凝结芽孢杆菌与饲用抗生素组合使用对21～42 日龄AA 肉鸡生产性能的影响

王乙茹，柳成东，白华毅，钱锦花，赵 平，朱耀顺，杨向东，程志斌*

（1.云南农业大学动物科学技术学院，云南昆明 650201；2.玉溪农业职业技术学院,云南玉溪 653100；3.昆明云岭广大种禽饲料有限公司，云南昆明 650200）

凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）集合了芽孢杆菌属（耐热、适合制粒）[1]与乳酸菌类（产酸、抑菌）[2]益生菌的共同优势，成为当前畜禽饲料与养殖领域“替抗”的新型饲用益生菌[3]。试验报道，与无抗日粮对照组相比，饲用凝结芽孢杆菌能够显著改善肉鸡的增重[4]、饲料转化效率、免疫功能等[5-6]，却鲜有饲用凝结芽孢杆菌与抗生素组合使用的研究[7]。虽然我国政府决定2020 年7 月全面实施饲料“禁抗”，但全球范围内饲用抗生素乃至抗生素保健药物仍在使用，因此研究“有抗”日粮基础上凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的效果仍有价值。

与其他饲用抗生素相比，阿维拉霉素安全性较好，在肉鸡养殖中无休药期（农业农村部第168 号公告《饲料药物添加剂使用规范》），目前广泛应用于全世界（无禁抗令）多数国家的肉鸡饲料中[8]。课题组前期采用牛津杯药敏实验法证明，5～10 mg/kg 阿维拉霉素溶液对凝结芽孢杆菌活菌的生长无明显抑制作用（抑菌圈直径0 mm，数据未公开发表）。本试验旨在研究凝结芽孢杆菌与阿维拉霉素组合使用对21～42 日龄AA 肉鸡生产性能的影响。

1 材料与方法

1.1 试验设计及饲养管理 试验在云南农业大学附属鸡场开展，将200 只21 日龄健康、平均体重为（801.85±24.66）g的AA 肉公鸡分成2 组，每个处理组10 个重复，每个重复10 只鸡/笼。对照组饲粮中添加10 mg/kg 阿维拉霉素，试验组饲粮中添加10 mg/kg 阿维拉霉素和3×106CFU/g（全价配合饲料）凝结芽孢杆菌制剂。凝结芽孢杆菌添加量参考Wu 等[5]和Zhen 等[6]的文献以及本课题组前期报道[7]。试验周期为肉鸡育成期21～42 日龄，试验期间日粮参照NRC（1994）肉鸡饲养标准，饲料原料组成及配制营养成分见表1。

专人负责饲养试验，全程控温、控湿、24 h 光照，试验鸡自由采食和饮水。及时清扫鸡舍，保证良好鸡舍卫生环境，实施正常免疫程序。

1.2 测定指标及方法

1.2.1 生长性能 测定试验鸡的初体重、末体重、采食量，并计算平均日增重、平均日采食量、耗料增重比（饲料转化效率）等指标[9]。试验鸡腹泻会造成粪便敷住肛门现象，因此以笼为单位统计处理组“敷肛”的腹泻率[7,9]。同时，观察肉鸡死亡情况，统计死亡率。

1.2.2 血清生化指标 至肉鸡42 日龄，每笼随机挑选2 只，翅静脉采血4～6 mL。血样3 000 r/min 离心15 min 制备血清，在-20℃冰箱保存待检[9]。血清生化指标在云南农业大学动物医学院采用全自动生化仪器测定。

1.2.3 免疫器官指数 血样采集后，将挑选的肉鸡屠宰，取脾脏、胸腺、法氏囊称重，免疫器官指数为该器官重量除以活体重的百分数[9]。

1.3 统计分析 试验数据用平均值±标准差表示，用SPSS 17.0 进行T-test 检验，P＜0.05 表示差异显著，0.05＜P＜0.1表示有差异的趋势[6]。

表1 基础日粮组成及营养成分（风干基础）

2 结果

2.1 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响 如表2所示，试验组肉鸡腹泻率显著低于对照组。其他生长性能指标两组之间差异不显著。试验组耗料增重比较对照组相比有下降趋势（0.05＜P＜0.1）。

表2 凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

2.2 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响 由表3 可见，试验组肉鸡血清球蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇的含量均高于对照组（P＜0.05）。与对照组相比，试验组肉鸡血清总蛋白含量及谷丙转氨酶活性有提高的趋势（0.05＜P＜0.10）。其他血清生化指标无显著差异。

表3 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡血清生化指标的影响

2.3 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡免疫器官指数的影响 试验组与对照组肉鸡的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数等指标无显著差异（表4）。

