熊蛲虫和棕熊蛔虫次之。因为棕熊粪便是在地面上采集的，采集时有的可能已被污染，所以寄生虫卵不一定全是棕熊体内排出的。棕熊舍内地面有一定的土壤，为土源性寄生虫的繁殖提供了条件，江南公园每年春、秋两季都会对圈养的棕熊进行1 次驱虫，但依旧有寄生虫感染，建议公园管理人员加强对棕熊的饲养管理，并加大驱虫力度，根据棕熊感染的寄生虫种类联合用药。

3.1 治疗方案

3.1.1 棕熊圆线虫 用丙硫咪唑治疗，用5mg/kgBW的剂量拌料饲喂。

3.1.2 棕熊蛔虫 可用左旋咪唑，每千克体重口服1 片，每晚服 1 次，连续服用 2 次。

3.1.3 棕熊蛲虫 可用肠虫清（阿苯达唑），成年棕熊每天每头用400mg的剂量拌料饲喂，连用6d。

3.1.4 棕熊球虫 可用氨丙啉按 10～15mg/kgBW剂量拌料饲喂，连用4～5d为1 个疗程。

3.2 预防措施

春秋两季定期对棕熊进行驱虫；做好食品卫生检验；提高棕熊的饲养环境卫生；加强饲养管理；公园管理人员应禁止游客擅自投喂棕熊。