PPZ与5-FU对胃癌细胞生长、自我更新能力的影响及相互作用

冯水土 冯丽华 任芳

摘要：目的  探讨泮托拉唑（PPZ）、5-氟尿嘧啶（5-FU）在调控胃癌细胞及胃癌干细胞生长、自我更新能力中的影响及其相互作用。方法  将SGC-7901和HGC-27细胞分为3组实验：5-Fu处理组、PPZ处理组和5-Fu+PPZ組。通过细胞成球实验检测PPZ加药前后胃癌细胞系（SGC7901、HGC-27）中胃癌细胞及胃癌干细胞自我更新能力的变化，观察PPZ对胃癌细胞系成球能力干扰情况;MTT法检测PPZ、5-FU对胃癌细胞及胃癌干细胞增殖能力的影响，观察PPZ对5-FU药物敏感性的调节作用。结果  PPZ加入后胃癌细胞系（SGC7901、HGC-27）和胃癌干细胞系（SGC7901-SP、 HGC-27-SP）自我更新率比PPZ加入前的自我更新率下降（P<0.01）;PPZ、5-FU对胃癌细胞（SGC7901、HGC-27）增殖均有抑制作用，而5-Fu+PPZ联合组抑制最为明显，抑制增殖的作用在24 h开始出现，96 h最低，均低于0 h。PPZ对胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）增殖均有抑制作用，在48 h逐渐明显;加入PPZ后，胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）两个细胞系酶标仪检测到的吸光值在48 h、72 h、96 h时均下降。72 h和96 h时，加与不加PPZ的吸光值比较，统计学意义显著（P<0.01）。不同浓度（0～50 μg/ml）5-FU对胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）增殖抑制的差异不显著;而加入PPZ 100 μg/ml后，随着5-FU浓度的增加增殖抑制作用逐渐增强，在40～50 μg/ml浓度的5-FU对胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）增殖抑制更加明显;加入PPZ 后，40 μg/ml及50 μg/ml浓度的5-FU作用下胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）酶标仪检测到的吸光值均降低。结论  PPZ能有效抑制胃癌细胞及胃癌干细胞的自我更新能力，抑制其增殖，并可提高其对5-FU的化疗敏感性。PPZ有望成为逆转胃癌耐药的一类联合治疗药物应用于临床。

关键词：胃癌;PPIs;5-FU;肿瘤成球能力;自我更新

中图分类号：R735.2                                 文献标识码：A                                 DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.21.020

文章编号：1006-1959（2019）21-0061-05

Abstract：Objective  To investigate the effects of pantoprazole （PPZ） and 5-fluorouracil （5-FU） on the growth and self-renewal of gastric cancer cells and gastric cancer stem cells. Methods SGC-7901 and HGC-27 cells were divided into three groups of experiments： 5-Fu treatment group， PPZ treatment group and 5-Fu combined with PPZ treatment group. The changes of self-renewal ability of gastric cancer cells and gastric cancer stem cells in gastric cancer cell lines （SGC7901， HGC-27） before and after PPZ dosing were detected by cell globule assay. The interference of PPZ on the ability of gastric cancer cell line to form a ball was observed. MTT assay for PPZ， 5-FU effect on the proliferation of gastric cancer cells and gastric cancer stem cells， and to observe the regulation of PPZ on its 5-FU drug sensitivity.Results  The self-renewal rate of gastric cancer cell lines （SGC7901， HGC-27） and gastric cancer stem cell lines （SGC7901-SP， HGC-27-SP） after PPZ addition was lower than that before PPZ（P<0.01）. PPZ and 5-FU inhibited the proliferation of gastric cancer cells （SGC7901， HGC-27）， while the 5-Fu+PPZ combination showed the most obvious inhibition. The inhibition of proliferation began to appear at 24 h， the lowest at 96 h，Both are below 0 h. PPZ inhibited the proliferation of gastric cancer stem cells （SGC7901-SP， HGC-27-SP）， and became obvious at 48 h. After adding PPZ， two cell lines of gastric cancer stem cells （SGC7901-SP， HGC-27-SP） were labeled. The absorbance values detected by the instrument decreased at 48 h， 72 h， and 96 h. At 72 h and 96 h， the absorbance values of the plus and without PPZ were statistically significant （P<0.01）. Different concentrations （0～50 μg/ml） of 5-FU had no significant difference in the inhibition of proliferation of gastric cancer stem cells （SGC7901-SP， HGC-27-SP）， but increased with the concentration of 5-FU after adding PPZ 100μg/ml. The inhibition of proliferation was gradually enhanced， and the proliferation of gastric cancer stem cells （SGC7901-SP， HGC-27-SP） was more obvious in 5-FU （40～50 μg/ml） concentration; 40 μg/ml and 50 μg were added after adding PPZ. At the concentration of 5-FU， the absorbance values of gastric cancer stem cells （SGC7901-SP， HGC-27-SP） were decreased.Conclusion  PPZ can effectively inhibit the self-renewal ability of gastric cancer cells and gastric cancer stem cells， inhibit their proliferation， and improve their chemosensitivity to 5-FU. PPZ is expected to be a combination of a combination of therapeutic drugs for reversing gastric cancer.

