牛支原体病的诊治与预防*

齐彪，李颖，张晓利,刘志勇，项爱丽

（1.唐山市畜牧兽医研究所 河北唐山 063004；2.唐山市食品药品综合检验检测中心 河北唐山 063006）

牛支原体病是由牛支原体（M. bovis）引起的一种牛的常见疾病，该病在牛场中普遍存在。美国人Hale 于1961 年从患有乳腺炎病牛的牛乳中分离到牛支原体。牛支原体病在欧洲、亚洲、美洲等地均普遍存在。欧洲犊牛肺炎中有30%左右是由牛支原体引起的，美国部分牛场由牛支原体引发的牛呼吸系统疾病和乳腺疾病接近70%，英国牛呼吸道疾病中近四分之一是由支原体引发。我国于2008 年在患坏死性肺炎肉牛中首次分离到牛支原体，并引起广泛关注。目前我国多个省份均有牛支原体病报道，对我国养牛业健康发展造成严重危害。

1 病原特征

牛支原体无细胞壁，可在无细胞活性的培养基中自行繁殖，显微镜下通常呈球形、丝状或杆状、螺旋体、颗粒状，基因结构为双股DNA。牛支原体基因组较小，最适培养pH 值为7.9±0.1，其对培养基中营养物质要求较高，需要加入血清等营养物质，为其提供生长必需的脂肪酸和胆固醇等营养物质。牛支原体在固体或液体培养基中生长均较慢，通常在5%CO2环境中培养5～7d，可形成较小菌落，呈“油煎蛋”样，边缘整齐圆滑，四周较薄、中央较厚，瑞氏染色呈淡紫色，吉姆萨染色呈蓝色。牛支原体对环境抵抗力较弱，在高温或普通消毒剂作用下可迅速灭活。在冷藏牛乳中可存活两个月以上，在-20℃冷冻条件下可存活半年以上，但在70℃ 1min 或65℃ 2min 作用下可失去活性。

2 流行病学

不同日龄、品种的牛均可感染牛支原体，肉牛和奶牛易感，2～6月龄犊牛更容易感染，且死亡率较高，成年牛一般呈阴性感染，临床表现不明显。患病牛可通过呼吸道、乳汁、尿液等传播疾病，感染途径主要为呼吸道。长途运输、饲养环境的改变可诱发该病，由于牛支原体病可导致免疫抑制，从而引起继发感染，造成较大经济损失。

3 临床症状

牛支原体病是由牛支原体引起的重要疾病，可引起牛肺炎、乳腺炎、关节炎、中耳炎、眼结膜炎等多种疾病。

3.1 肺炎

病牛表现为食欲减退、体温升高、体形消瘦、被毛杂乱、呼吸困难，伴有咳嗽，患病初期鼻腔部流鼻涕，后期转为黏性或脓性鼻液[1]。病变主要集中在胸腔肺部，以坏死性肺炎为特征，肺部形成白色结节，可见干酪样坏死灶，胸腔下有浅绿色胶冻样物浸润，支气管、肺泡周围有大量白细胞聚集。

3.2 中耳炎

病牛生产缓慢，耳朵左右摇晃，站立不稳，摩擦栏杆，严重时从耳道流出脓性分泌物。

3.3 关节炎

临床表现为跪地不起，关节肿胀，不愿走动，关节软组织出现干酪样坏死。

3.4 结膜炎

眼角有大量分泌物，结膜潮红，视力严重受损。

3.5 乳腺炎

乳房肿胀发热，内有块状物，乳汁呈水样，后期含有絮状物，

4 诊断

4.1 细菌学诊断

采集患病牛肺组织等病料，无菌条件下接种PPLO 固体培养基，在37℃、5%CO2环境中培养2～3d，在低倍光学显微镜下观察菌落呈“煎蛋样”形态，PPLO 培养基由红色变成黄色浑浊样，再结合生化试验可进行初步诊断。

4.2 分子生物学检测

通常采用聚合酶链式反应（PCR）进行检测，该方法简便、高效、特异性强。早期我国对M. bovis 进行分析研究，发现M. bovis 和M. agalactiae（无乳支原体）均含有p81 蛋白，我国部分学者根据P81 基因引物建立了PCR方法[2]，为国内首次建立的牛支原体PCR 高效、快速检测方法。随着PCR 技术的发展，荧光定量PCR 和环介导等温扩增技术（LAMP）逐步成熟应用到牛支原体检测中，大大缩短检测时间，便捷高效，且成本低。

4.3 血清学检测

该方法针对血清中牛支原体抗体进行检测分析，可有效区分感染牛和免疫牛[3]。常用检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、间接血凝试验（HA）、胶体金层析试验等。

5 防控措施

1）加强饲养管理。牛舍保持干燥卫生，及时清理污水粪便，牛舍通风，养殖密度适宜，合理搭配饲料，定期到运动场活动。

2）做好检疫。新购进牛时，做好检疫工作，防止引进带菌牛，混群前进行隔离饲养，确认无问题后再混养。定期对牛舍进行消毒，消除病原生存环境。

3）及时处置发病牛。发现患病牛后，立即隔离饲养，消毒饲养环境，按照轮换用药和交叉用药原则，使用恩诺沙星、大观霉素等抗生素进行治疗，防止发生继发感染和产生耐药性。

6 结语

牛支原体病是牛的一种重要疾病，给养牛业造成巨大危害。该病的致病机理尚未研究清楚，无有效商业化疫苗，因此应坚持预防为主的方针，采用高效便捷的检测方法和有效措施进行防控。