溶血对11 项生化检验结果的干扰与对策探究

关志华 莆田华侨医院（福建，莆田，351117）

生化检验是临床应用较为广泛的一种检测技术，在疾病检出、疾病诊断、病情观察、疗效评估等方面占据重要影响［1］。 生化检验涉及到的内容相对较多，较为主要的有肝功能指标检验（如ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、TP 等）、 血脂指标检验 （如TC、TG、HDL-C、LDL-C、LPA 等）、 肾功能指标检验（如UA、Cr、GLU 等）、 心肌损伤指标检验 （如CK、LDH、A-HBDH 等）、电解质指标检验（如K、Na、Cl、CO2等）以及尿淀粉酶、叶酸等其他指标检验。 生化检验过程中，标本易受多种因素影响发生溶血（红细胞破裂导致细胞内物质释放）［2］。溶血的发生将在一定程度上对生化检验结果产生干扰，降低生化检验准确性，不利于检验结果在临床诊疗中作用的发挥。 为进一步掌握溶血对生化检验结果存在的影响，本研究以120 份血液标本为例，对溶血前后K、Na、TBIL、DBIL、TP、ALB、HDL-C、TG、CK、AST、LDH检测结果变化进行了分析，并针对存在的干扰提出解决办法，意在提升生化检验准确性、有效性。

1 对象及方法

1.1 对象

本研究所选对象为2019 年7 月-2020 年7 月期间在医院行健康体格检查的健康人空腹静脉血样本。 共120 例，包括男性60 例，女性60 例，年龄最大60 岁，最小20 岁，平均年龄在（43.26±3.78）岁。 对病例进行空腹状态下静脉采血，观察溶血对11 项生化检验结果的影响。 纳入标准：研究过程经过病患家属同意， 符合医院伦理委员会相关规定。排除标准：未空腹；患有慢性疾病者；患有严重血液类疾病患者；心脑血管疾病及免疫类疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂

本研究中涉及到的主要仪器与试剂有：迈瑞医疗国际股份有限公司生产的BS-800 全自动生化分析仪（随机配备电解质模块）；长沙鑫奥仪器仪表有限公司提供的血清学离心机；迈瑞医疗国际股份有限公司提供的生化检测试剂盒等。

1.2.2 研究方法

首先，所有受试者于清晨空腹状态采集8mL 静脉血，将每位受试者血液标本分别注入1 号试管与2 号试管中［3］。 1 号试管血液标本设为未溶血组，2号试管血液标本设为溶血组。 1 号根据生化检验标本处理要求进行规范化操作，即利用离心机分离血清， 分离速度设置为3 500r/min， 分离时间设置为10min， 得到血清样本后， 按照常规操作在BS-800全自动生化分析仪上完成钾（K）、钠（Na）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）、 肌酸激酶 （CK）、 天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）11 项生化指标测定。 2 号做溶血处理（竹签搅碎）后，分离血清并利用BS-800全自动生化分析仪完成与1 号试管样本相同项目测定。根据血红蛋白浓度分成轻度溶血组（40 例，血红蛋白浓度≤4g/L）、中度溶血组（40 例，血红蛋白浓度4～10g/L）、重度溶血组（40 例，血红蛋白浓度＞10g/L）。 最后进行检测结果统计与比较［4］。

11 项生化检验过程中， 用电极法完成血清K、Na 检测；用酶动力学法完成AST、CK、LDH 测定；用钒酸盐法完成TBIL、DBIL 检测；酶法、直接法完成TG、HDL-C 检测；用双缩脲法完成TP 检测；用溴甲酚绿法完成ALB 检测。

1.3 判定标准

正干扰， 此时血液中红细胞内外浓度的比率AST 为40∶1，GLU 为0.82∶1， 血清中LDH 浓度显著增加；负干扰∶GLU 比例为1∶0.82，血清浓度值降低、稀释效应明显。标本溶血主要发生在采血环节，可对常规生化检验造成影响，需要排除正向干扰因素［5］。

1.4 统计学处理

采用SPSS20.0 版本软件、WPS 表格等统计学工具处理数据，生化指标服从正态分布，用均数±标准差（±s）表示，组间比较行t 检验，其他计数资料总数（n）或百分率（%）表示，用P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