Key words：Gastric cancer;PPIs;5-FU;Tumor globular ability;Self-renewal

胃癌（gastric cancer）是常見的恶性消化系统肿瘤，虽然在全世界范围内发病率有所下降，但仍是癌症死亡的第3大原因[1]。晚期胃癌治疗手段及效果有限，在我国年死亡率占恶性肿瘤第2位[2]，5年生存率20%～30%[3，4]。仅有包括5-FU、多柔比星、顺铂等数种化疗药物对胃癌有一定疗效，由于药物抗性的发生，治疗有效率仅为15%～50%[5，6]。如何降低化疗耐药一直是临床医生关注的问题。研究已证明胃癌细胞上皮间质转化（epithelial mesenchymal transformation，EMT）形成的胃癌干细胞（gastric cancer stem cells，GCSCs） 是其化疗抵抗及形成腹腔转移的重要驱动者[7-10]。研究表明[11-15]，活体当中的胃癌细胞往往处在一个酸性的缺氧微环境中，这有利于癌细胞的增殖、侵袭、抵抗化疗药物等。胃癌细胞内质子外排是肿瘤细胞提升自身在酸性环境下生存力的有力手段[16，17]。通过抑制细胞内质子外排可能是逆转胃癌化疗耐药的方法之一。因而，本研究通过使用质子泵抑制剂（proton pump inhibitors，PPIs）泮托拉唑（pantoprazole，PPZ）来干扰胃癌细胞株及其胃癌干细胞（GCSCs）株的成球能力和增殖能力，探讨PPIs对胃癌细胞株及其胃癌干细胞株自我更新能力的影响。

1材料与方法

1.1主要实验仪器及耗材  CO2细胞培养箱购自Thermo Scientific，生物安全柜购自Heal Force，倒置显微镜购自Motic，低速离心机购自长沙鑫奥，100 mm细胞培养板、96孔超低吸附细胞培养板和6孔超低吸附细胞培养板购于Corning，流式细胞仪购自Beckman CouLter公司，酶标仪购自Thermo。

1.2主要实验试剂  1640培养基和DMEM/F12培养基购自Hyclone，胎牛血清、B27、EGF和FGF购自GIBCO，青链霉素购自MP，胰酶消化液购自Auragene，Insulin和BSA购自索莱宝，Hoechst3342、PI、维拉帕米购自Sigma，MTT 购自上海生工。

1.3干细胞成球培养基（SFM）的配制  母液配置浓度为：EGF 100 ng/ml、FGF 100 ng/ml、BSA 20%、Insulin 1 mg/ml，将DMEM-F12倒入干净的50 ml血清瓶中，分别加入1 ml 50xB27、50xL-Gln、EGF 10 μl、FGF  10 μl、20%浓度的BSA 1 ml、insulin 20μl、Pen/strep 0.5 ml，配制干细胞培养基（浓度为：DMEM/F12 1×、B27 1×、EGF 20 ng/ml、FGF 20 ng/ml、BSA 0.4 %、Insulin 4 μg/ml、L-Gln 1×、Pen/strep 100 U/ml）。

1.4流式侧群分选获取胃癌干细胞  在37℃、5% CO2饱和湿度条件下用完全培养液（1640含10%小牛血清、100 U/ml青霉素及100 U/ml链霉素）培养胃癌细胞（SGC7901、HGC-27），每周换液2～3次，细胞生长至80%后使用0.25%胰蛋白酶消化并传代、计数，用培养基（DMEM/F 12）重悬至1×106 /ml的浓度，分成3组2管，分别用37℃ DMEM/F12洗涤，制成细胞悬液;其中两组均加入荧光染料Hoechst33342，使终浓度为5 μg/ml。另一组作为对照，加维拉帕米 （终浓度50 μmol/L）;室温37℃，避光条件下水浴  90 min后在冰上冷却10 min来终止染色并进行细胞计数;离心后用冰预冷的DMEM/F12洗涤细胞重悬浮，浓度调整至超过1×105/ml;加入PI使终浓度为2 μg/ml后上机。用细胞流式细胞仪（400滤网过滤）检测，分选出干细胞（SP）及非干细胞（NSP）。DMEM/F12收集分选后细胞，流式细胞仪再分析细胞纯度。确定SP 与NSP细胞纯度达80%以上。