表4 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡免疫器官指数的影响 %

3 讨 论

3.1 凝结芽孢杆菌与阿维拉霉素组合对肉鸡生长性能的影响 本研究结果显示，凝结芽孢杆菌与阿维拉霉素组合使用的试验组肉鸡平均日增重与对照组无显著差异，但耗料增重比降低了4.5%。这表明在含抗生素饲粮基础上补充3×106CFU/g 凝结芽孢杆菌，虽未能进一步提高21～42 日龄育成期AA 肉鸡的生长速度，但对饲料转化效率有一定程度改善。Li 等[10]试验证明，与饲喂无抗日粮的对照组相比，饲粮添加2×106CFU/g 凝结芽孢杆菌对21～42 日龄AA 肉鸡平均日增重也无显著影响，但对耗料增重比也有改善趋势。Wu 等[5]和Zhen等[6]进一步研究显示，与饲喂无抗日粮的对照组相比，添加4×106CFU/g 凝结芽孢杆菌未能对21～42 日龄AA 肉鸡增重、饲料转化效率产生显著影响。Hung 等[11]研究表明，与饲喂无抗日粮的对照组相比，添加3×107CFU/g 凝结芽孢杆菌对21～42 日龄AA 肉鸡平均日增重依然无显著影响，但显著降低了耗料增重比。综上分析，饲用凝结芽孢杆菌改善育成期肉鸡生长性能的效果可能存在剂量依赖性[5-6,10-11]。本研究结果显示，凝结芽孢杆菌与阿维拉霉素组合能够在单一使用抗生素的基础上，进一步降低肉鸡腹泻的发生。众所周知，饲用抗生素虽能有效抑制肠道有害细菌滋生，但对肠道有益菌的负面影响及肠菌群稳态的破坏也十分明显[12]。Zhen 等[6]最新试验报道，饲粮添加4×106CFU/g 凝结芽孢杆菌显著降低了42 日龄AA 肉鸡盲肠中的大肠杆菌、沙门氏菌。

3.2 凝结芽孢杆菌与阿维拉霉素组合对肉鸡血清生化指标的影响 肉鸡血清总蛋白含量可反映饲料蛋白质营养摄入情况，总蛋白含量越高，表明日粮蛋白质摄入越多，则有利于改善肉鸡生长性能[12]。血清总蛋白主要由血清球蛋白和血清白蛋白构成，其中血清球蛋白是肉鸡机体免疫功能重要指标之一，血清球蛋白含量高反映机体免疫功能好[14]。本研究结果显示，与对照组相比，试验组肉鸡的血清球蛋白显著增高，且总蛋白含量有提高的趋势，这与肉鸡耗料增重比、腹泻率改善的结果相符。林丽花等[13]试验表明，与饲喂无抗日粮的对照组相比，添加凝结芽孢杆菌的试验组育成黄羽肉鸡血清总蛋白含量、成活率显著增加。赵娜等[14]在科宝（Cobb）肉鸡上的试验也显示，与饲喂无抗日粮的对照组相比，饲粮添加凝结芽孢杆菌显著提高了21～42 日龄肉鸡血清总蛋白和球蛋白含量以及肉鸡的成活率。以上研究表明，凝结芽孢杆菌与抗生素联合使用具有改善育成鸡饲料蛋白利用率及机体免疫的作用。

血液中谷丙转氨酶、谷草转氨酶来源于肉鸡肝脏细胞分泌，可反映肝脏的营养代谢功能，是肉鸡营养物质代谢利用的重要指标[12,14]。本结果显示，试验组肉鸡血清谷丙转氨酶活性比对照组提高23.8%，这与试验组肉鸡血清较高的总蛋白、球蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量的结果相符。赵娜等[14]在Cobb 肉鸡上试验显示，与无抗日粮对照组相比，凝结芽孢杆菌组肉鸡血清谷丙转氨酶活性显著升高。Qing 等[12]研究也显示，与无抗日粮对照组相比，约翰逊乳杆菌组肉鸡血清谷丙转氨酶活性升高3.8%，但差异不显著。以上结果表明，饲用益生菌可在一定范围内升高血清谷丙转氨酶活性，反映出肉鸡增强了对摄入营养物质的代谢利用。

3.3 凝结芽孢杆菌与阿维拉霉素组合对肉鸡免疫器官的影响 胸腺、法氏囊和脾脏是家禽重要的免疫器官[15]，其器官指数（器官重量/体重）的适当提高与机体良好的免疫水平及健康状况呈正相关[4]。本试验结果显示，与饲喂无抗日粮的对照组相比，添加3×106CFU/g 凝结芽孢杆菌对42 日龄育成鸡的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数均无显著差异。宫秀燕等[15]报道，试验组添加0.4×106CFU/g 低剂量的饲用凝结芽孢杆菌，与饲喂无抗日粮的对照组Cobb 肉鸡相比，35 日龄的脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数均无显著差异。然而，AIKhalaifa 等[4]研究显示，与饲喂无抗日粮的对照组相比，添加2×107CFU/g 高剂量凝结芽孢杆菌的35 日龄Cobb肉鸡的脾脏指数和法氏囊指数仍然差异不显著，但试验组肉鸡胸腺指数显著提高。试验鸡品种和检测日龄差异、对照组是否使用抗生素、凝结芽孢杆菌剂量显著不同可能是影响凝结芽孢杆菌对肉鸡免疫器官发育与功能的主要因素。这进一步提示，凝结芽孢杆菌改善肉鸡机体免疫功能可能也存在剂量依赖性，适当增加饲粮中凝结芽孢杆菌有利于增强肉鸡机体免疫功能。

4 结 论

本试验结果表明，饲粮补充3×106CFU/g 凝结芽孢杆菌对21～42 日龄育成期肉鸡的腹泻率与饲料转化效率有改善作用。