视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的表达

闫春妮 黄磊 宋晓瑾 程丽娜

随着显微手术器械的改进和手术技术的提高，玻璃体切除硅油填充术已经成为眼科拯救患者视力不可缺少的重要手术之一[1]。视网膜脱离术在临床上的广泛应用使得眼内硅油填充引起的并发症也逐渐引起人们的重视。硅油填充术后常见的并发症有白内障、继发性青光眼、角膜变性、视神经视网膜变性等。继发性青光眼是视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后最常见的并发症之一[2]。术后并发青光眼可损害视神经而影响视觉功能，如不及时治疗可能发生永久性视功能损伤，因此受到人们广泛的关注。白细胞介素-2(interleukin-2，IL-2)和白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)是常见的炎性因子，单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)是一种疼痛相关的炎症趋化因子，有较多研究报道IL-2、IL-6、MCP-1与多种眼部疾病有关[3-4]。本研究通过检测视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平，并分析其对术后继发青光眼的预测价值。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 一般资料选择本院2015年6月至2016年12月收治视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼患者24例为继发青光眼组，其中男11例、女13例，年龄30～68(59.47±11.52)岁；选取同期视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后眼压正常行硅油取出术患者50例为对照组，男26例、女24例，年龄28～70(61.28±10.84)岁。2组患者性别、年龄等一般资料具有可比性(均为P>0.05)。

1.1.2 纳入及排除标准纳入标准：(1)视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术均为原发性孔源性视网膜脱离患者；(2)继发青光眼患者术后眼压≥24 mmHg(1 kPa=7.5 mmHg)，同时术后眼压超过术前10 mmHg及以上，且眼压持续升高6周以上；(3)继发青光眼患者随访排除原发性青光眼，眼底情况稳定；(4)患者及家属知情同意并自愿签署知情同意书。排除标准：(1)术前行系统性眼部检查，出现原发性青光眼、葡萄膜炎等免疫相关性眼病患者；(2)术后应用糖皮质激素大于2周者；(3)术后前房出血或外伤患者；(4)患有肝、脑、肾等基础器官严重疾病者；(5)糖尿病及全身炎症性疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 样本采集患者行硅油取出术，常规消毒铺无菌巾，行球后神经阻滞麻醉，开睑器开睑，生理盐水冲洗结膜囊，用1 mL一次性注射器在角膜缘内0.5～1.0 mm处刺入前房分别抽取0.1～0.2 mL未稀释房水，置于0.5 mL密封无菌离心管中并编号，-80 ℃保存备用。

1.2.2 房水中IL-2、IL-6和MCP-1水平检测患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平检测采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，试剂盒购自Abcam公司，按照酶联免疫吸附试剂盒说明书进行点样，每孔5 μL，37 ℃孵育20 min，在酶标仪上机检测各样本对应吸光度值。绘制吸光度值——标准品浓度曲线，将样本吸光度值带入曲线，计算房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平。

2 结果

2.1 2组患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的水平比较继发青光眼组患者房水中IL-2、IL-6和MCP-1水平均显著高于对照组患者(均为P<0.05)。见表1。

组别nIL-2/μg·L-1IL-6/ng·L-1MCP-1/μg·L-1对照组500.19±0.0310.49±2.323.07±0.44继发青光眼组240.28±0.0418.21±2.173.96±0.46t值10.81213.6768.027P值0.0000.0000.000

2.2 继发青光眼组患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的相关性分析继发青光眼组患者房水中IL-2与IL-6水平呈正相关(r=0.616，P=0.000)，IL-2与MCP-1水平呈正相关(r=0.594，P=0.000)，IL-6与MCP-1水平呈正相关(r=0.608，P=0.000)。见图1。

2.3 房水中IL-2、IL-6、MCP-1对继发青光眼预测价值分析ROC曲线分析显示，房水中IL-2预测视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼ROC曲线下面积(area under curve，AUC)为0.845(95%CI：0.732～0.958)，约登指数为0.650，截断值为0.23 μg·L-1，敏感度为75.0%，特异度为90.0%；房水中IL-6预测术后继发青光眼AUC为0.896(95%CI：0.820～0.972)，约登指数为0.668，截断值为13.96 ng·L-1，敏感度为70.8%，特异度为95.9%；房水中MCP-1预测术后继发青光眼AUC为0.872(95%CI：0.786～0.958)，约登指数为0.675，截断值为3.54 μg·L-1，敏感度为87.5%，特异度为80.0%。见图2。

2.4 房水中IL-2、IL-6、MCP-1联合检测对继发青光眼预测价值分析ROC曲线分析显示，房水中IL-2、IL-6、MCP-1联合检测继发青光眼的AUC为0.978，敏感度为91.7%，特异度为96.0%。见图3。