1.5细胞成球实验  分别收集胃癌细胞和胃癌干细胞单细胞悬液，接种到超低吸附培养板中，每孔用  2 ml干细胞条件培养基进行培养，将6孔的细胞数调整成一定的梯度（1000个、5000个、10000个、10000个、20000个、20000个）。每天拍照观察肿瘤细胞球生长情况，隔天再加入1 ml培养基，确定最佳培养密度。在细胞培养板中以4×105 个/ml的细胞密度接种，加入2 ml配好的干细胞培养基，在细胞培养箱（37℃、5% CO2）中培养48 h后再收集细胞，用0.05% 的胰酶消化5～10 min后再加1 ml干细胞培养基终止消化，均匀吹打后吸取10 μl的悬液对细胞进行计数，以相同的密度重新接种到另一的超低吸附6孔培养板中。

1.6肿瘤（干）细胞自我更新实验  分别收集胃癌细胞和各组成球细胞，用0.05 %的胰酶消化液消化后在成球培养基中制成单细胞悬液（浓度至1×103 个/ml）备用;取6块96孔超低吸附板（胃癌细胞与胃癌干细胞各3板），每个细胞共180 孔（96 孔板边缘孔加200 μl PBS），取1 μl加入到96 孔超低吸附板（每孔含200 μl干细胞培养基）;显微镜下观察，将多于1个或不含细胞的孔标记排除;每天显微镜下观察，大约6～10 d，记录形成肿瘤个数和大小。结果计算：自我更新率=（克隆数/接种细胞数）×100%。

1.7 MTT检测PPZ和5-FU对胃癌（干）细胞生长的影响

1.7.1 MTT检测PPZ和5-FU对胃癌细胞生长的影响  为确定PPZ是否具有协同5-Fu抑制细胞增殖作用，将SGC-7901和HGC-27细胞分为3组实验：5-Fu处理组、PPZ处理组和5-Fu+PPZ组。在5块96孔板上每孔各加入100 μl制备好的的胃癌细胞（SGC7901、HGC-27）悬液，铺板使待测细胞数量达5×103 个/孔，每组设置5个复孔;在37℃条件下5% CO2培养箱继续培养24 h后取出进行检测。在3块96孔板加药，PPZ处理组加入100 μg/ml PPZ、5-Fu处理组加入20 μg/ml 5-FU、5-Fu+PPZ组同时加入同剂量两种药物。检测时每孔加MTT溶液10 μl，继续培养4 h;用酶标仪检测各孔波长570 nm的吸光值，每隔24 h取出一块96孔板行检测。

1.7.2 MTT检测PPZ和5-FU对胃癌干细胞生长的影响  胃癌细胞（SGC7901、HGC-27）经四代成球分选后得到的干细胞株（SGC7901-SP、HGC-27-SP）在成球培养条件下，加入100 μg/ml PPZ，通过MTT检测其对胃癌干细胞生长的影响：在5块96孔板上每孔各加入100 μl制备好的的胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）悬液，铺板使待测细胞数量达5×103 个/孔，每组设置5个复孔;在37℃条件下5% CO2培养箱继续培养24 h后取出进行检测。在4块96孔板加药，共设置两个分组：一组加入100 μg/ml PPZ;另一组不添加药物。检测时每孔加入MTT溶液10 μl，继续培养4 h;用酶标仪检测各孔的波长570 nm的吸光值。之后每隔24 h取出一块96孔板进行检测。

胃癌细胞（SGC7901、HGC-27）经四代成球分选后得到的干细胞株（SGC7901-SP、HGC-27-SP）在成球培养条件下，加入100 μg/ml PPZ，通过MTT检测各组胃癌干细胞对5-FU的药物敏感性：在2块96孔板上每孔各加100 μl制备好的的胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）悬液，铺板使待测细胞数量达5×103 个/孔，每组设5个复孔;在37℃条件下5% CO2培养箱继续培养24 h后取出96孔板加药，其中一块加100 μg/ml PPZ，另一块不加PPZ。两块板均加不同浓度梯度（0～50 μg/ml）的5-FU，24 h后取出行检测，检测时每孔加MTT溶液10 μl，继续细胞培养箱培养4 h;用酶标仪检测各孔波长     570 nm的吸光值。

