抗血液型脓病家蚕品种华康2号在云南省的试验与示范

刘 敏 李 涛 吴克军 刘增虎 罗顺高 廖鹏飞 董占鹏

(云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所，云南蒙自 661101)

家蚕是一种经过人工驯化并具有重要经济价值的昆虫，也是鳞翅目昆虫的模式生物，但其在饲养过程中经常面临病毒、细菌和真菌等多种病原的威胁。家蚕核型多角体病毒病，俗称血液型脓病，由家蚕感染核型多角体病毒(Bombyxmorinucleopolyhedro virus，BmNPV)引发，一直是蚕业生产上危害最严重的病害之一，引起的蚕茧损失占蚕病损失总量的60%以上，而且其传染性极强，一旦发病常给蚕桑生产造成巨大的经济损失[1]。培育抗BmNPV蚕品种是应对该病威胁最经济有效而又绿色环保的防病措施。

华康2号是中国农业科学院蚕业研究所以秋丰、白玉为基础蚕品种，通过导入对BmNPV具有高度耐受性的基因而育成的夏秋用家蚕新品种[2-3]，该品种对BmNPV多角体的半致死浓度(LC50)值超过109个/mL，比常规蚕品种对BmNPV多角体的LC50值高3～4个数量级，现已通过贵州省、广西壮族自治区、河南省农作物品种审定。华康2号已在浙江省海宁市[4]、陕西省勉县[5]、贵州省黄平县[6]、贵州省毕节市[7]、重庆市涪陵区[8]、贵州省清镇市[9]、四川省宜宾县[10]等地的蚕区完成了试养试验，表现出很强的抗血液型脓病能力和地方适应性。血液型脓病在云南省大部分蚕区均不同程度地暴发过，据调查，平均发病率在5.0%左右[11]，严重的蚕区发病率超过12.8%[12]，是导致云南省盒种产茧量偏低的主要原因。为解决这一问题，2014年云南省部分蚕区开始引进华康2号进行试养。本研究于2015年，对引进的华康2号在实验室内进行了抗性测定，并在陆良县、鹤庆县、祥云县、沾益县、保山市及元阳县等蚕区的农村基点进行了比较试验，旨在进一步分析评价该品种的抗病力和经济性状表现。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试蚕品种 试验蚕品种华康2号(正反交)，由中国农业科学院蚕业研究所提供；对照蚕品种菁松×皓月(正反交)，由云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所提供。

1.1.2 病毒来源 BmNPV为云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所收集于云南省蒙自市草坝镇蚕区，病毒原液的病毒多角体浓度为1.21×109个/mL。

1.2 试验方法

1.2.1 华康2号对BmNPV的抗性检测 2015年秋季在云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所品种选育实验室，以华康2号为试验蚕品种，菁松×皓月为对照蚕品种，进行蚕品种对BmNPV的抗性检测试验，每个蚕品种的正反交分别调查。试验设定5级浓度梯度及1个空白对照，各级浓度梯度以6倍依次向下逐级稀释，华康2号最高病毒多角体添毒浓度为1.21×109个/mL，菁松×皓月最高病毒多角体添毒浓度低于华康2号1个数量级，为1.21×108个/mL；每个病毒多角体添毒浓度各设3个重复试验小区，每区饲养50头家蚕。2龄起蚕添毒，每区添食0.2 mL病毒液，将0.2 mL病毒液均匀涂抹在直径为1 cm的5片桑叶上进行添食，以0.2 mL灭菌水均匀涂抹在直径为1 cm的5片桑叶上进行添食作为空白对照，待家蚕把带毒桑叶食尽后再饲喂新鲜的普通无毒桑叶，3龄第3天调查血液型脓病发病率，采用SPSS20.0软件计算LC50[13]。

1.2.2 华康2号农村基点饲养比较试验 2015年春季分别在云南省陆良县、鹤庆县、祥云县、沾益县、保山市及元阳县等地以菁松×皓月为对照蚕品种，开展华康2号的饲养比较试验。在相同环境条件下饲养试验蚕品种华康2号和对照蚕品种菁松×皓月，每个品种正反交分开饲养，4龄时每个品种正反交各设置4个重复试验小区，每区饲养400头家蚕。饲养过程中调查4龄、5龄期病死蚕头数。分区上蔟，采茧后调查每区蔟中病死蚕、不结茧蚕、薄皮茧、上茧、下茧、双宫茧数以及产茧量和盒种产茧量，削茧调查全茧量、茧层量并计算茧层率。调查结束后每个品种正反交混合抽样1.6 kg，送蒙自市鸿雁茧丝绸有限公司进行丝质检测。

2 结果与分析

2.1 “华康2号”对BmNPV的抗性检测情况

从图1可以看出，BmNPV多角体添毒浓度为1.21×109个/mL时，试验蚕品种华康2号正交、反交的发病率分别为41.33%、37.33%，都低于50%；对照蚕品种菁松×皓月和皓月×菁松在BmNPV多角体添毒浓度为3.35×106个/mL时，发病率就分别达到了72.00%和74.00%，远高于50%。对调查的数据进行LC50分析，从表1可以看出，华康2号正交、反交对BmNPV多角体的LC50值都达到了109数量级，菁松×皓月和皓月×菁松对BmNPV多角体的LC50值只有105数量级，华康2号(正反交)对BmNPV多角体的LC50值比菁松×皓月(正反交)对BmNPV多角体的LC50值高出4个数量级，表明华康2号对BmNPV多角体的抗性远强于菁松×皓月。