图1 继发青光眼组患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1的两两相关性分析结果。A：IL-2与IL-6相关性分析结果；B：IL-2与MCP-1相关性分析结果；C：IL-6与 MCP-1 相关性分析结果

图2 房水中IL-2、IL-6、MCP-1对继发青光眼诊断效能分析

3 讨论

玻璃体视网膜手术是治疗视网膜脱离、视网膜静脉阻塞等疾病的重要方法，视网膜脱离患者常需行玻璃体切割术[5]。硅油具有透光性好、屈光指数接近玻璃体、理化性质稳定、对视网膜无急性毒副作用等优点，广泛应用于复杂性视网膜脱离术后的眼内填充材料[6]。对于一些顽固性、复杂性视网膜脱离，玻璃体切割术后需用硅油在玻璃体内进行长久填充，以使视网膜复位，提高手术效果[7]。硅油在眼内长期滞留会干扰眼内血液循环和能量代谢，损害正常眼组织，导致各种并发症，包括继发性青光眼、角膜变性等[8]。Teke等[9]研究结果显示，10%～40%患者在手术治疗后继发性青光眼。可能由于硅油的生物学功能不能完全取代玻璃体，会刺激内部细胞产生有害物质，引起继发性青光眼，甚至对视神经细胞造成严重的永久性伤害[10]。以往研究表明，高眼压与青光眼发生有关，但最近研究发现，视神经受损患者也可出现青光眼，但眼压正常[11]。以上研究提示，青光眼的发生不仅仅是单独眼压高引起，可能还存在一些其他的生物学机制引起青光眼及视神经损伤。术后填充过量硅油、硅油进入前房、瞳孔阻滞、硅油乳化、术后炎症反应等均为可能诱因[12]。然而缺乏视网膜脱离玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼的预测指标，给术后继发青光眼预测带来困难。

图3 房水中IL-2、IL-6、MCP-1联合检测对继发青光眼诊断效能分析

青光眼视神经损伤过程与细胞凋亡密切相关，细胞因子是细胞凋亡的起始因子，IL-2、IL-6和MCP-1等均属于细胞因子重要成员。研究表明，高眼压治疗后，IL-1、IL-2、IFN-c和TNF-α水平显著下降，表明炎症因子与青光眼视神经保护有关[13]。Ohira等[14]研究发现，青光眼患者房水中的IL-6、IL-8和TNF-α水平显著高于未发生青光眼患者，提示房水中IL-6水平与青光眼发病有关。本研究结果显示，视网膜脱离玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼患者房水中IL-2、IL-6水平显著高于对照组患者，与以往研究结果一致[14]，提示IL-2和IL-6可能与继发青光眼有关，Pearson相关性分析显示，IL-2与IL-6呈正相关，表明二者在青光眼发病中可能共同发挥作用，提示检测视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后患者房水中IL-2、IL-6水平可能对继发青光眼有一定的预测价值。本研究利用ROC曲线分析患者房水中IL-2和IL-6水平对视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼的预测价值，结果显示IL-2和IL-6水平对术后继发青光眼有一定的预测筛选价值，提示检测视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后患者房水中IL-2和IL-6水平可为预测继发青光眼发生提供参考，但敏感度较低。

MCP-1可以趋化单核细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞，影响其吞噬作用以及产生抗体[15]。本研究结果显示，视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼患者房水中MCP-1水平显著高于对照组患者，与MCP-1在青光眼患者房水中的水平一致[16]，表明MCP-1水平与青光眼发病有关，提示检测患者房水中MCP-1水平可能对预测患者继发青光眼也有一定预测价值。ROC曲线分析显示MCP-1预测术后继发青光眼AUC为0.872，敏感度为87.5%，特异度为80.0%，表明房水中MCP-1水平对预测患者继发青光眼有一定预测价值，但敏感度不高。Pearson相关性分析显示，MCP-1分别与IL-2和IL-6呈正相关，推测MCP-1可能趋化炎症因子IL-2和IL-6，共同参与视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼的发病过程。已有研究表明生物指标联合检测诊断效能高于单一生物指标的检测效能[17]。ROC曲线分析MCP-1、IL-2、IL-6联合检测对视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼的AUC为0.978，敏感度为91.7%，特异度为96.0%，预测价值显著提高，且高于单一指标的预测价值，表明视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后检测患者房水中 MCP-1、IL-2、IL-6水平对继发青光眼的筛选有重要的参考价值。

综上所述，视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼患者房水中IL-2、IL-6、MCP-1水平升高，三者联合检测对术后继发青光眼的预测有参考价值。但IL-2、IL-6、MCP-1在视网膜脱离行玻璃体切除硅油填充术后继发青光眼中的具体机制有待进一步研究。