姜 明 刘思格 周思宇 杨 睿
(牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江157012)
菌糠是以木屑、稻草、秸秆等为原料,培养食用菌后剩下的固体培养基,是食用菌的菌丝残余及其代谢产物[1]。随着食用菌产业的发展,食用菌栽培后产生了大量的菌糠,我国绝大多数的菌糠被废弃或者被就地燃烧,这样既浪费了大量资源又污染了环境。菌糠里含有多种营养物质,比如氨基酸、大量元素、微量元素、木质素、纤维素、菌体多糖、维生素和粗蛋白等[2],若将废弃的菌糠再次利用,既可以为食用菌生产提供一条降低成本提高效益的新途径,又可以减少环境污染,是一举两得的良好举措[3,4]。笔者在植物组织培养基中添加一定比例灵芝菌糠提取液,用以培养白菜、油菜和黄豆,探究其对这三种作物生长的影响,以期为食用菌菌糠的再次利用及植物组织培养基的优化提供一定的理论依据。
供试菌糠:采用的菌糠为牡丹江师范学院所提供的灵芝菌糠,从中挑选菌丝白密、料块结实的菌糠块,切除霉变和腐烂的部分,然后将其晒干,压碎备用。灵芝培养料原始配方:木屑78%,麸皮20%,蔗糖1%,石膏1%。
1.2.1 试验培养基的制备
将灵芝菌糠提取液按0%、5%、10%、15%、20%、25%、30%比例加入到MS培养基中,配制成含不同浓度灵芝菌糠液的培养基用来培养白菜、油菜和黄豆三种作物。以10%灵芝菌糠液培养基为例,称取MS培养基粉末42.74g,加入100mL灵芝菌糠水提液,用蒸馏水定容至1000mL,调节pH至5.8,高压蒸汽灭菌121℃,20min。
1.2.2 接种与培养
无菌操作,用0.1%升汞溶液对植物种子消毒后,无菌水冲洗3~5次,每次1min,最后一次冲洗倒入无菌培养皿中,吸干水分备用。升汞消毒过程中,应不断摇动消毒缸使消毒液充分与种子接触,不同种子消毒时间根据种子的种皮厚度决定,黄豆约为6min,白菜和油菜约为4min。接种时,用镊子将种子接种到培养基上,每瓶接种后,将瓶口和瓶盖放在酒精灯外焰上转动,起到杀菌作用。每接种完一个处理将镊子用酒精棉擦拭后放在酒精灯外焰上灼烧,待充分冷却后方可再使用。在每种处理对应的组培瓶中培养基上接种5粒种子,每种处理做十瓶平行样,接种完毕,将组培瓶放在植物组织培养室内21℃培养观察。
1.2.3 植物生长指标测定
培养15d时,各组培瓶中植株已经长满瓶,故培取出组培瓶中全部植株,测量株高、根长、叶片宽度,计算生长速度。采用直尺测量株高、根长,采用电子天平称重法称其鲜重。生长速度为株高与生长天数的比值。
1.2.4 数据处理
采用MicrosoftExcel2010软件对试验所得出并记录的全部数据进行统计分析,然后用IBMSPSS 22.0统计软件进行分析处理,各组数据比较采用单因素方差分析,显著性水平为0.05。
对添加不同比例菌糠液培养基上生长白菜的测定结果见表1。
由表1可知,添加灵芝菌糠液对白菜的平均根长、株高和叶片宽度影响显著,但对平均生长速度没有明显的影响,添加5%~25%的灵芝菌糠液对白菜的根长、株高、叶片宽度有促进作用,添加5%灵芝菌糠液时白菜的平均生长速度最快,叶片宽度最大,添加5%的灵芝菌糠液最适合白菜生长。
对添加不同比例菌糠液培养基上生长油菜苗的测定结果见表2。
由表2可知,加入灵芝菌糠提取液对油菜苗的平均根长、株高、叶片宽度和平均生长速度均有促进作用,当向培养基中添加15%的灵芝菌糠提取液时,最适合油菜苗生长。
对供试培养基上生长黄豆苗测定结果见表3。
表1 灵芝菌糠提取液对白菜生长的影响
表2 灵芝菌糠提取液对油菜苗生长的影响
表3 灵芝菌糠提取液对黄豆苗生长的影响
由表3可知,加入灵芝菌糠提取液对黄豆苗平均根长、生长速度影响显著,但对黄豆的子叶宽和株高影响不显著,当加入5%浓度的灵芝菌糠提取液时最适合黄豆苗生长。
菌糠中含有纤维素、木质素及作物生长所必需的大量元素、微量元素等营养物质[5-6]。菌糠所含有的物质会对作物的生长产生一定的影响,朱小平[7]研究发现菌糠复合剂可以促进小白菜生长、提高产量,提高土壤含水量及土壤养分,能改善土壤的养分状况,降低土壤pH,利于豌豆生长,开花结荚、提高产量。王根茂[8]试验表明,添加菌糠提取液对某些植物也可能有抑制作用,其原因是菌糠中的一些理化成分可能对植物有不利作用。笔者试验发现,添加灵芝菌糠液对白菜、油菜和黄豆苗生长具有一定影响,当添加灵芝菌糠提取液浓度为5%时,对白菜和黄豆的促进效果最明显,而添加灵芝菌糠提取液浓度为15%时,对油菜苗生长的促进效果最明显。试验结果表明低浓度的灵芝菌糠液对供试植物生长有促进作用,其具体的作用机理还有待于进一步研究。