中国热科院生物所发表新型分子克隆系统

日前，中国热带农业科学院热带生物技术研究所言普副研究员等人经过多年研究，开发了一种新型的标准化分子克隆技术——Nimble Cloning。该技术能将目标DNA通过一步反应直接克隆到环状目标载体。该技术以《NimbleCloning:ASimple,Versatile,andEfficientSystemforStandardizedMolecularCloning》为题发表在国际期刊FrontiersinBioengineeringandBiotechnology。

Nimble Cloning技术集成了目前几种克隆技术的优点，并较好的解决了它们的不足之处。优点：一是直接将DNA克隆到环状载体，避免了载体的线性化酶切和回收等步骤，简化了实验操作，提高了克隆效率。二是使用灵活，用途广泛。PCR产物和环状质粒上的DNA(入门克隆)均可克隆到目标载体，并且可用于单片段、多片段和多位点等多种形式的克隆。三是可灵活用于标准化克隆和无缝克隆。基因加带通用接头序列后可克隆到系统任何一个载体，形成一个标准化的克隆系统。如有不使用通用接头序列的无缝克隆要求，只需将目标基因与载体的重叠序列设计在通用接头的外围，通用接头可在克隆反应中消除，在不改变载体的情况下实现无缝克隆。