基于固体分散体技术哈蟆油滴丸成型工艺的研究

张 静，孙敬蒙，张炜煜

（1.长春中医药大学，长春130117；2.吉林大学白求恩第一医院药学部，长春130021）

“哈蟆油滴丸”的主要原料为哈蟆油。哈蟆油为中国林蛙（Rana temporaria chensinensis David）雌蛙的干燥输卵管，味甘、咸，性平，具有补肾益精、养阴润肺的作用，收载于2015年版《中国药典》一部。哈蟆油主产于吉林省长白山地区，具有很高的药用和食用价值，是一种营养价值极高的滋补品，也是我国驰名中外的名贵食疗性中药；又称为林蛙油、田鸡油、哈什蟆油、蛤蟆油、蛤蚂油、雪蛤油或雪蛤膏。近年来，哈蟆油在国内外消费量迅猛增加，逐渐受到了更为广泛的关注。哈蟆油具有提高机体免疫功能与应激性能作用、抗氧化与抗衰老作用、调节血脂作用、对生长发育和性功能的影响、耐缺氧抗焦虑作用、抗疲劳作用及镇咳祛痰作用等[1～3]。哈蟆油传统的使用方法是取干哈蟆油，冷水洗干净后浸泡20小时，把膨胀的哈蟆油隔水用文火炖，30分钟后服用，此方法费时，而且具有腥味，难以吞咽。将其采用固体分散体技术，制备成滴丸制剂，具有口感好，服用方便，生产工艺简单，质量稳定，便于携带，贮存等优点。本文旨在对“哈蟆油滴丸”的成型工艺进行研究，并获得相关工艺参数[4～5]。

1 实验材料

电子分析天平（上海精科天美，型号：FA1204B）；万能粉碎机（上海宇砚机械设备，型号：30B型）；多功能滴丸实验机（烟台百药泰中药科技有限公司，型号：DWJ-2000S-DP）；甲基硅油（100mm2/s）（江西阿尔法高科药业有限公司）；轻质液状石蜡（西安泰华医药科技有限公司）；聚乙二醇 （湖南尔康制药股份有限公司）、聚维酮（西安天正药用辅料有限公司）、硬脂酸钠（湖南九典制药股份有限公司）、明胶（陕西圣瑞医药科技有限公司）；哈蟆油（安徽易元堂中药饮片科技有限公司）。

2 实验方法与结果

2.1 粉碎工艺研究

经过净制的哈蟆油呈颗粒状，为了便于制剂，需将哈蟆油粉碎。由于哈蟆油原料较昂贵，所以从经济及成本方面考虑，将哈蟆油粉碎为细粉，既能保证出粉率，节约成本，又能避免因粉碎不完全，粉末中掺有哈蟆油纤维状组织而导致的丸剂成型性不好的问题。

干燥后哈蟆油粉碎成细粉，计算出粉率；重复三次操作，结果见表1。

表1 哈蟆油粉碎的出粉率

结果表明，三批平均出粉率为98.2%，RSD为0.10%，粉碎工艺合理。产品生产处方以极细粉足量投料。

2.2 辐照方法及剂量的确定

为了保证哈蟆油微生物限度指标合格，并且保证哈蟆油的成分不被破坏，我们首先采用低温间歇灭菌法灭菌，但不能保证哈蟆油细粉微生物限度合格，故采用60Co灭菌。研究方法如下。

2.2.1 低温间歇灭菌法

2.2.1.1 实验分组

3天组：分别取3组哈蟆油细粉，每组1g，组号3-1、3-2、3-3， 每组每天分别灭菌 1小时、1.5小时、2小时，连续低温间歇灭菌3天。

4天组：分别取3组哈蟆油细粉，每组1g，组号4-1、4-2、4-3， 每组每天分别灭菌 1小时、1.5小时、2小时，连续低温间歇灭菌4天。

5天组：分别取3组哈蟆油细粉，每组1g，组号5-1、5-2、5-3， 每组每天分别灭菌 1小时、1.5小时、2小时，连续低温间歇灭菌5天。

表2 哈蟆油灭菌时间表

2.2.1.2 实验方法

按照表2分组，分别取哈蟆油细粉1g，置已灭菌的称量瓶中，密封，采用热风循环烘箱进行灭菌，温度控制为60℃，按编号分别灭菌连续3天、4天、5天，每天分别灭菌1小时、1.5小时、2小时，杀灭微生物繁殖体，在室温条件下放置24小时，测定微生物限度，结果见表3。

