一例水貂感染犬瘟热病毒的诊治*

王建军，王玉茂**

(山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州256600)

犬瘟热（canine distemper，CD）是由犬瘟热病毒（canine distemper virus，CDV）引起的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]，CDV 感染的宿主范围非常广泛，除食肉目的8 个科动物均易感外，其还感染偶蹄目猪科灵长目猕猴属内多种动物[2]，近年来随着我国毛皮动物养殖业的快速发展，水貂感染CDV 常有发生，CDV已成为威胁我国水貂养殖业的头号传染病，严重降低了我国水貂养殖业的经济效益，严重危害我国水貂养殖业甚至毛皮动物养殖业的健康发展。2018 年7 月，某水貂场饲养的幼貂率先发生了一种以体温升高、食欲减退、死亡前抽搐、口吐白沫为主要特征的疑似CDV 感染疫情，现将整个诊断和治疗过程汇报如下。

1 发病情况

该水貂场共饲养水貂3，000 余只，2018 年7 月初，陆续有幼貂开始发病，发病水貂主要表现为体温升高、食欲减退、死亡前抽搐、口吐白沫，曾经使用抗生素进行治疗，但临床症状不但未见好转且逐步严重。

2 临床症状

发病水貂体温升高至41 ℃左右，进食减少甚至无进食，精神沉郁，鼻镜干燥，鼻部黏着豆腐渣样的干燥物，眼部具有脓性眼眵，被毛蓬乱，无光泽，病初粪便呈蛋清样，后期粪便呈黑色煤焦油样，一般水貂在出现症状后3～5d 内死亡，死亡前期可见病貂运动失调，肌肉震颤，抽搐，口吐白沫，上吐下泻，口咬笼网并发出刺耳的怪叫声。

3 剖检病变

对病死水貂进行解剖，可见内脏器官广泛性出血，肺脏出血、肺泡塌陷，肝脏肿大、质脆、表面有出血斑，脾脏肿大、坏死、具有出血点，肠道呈出血性炎症，肠粘膜脱落，喉头和气管环出血、充血。

4 实验室诊断

根据发病情况、临床症状和剖检病变特征初步诊断怀疑为CDV 感染，无菌采集病死水貂的肺脏、肝脏、脾脏等病变组织进行实验室PCR 检测。根据于红鸽等[3]建立的水貂犬瘟热病毒RT-PCR检测方法设计合成1 对CDV 特异性检测引物，该对引物可特异性扩增片段大小为287 bp 的CDV 3N 蛋白基因。将采集的病料样品加入3 倍体积灭菌生理盐水中，利用匀浆机以1，000 rpm 捣碎1 min，取混悬液以12，000 rpm 离心5 min，吸取上清液。利用病毒基因组RNA 提取试剂盒（购自北京百泰克生物科技有限公司）提取病料上清液的基因组RNA。利用合成的CDV 特异性检测引物对基因组RNA 进行一步法RT-PCR 扩增。一步法RT-PCR 反应体系为：2×Buffer 12.5 μL、上下游引物各0.5 μL、酶0.5 μL、RNA 5 μL、补水至25 μL。一步RT-PCR 反应程序为：50 ℃30 min；95℃5 min；95 ℃30 s，51 ℃30 s，72 ℃30 s，30 个循环；72 ℃8 min。RT-PCR 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测显示，扩增产物在大小约为287 bp 处具有一条特异性条带，与预期扩增的片段大小完全一致，表明临床病料样品经CDV 特异性检测为阳性。根据该水貂场的临床发病特征以及实验室PCR 检测结果，综合判定发病水貂感染了CDV。

5 治疗措施

致病原确定为CDV 后，立即对病死水貂及其污染物进行无害化处理；对发病水貂隔离饲养；利用戊二醛消毒液对水貂及饲养环境进行彻底喷雾消毒；发病水貂立即注射CDV 单克隆抗体，注射剂量为2 mL/kg·bw，连续注射3d；对发病水貂静脉注射白介素营养液（含5%葡萄糖），注射剂量为3 mL/kg·bw，连续注射7d；对未发病水貂紧急免疫接种二倍剂量的CDV 疫苗；对全场水貂大群投喂黄芪多糖，提高全场水貂的免疫力和抗病力；对全场水貂注射硫酸庆大霉素，防止发生继发感染。经过采取上述综合性治疗措施，水貂死亡数量急剧下降，症状较轻的发病水貂逐渐好转，更重要的是没有新发病例，三天后无死亡水貂出现，一周后水貂基本全部恢复健康，此次疫情最终得到了有效控制。

6 讨论

近几年，随着人们生活质量和消费观念的逐步提高以及我国政府对特种经济动物养殖优惠政策的不断落地，我国毛皮动物养殖业得到了前所未有的快速发展，水貂的养殖规模与养殖密度稳定增长，但随之而来的传染病流行发生率亦随之提高，素有"毁灭性传染病"之称的水貂犬瘟热病毒的感染亦不断增加。虽然我国大多数水貂养殖场均将水貂犬瘟热列为主要疫病进行了疫苗免疫接种，但受到病毒潜伏期、水貂体况、免疫耐受、疫苗质量、免疫程序等方面的限制，水貂犬瘟热疫苗的免疫接种常常出现免疫失败[4]。本病例中，虽然该养殖场的种水貂已免疫接种过水貂犬瘟热疫苗，但在幼貂母源抗体水平逐渐下降的时间点，未能及时对其进行疫苗的再次免疫接种，属于免疫程序不合理导致了以往犬瘟热疫苗的免疫失败，最终导致了此次犬瘟热疫病的爆发。根据当前我国疫病防控能力，疫苗免疫接种仍是控制犬瘟热等烈性传染病的重要法宝，故对于水貂犬瘟热的综合防控应该采取以加强生物安全和疫苗免疫接种为主的防控措施，同时加强母源抗体和疫苗免疫抗体的监测，科学合理的调整免疫程序，确保疫苗的免疫效果，避免免疫失败。█