图1 华康2号不同BmNPV多角体添食浓度的发病率

表1 华康2号对BmNPV多角体的半致死浓度(LC50)

2.2 华康2号农村基点试验的饲养成绩

试验蚕品种华康2号在陆良县、鹤庆县、祥云县、沾益县、保山市及元阳县6个农村基点饲养。从表2可以看出，与对照蚕品种菁松×皓月相比，试验蚕品种华康2号在陆良县、鹤庆县、祥云县、沾益县4个基点饲养时5龄经过及全龄经过都比菁松×皓月短；全茧量在陆良县、鹤庆县、祥云县3个基点都比菁松×皓月高，在沾益县比菁松×皓月稍低，最高为2.190 g(鹤庆县)，最低为1.561 g(沾益县)；茧层量和茧层率除了陆良县的稍高于菁松×皓月外，其余地方均略低于菁松×皓月；虫蛹率普遍比菁松×皓月高(沾益县华康2号因为发生少量细菌病，导致其虫蛹率只有95.98%，比菁松×皓月的99.17%低)；万蚕收茧量在陆良县、鹤庆县、祥云县都比菁松×皓月高，在鹤庆县最高，为22.12 kg，在沾益县比菁松×皓月稍低。从农村基点的饲养成绩可以看出，华康2号在各试验基点的产茧量和强健性都表现出了一定的优势，但由于试验农户都没遇到血液型脓病暴发的情况，所以华康2号抗BmNPV的特性和优势在这4个试验基点表现得不明显。

表2 华康2号在陆良县、鹤庆县、祥云县、沾益县农村基点试验的饲养成绩

祥云县由于实验户及调查人员疏忽实验区片遗失，未调查死笼率及虫蛹率。

在保山市和元阳县开展品种农村基点饲养试验时不同程度地遇到了血液型脓病，从表3可以看出，在保山市试验蚕品种华康2号的盒种产茧量达到55.0 kg， 而对照蚕品种菁松×皓月只有38.6 kg，华康2号比菁松×皓月的盒种产茧量增加了42.5%；在元阳县华康2号的盒种产茧量为31.5 kg，而菁松×皓月只有22.3 kg，华康2号的盒种产茧量比菁松×皓月增加了41.3%，所以在血液型脓病暴发的地区饲养华康2号其抗病增产优势更为明显。

表3 华康2号在保山市及元阳县农村基点试验的饲养成绩

蚕茧价格为39元/kg。元阳县只调查了2个品种的产量及产值，未调查全龄经过和公斤茧颗数等数据。

2.3 华康2号农村基点试验蚕茧的缫丝成绩

试验蚕品种华康2号在云南省陆良县、鹤庆县、祥云县、沾益县、保山市及元阳县等农村基点开展了试验示范并收集样茧进行丝质检测(其中沾益县的样茧遗失，元阳县未收集样茧，故沾益县和元阳县未进行丝质检测)。从表4可以看出，华康2号的上车茧率在几个农村基点都比对照蚕品种菁松×皓月高，在保山市的上车茧率为97.02%，比菁松×皓月的93.81%高3.21个百分点；从陆良县的蚕茧丝质成绩可以看出，华康2号的茧层率、粒茧质量、茧丝长、解舒丝长、解舒率都比菁松×皓月高，只是茧丝纤度比菁松×皓月稍粗，表现出一定的优势；从鹤庆县、祥云县和保山市的蚕茧丝质成绩可以看出，华康2号的茧层率、粒茧质量、茧丝长、解舒丝长、解舒率与菁松×皓月相差不大，茧丝质相当。

表4 华康2号在陆良县、鹤庆县、祥云县、保山市农村基点试验蚕茧的丝质鉴定成绩

由于祥云县及保山市样茧为当地缫丝厂检查，有些数据未进行调查。

3 小结与讨论

实验室内的抗性测定结果表明，试验蚕品种华康2号(正反交)对BmNPV多角体的LC50值均达到109数量级，较对照蚕品种菁松×皓月高出4个数量级，这与徐安英等[1]的试验结果一致，说明华康2号具有较强的抗血液型脓病能力。在保山市等地试养，刚好遇到血液型脓病暴发，华康2号较少发生血液型脓病，产量稳定，盒种产茧量最高，比菁松×皓月高出40%以上，抗血液型脓病优势非常明显。在没有血液型脓病发生的地区试养，与菁松×皓月相比，华康2号蚕茧偏小，产量略低，未能表现出其抗血液型脓病的优势。但是为了整个蚕区的稳产，保山市蚕区自2016年开始已经全面推广华康2号；陆良县也于2017年引进了华康2号原种，加大了该品种在陆良县的推广力度，2017年生产的几万盒华康2号蚕种在当地出现了供不应求的局面，可见在血液型脓病多发、华康2号表现明显抗病增产优势的地区，华康2号受到了广大蚕农的普遍欢迎。本研究结果表明，华康2号抗血液型脓病能力强，经济性状总体表现较好，在血液型脓病发生较多的季节和蚕区推广应用，其品种的抗病增产优势更为明显，建议扩大其在云南省的推广应用。