2.2.1.3 实验结果

表3 微生物测定结果

结果表明，低温间歇灭菌法对于杀灭大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等有效，而对于霉菌没有作用，故低温间歇灭菌法不能保证哈蟆油细粉微生物限度合格。

2.2.2 辐射灭菌法的60Co灭菌法

依据江月仙[6]等在《60Co-γ射线辐照对哈蟆油营养成分的影响研究》中结论，在5～15kGy剂量范围内，5kGy辐照前后维生素D、E含量变化均无显著性差异（P>0.05），而10～15kGy辐照以及加速实验均使哈蟆油中维生素A、E含量显著降低（P<0.01），维生素D受照射影响较小；脂肪酸在5～15 kGy辐照后变化不明显，但加速实验发现15 kGy使脂肪酸含量显著提高；经SDS-PAGE分析其分子量为20 KD的蛋白区带随辐照剂量增加而变深。证明60Co照射动物性高蛋白、低脂肪、低维生素固体样品，在高辐照剂量下加速实验均有不同程度影响，但5 kGy剂量辐照还是安全的。最终确定60Co照射灭菌法，剂量5 kGy。

2.3 赋形剂的选择

为了保证丸剂的溶散时限合格，采用水溶性赋形剂。常见的有聚乙二醇（PEG）类、聚维酮（PVP）、硬脂酸钠、泊洛沙姆、明胶等。聚乙二醇主要以聚乙二醇4000、聚乙二醇6000较为常用，先后采用聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、聚维酮（PVP）、硬脂酸钠、明胶为赋形剂，根据圆整度、外观对丸剂进行评价，结果见表4。

表4 基质的选择

结果表明，当以聚乙二醇4000为赋形剂时，丸剂成型性较好，所以确定采用聚乙二醇4000作为“哈蟆油滴丸”的赋形剂。

2.4 药物与赋形剂比例的确定

以药物在赋形剂中分散状态、成丸状态为考察指标，对药物与赋形剂的比例进行考察，结果见表5。

表5 药物与赋形剂比例的确定

结果表明，当药物与赋形剂的比为1∶3时，药物在赋形剂中的分散状态较好，制备的丸剂状态较好，所以最终确定药物与聚乙二醇4000的比为1∶3。

2.5 冷凝液的选择

常用的冷凝剂包括甲基硅油、液状石蜡。以圆整度、成丸状态为考察指标，对不同的冷凝剂进行考察，结果见表6。

表6 冷凝液的选择

结果表明，采用液状石蜡作为冷却剂，由于沉降速度过快，容易拖尾，且丸剂表面未完全冷凝，成型效果不好。当冷凝剂为甲基硅油及甲基硅油（100mm2/s）∶轻质液状石蜡（1∶1）时，滴丸状态较好，综合考虑滴丸状态及生产成本，最后确定甲基硅油（100mm2/s）：轻质液状石蜡（1∶1）为冷凝液。

2.5 混合温度的确定

聚乙二醇的结晶点为50℃～55℃，为了避免聚乙二醇结晶，以圆整度、成丸为考察指标，对不同混合温度进行考察，结果见表7。

表7 混合温度的确定

结果表明，当熔融温度为70℃时，丸剂的成型性较好，同时为了保证哈蟆油中蛋白质的成分不被破坏，所以确定药物与赋形剂熔融温度为70℃。

3 小结与讨论

通过对哈蟆油滴丸粉碎工艺、赋形剂的选择、药物与赋形剂比例的研究，冷凝液的研究及混合温度等方面的研究，确定了哈蟆油滴丸的最终成型工艺为：哈蟆油粉碎为细粉、聚乙二醇4000作为“哈蟆油滴丸”的赋形剂、药物与聚乙二醇 4000的比为1∶3、甲基硅油（100mm2/s）∶轻质液状石蜡（1∶1）为冷凝液、药物与赋形剂熔融温度为70℃，哈蟆油细粉的灭菌方法为60Co照射灭菌法，剂量5 kGy。经过反复验证及中试生产实验，证明该工艺稳定可行。

本产品旨在提高人们的健康水平，从中药资源中开发出具有增强免疫力功能的保健食品。根据中医理论选用哈蟆油为原料，用现代的固体分散体制备技术，经过原料的检验、粉碎、过筛、灭菌、混合、滴制、冷却、除油、分剂量、内包装、外包装、成品检验、入库等工艺制成。产品的功效成份稳定可控，产品的安全性、稳定性及卫生学方面均符合国家关于保健食品评价和规范要求。