由表1 数据分析可知，溶血后生化检验结果在一定程度上发生改变，轻度溶血组中共有6 项生化指标（K、LDH、AST、TP、DBIL、CK）检测结果与未溶血组生化指标检测结果存在明显差异（P＜0.05），K、LDH、AST、TP、CK 升高，DBIL 下降； 中度溶血组中共有7 项生化指标（K、LDH、AST、TP、TBIL、DBIL、CK）检测结果与未溶血组生化指标检测结果存在明显差异 （P＜0.05），K、LDH、AST、TP、CK 升高，TBIL、DBIL 下降； 重度溶血组中共有9 项生化指标（K、Na、LDH、AST、TP、TBIL、DBIL、TG、CK）检测结果与未溶血组生化指标检测结果存在明显差异 （P＜0.05）；ALB、HDL-C 等指标不受溶血影响［6］，即溶血组与未溶血组比较无明显变化（P＞0.05），见表1。

3 讨论

3.1 溶血对生化检验结果的干扰

溶血是指红细胞受各种因素（如过冷、过酸、过碱、强力震荡等）使红细胞破裂导致细胞内物质释放［3］。随着细胞内物质释放，血液标本成分不可避免发生改变，从而对血液生化检测结果产生影响。 血液生化检查中，涉及到的项目相对较多。 本研究从众多生化指标中选取临床应用较为广泛的11 项指标（K、Na、LDH、AST、TP、TBIL、DBIL、ALB、CK、TG、HDL-C）进行研究，发现溶血对肝功能指标、肾功能指标、电解质指标、心肌损伤指标等均存在不同程度影响， 影响最为明显的当属血钾与心肌酶类指标，影响最不明显的当属血清白蛋白、血清高密度脂蛋白胆固醇［7］。究其原因：①红细胞中含有大量的钾离子、AST、LDH 等物质，溶血后这些物质被释放，从而使检验结果远远高于正常标准［8］。与此同时，随着溶血程度的提高，红细胞破裂数量越多，所释放的物质越多，对生化检测结果的干扰越大。 故本研究中重度溶血组受影响指标项目要多于轻度溶血组，干扰程度也大于轻度溶血组。 ②在生化检测过程中，血红蛋白能够参与试剂反应。 故生化指标测定方法不同，溶血所产生的影响也不同。 文献资料表示，TBIL 测定时， 溶血对重氮法测定结果的干扰要大于对钒酸盐法测定结果的干扰， 轻度溶血对TBIL 无影响，对DBIL 存在轻微影响［9］。③血清中原有物质会在一定程度上与红细胞破裂后释放的物质发生反应，在一定程度上干扰生化检测结果。 ④溶血后，虽然一些成分未发生改变，但从整体层面来看，其在血清中的占比减少，故检测值要低于正常值［10］。 例如，既有研究通过分析48 项溶血样本生化检验结果， 确定Cl、GGT 等指标在重度溶血情况下，受血浆稀释影响，检测值低于未溶血样本（本研究未涉及）。 ⑤血红蛋白吸光度增加是导致溶血后TP、TG 等升高的关键因素。

表1 溶血前后11 项生化检测结果比较[（±s）]

注：与未溶血组比较，*P＜0.05

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3.2 预防与控制干扰的主要办法

生化检验过程中导致血液标本发生溶血的因素众多，如试剂的不合理使用、仪器的不规范操作、标本污染、标本采集后的错误存储、离心处理不当、运输环境不合理等。 这就需要医院以及相关工作人员能够高度重视溶血对生化检验结果的影响。 善于通过工作经验归纳与总结掌握血液标本溶血成因，并在此基础上针对性制定溶血问题解决方案，降低标本溶血发生率，提高生化检验准确性［11］。

①在制度上：根据生化检验要求，围绕样本采集、存储、运输、生化指标测定制定完善操作规范，使工作人员能够严格遵循规范与要求处理标本，进行生化指标测定。 ②在机制上：完善教育培训机制，通过“如何科学采血”专家讲座、“血液标本的正确处理” 技术交流、“溶血现象对生化检验结果的影响”课题研究等活动，帮助工作人员树立规范意识、责任意识、安全意识，提高工作人员专业技能，丰富工作人员生化检验经验，以保证生化指标测定方法选择的科学与合理［12］。 ③在方法上：严格遵循样本采集规范进行操作， 减少操作过程中试剂污染、样本污染、样本震荡等对检测质量的影响。 同时，工作人员可通过血红蛋白浓度监测进行溶血干扰控制。即轻度溶血时，通过适当调节血红蛋白浓度，降低溶血对生化检验结果的影响；重度溶血时，通过重新采集标本，降低溶血影响。

总之， 溶血对生化检验结果存在较大影响，高度重视溶血问题，并应用合理方法降低血液标本溶血现象发生，利于生化检验结果准确性的提升。