豆瓣绿无病毒苗的培育及无土栽培技术

郑思远 翟玉莹

(沈阳工学院，辽宁 抚顺 113122)

1 豆瓣绿无病毒苗的培育

1.1 外植体的取得

将长度在0.5cm左右的豆瓣绿顶芽置于清水中冲洗干净，在实验室的超净工作台上用1%的升汞(按每100mL加吐温-80,10滴)作表面灭菌6min,对豆瓣绿顶芽作初步杀菌处理，杀菌处理后用无菌水进行冲洗，每次3min冲洗6次，最后将豆瓣绿顶芽放置于无菌纱布或无菌滤纸上进行吸水。在解剖镜下切取茎尖0.1 ～0.62mm后迅速将其置于MS+BA 1 +NAA0.8+蔗糖3% +琼脂1%,pH值5.8的培养基上,在15～ 18℃、光照800lx的条件下培养，放置时注意生长点向上，保障植株的正常生长。经40～60d形成大量的愈伤组织进而形成幼芽，转入MS+BA 1 +NAA0.3+蔗糖3%+琼脂1%,pH值5.8的培养基上继续培养，温度15～ 18℃,光照800 lx,30d后在电镜检视下，检查豆瓣绿顶芽是否含有病毒，如果检测后发现病毒存在则停止培养。

1.2 继代培养

将检测中未发现病毒的顶芽利用MS+BA1+NAA0.4+蔗糖3%+琼脂1%配比的培养液培养脱毒芽在培养液中会不断生长形成更多不定芽。在培养液配比不变并且温度保持在18～25℃,光照800～100 lx的条件下培养物会不断生长出小苗，在4周以后大约扩大5倍以上。

1.3 生根培养

可以将继代培养的大于2cm的苗转接到1/2MS+IBA1+蔗糖2%+琼脂1%的培养液中进行生根培养，温度18～ 25℃、光照1000～ 1500 lx，4～5周后便有大量生根等，这些根基成熟之后便可栽培。

1.4 炼苗

在灭菌并施用1/2MS大量元素营养液的珍珠岩中种植生根苗，保持温度15～20℃，相对湿度85% ,光照强度1000～ 1200 lx,2周后将环境湿度逐渐改变为自然湿度，4周便可栽培。

2 豆瓣绿无病毒苗的无土栽培技术

无土栽培技术(soilless culture)是指用基质替代天然土壤,或者仅培育苗时使用基质,在定植以后通过人工营养液进行灌溉的一种栽培方法。因这种无土栽培技术可人工创造良好的植株根际环境从而取代土壤环境，并有效防止土壤连坐病害或土壤盐分积累造成的生理生长障碍，充分满足作物对物质营养、水分和气体等环境条件的需要，因此可以达到省水、省肥、省工、高产优质的特点，无土栽培使用的基本材料可以循环利用，最大的好处可以帮助企业或者工厂降低成本。

2.1 栽培工具

无土栽培专用盆、瓷盆、南泥盆、泥盆、塑料盆等。

2.2 栽培基质

干净的河沙、珍珠岩、砼石苔藓等。

2.3 培养液

KNO3：400mg/L；NH4NO：350mg/L；KH2PO4：80mg/L；MgSO4·7H2O ：75mg/L；CaCl2·4H2O ：85mg/L；FeSO4·7H2O ：20mg/L。

2.4 管理

从最开始的种植、施肥、除虫除草，到后期的修剪、加工都属于栽培管理，首先要对品种的优良程度、生长环境的适宜度进行选择，还要在此过程中不断除草，而现今许多种植者为了提高工作效率，过多地使用农药，导致生长出来的豆瓣绿植物中的农药量超标，导致植物出现本质上的危害，适当地施肥是可以的，但必须保证植物中的农药以及有害物质不超过国家规定的范围。引进大量先进的机械化技术可以提高工作效率，例如采用新兴的技术，加大对于互联网的应用，从而降低劳动成本，不仅很好地节约了资源，还使得工作效率大大提高。豆瓣绿植物的一道重要工序便是栽培管理方式，也是最为核心的步骤。完善豆瓣绿无病毒苗质量管理体系林业种苗植物的品质，首先要检测农药的残留量是否符合国家的相关标准；其次，对于植物的养护也需要专业的人员来进行，来应对随时出现的植物病虫害以及自然灾害的问题，同时也要保障豆瓣绿植物的生命活力，及时更新旧植物保证植物的可持续性循环。最后，观赏植物管理认证体系是种植者最基本的保障，同时也是实现观赏性植物可持续的基本保障。

3 结语

在对豆瓣绿的外植体选取时,可以选取豆瓣绿的顶芽、基本芽和带叶柄的叶片作为外植体培养，成功率较高。一般工厂化快速繁殖中推荐使用叶片进行外植体替代顶芽进行种苗。培养基的使用注意事项，关注细胞分裂素时主要关键性物质，无论选取哪部分作为外植体在继代培养过程中，较高浓度的6-BA都将导致玻璃化苗出现，因此，一定要注意快速繁殖诱导化分化和增殖的最佳适合培养基质均为：MS+6-ba 0.5mg/l+NAA 0.1 mg/l,确保较高的平均增殖率。合适的试管苗形态既能够提高炼苗成活率，还能快速提高种苗能力，根系数量伸长增多可以提高炼苗成活率,有利于穴盘苗成苗的出售，最大限度缩短育苗时间。

豆瓣绿作为一种观赏性植物，同时具备一定的药用价值，对于豆瓣绿植株的培育具有实践性意义，长期的分株或扦插的无性繁殖方式会导致豆瓣绿植物容易发生病毒病，培育无毒苗同时结合无土栽培方式，不仅提高了豆瓣绿植株的产量，提高了豆瓣绿植物的经济价值，同时增强了豆瓣绿植物的抗病毒以及抗病虫害的能力，无土栽培技术不受空间等因素的限制，使得豆瓣绿植物的培育更具有灵活性，值得实际推广。