1.8统计学方法  采用SPSS 17.0 统计软件进行分析，计量资料以（x±s）表示，两组数据采用两样本独立t 检验，P<0.05表示差异具有统计学意义，P<0.01表示统计学意义显著。

2结果

2.1 PPZ抑制胃癌（干）细胞成球能力  在细胞培养皿中PPZ加入前后两种胃癌细胞系（SGC7901、HGC-27）的成球数和自我更新率均下降，统计学意义显著（P<0.01），见表1。在胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）的实验中，加入PPZ后肿瘤球形成数及自我更新率均下降，统计学意义显著（P<0.01），见表2。

2.2 MTT检测PPZ和5-FU对胃癌细胞生长的影响  PPZ、5-FU对胃癌细胞（SGC7901、HGC-27）增殖均有抑制作用，而5-Fu+PPZ联合组抑制最为明显;PPZ组胃癌细胞（SGC7901、HGC-27）两个细胞系酶标仪检测到的吸光值在48 h时开始出现下降，直到96 h时仍低于0 h;5-FU组在24 h时开始出现下降直到96 h时，最低为96 h，均低于0 h;5-Fu+PPZ联合组抑制增殖的作用亦是24 h开始出现，96 h最低，均低于0 h，见表3、表4。

2.3 MTT检测PPZ对胃癌干细胞生长的影响  PPZ对胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）增殖均有抑制作用，在48 h逐渐明显;加入PPZ后，胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）两个细胞系酶标仪检测到的吸光值在48 h、72 h、96 h时均下降。72 h 和96 h时，加与不加PPZ的吸光值不同，统计学意义显著（P<0.01），见表5、表6。

2.4 MTT检测胃癌干细胞对5-FU的药物敏感性  不同浓度（0～50 μg/ml）5-FU对胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）增殖抑制情况比较，差异无统计学意义（P>0.05）;而加入PPZ 100μg/ml后，随着5-FU浓度的增加增殖抑制作用逐渐增强，在40～50 μg/ml浓度的5-FU对胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）增殖抑制更加明显;加入PPZ 后，在40 μg/ml及50 μg/ml浓度的5-FU作用下胃癌干细胞（SGC7901-SP、HGC-27-SP）酶标仪检测到的吸光值均降低，见表7、表8。

3讨论

随着研究的深入，目前许多学者认为胃癌也是一种干细胞疾病。肿瘤干细胞是存在于肿瘤内部的一小部分细胞，被认为是肿瘤起始、转移和化疗抵抗的源头所在。越来越多的研究表明，胃癌干细胞参与胃癌的发生、发展、转移和治疗耐药性[18-21]。耐药性是目前肿瘤化疗的最大障碍，肿瘤干细胞对化疗药敏感性较低，通过多种机制抵抗药物的攻击。胃癌干细胞不能被传统化疗清除，作为脱落的“种子”，种植到腹腔内导致肿瘤转移进展[22]。在临床治疗中通过一定的方式提高肿瘤干细胞的化疗敏感性，可以提高临床治疗疗效[21]。

肿瘤酸性微环境是化疗抵抗的一个重要机    制[23]，最近研究发现质子泵抑制剂（PPIs）能够提高胃癌细胞的化疗敏感性[16，24]，改变肿瘤微环境的酸度[25]。泮托拉唑（PPZ）是第三代PPIs，不可逆地灭活细胞膜上的H+/K+-ATP酶，抑制胃酸分泌。研究发现，胃癌细胞在PPZ作用后，对5-FU化疗敏感性增加，而微球体形成能力和干細胞标记物CD44、CD24、ABCG2、EpCAM、Lgr5等的表达显著下降，说明PPZ能抑制胃癌肿瘤干细胞，PPZ可能是一种新型的靶向治疗胃癌干细胞的治疗方法[26]。PPZ可明显抑制耐ADR  SGC-7901胃癌细胞株的侵袭及迁移，并可逆转其上皮间质转化[6]。体外裸鼠模型显示，与单用阿霉素相比，PPZ 联合阿霉素治疗胃癌有更高的抗癌作用，且细胞毒作用减低[27]。在临床试验中，一项随机前瞻性研究显示高剂量的PPIs能改进乳腺癌患者化疗疗效，且副反应不明显[28]。骨肉瘤特别是成软骨细胞型患者，使用PPIs后能够增加化疗药物的效果[29]。PPIs增加胃癌细胞化疗药物敏感性的机制可能与其逆转跨膜pH值梯度[27]和下调耐药基因表达[30]。

目前为止，有4种方法可以建立肿瘤干细胞模型：微球体培养、SP分选、流式细胞仪分选和免疫磁珠分选。在本研究中采用SP分选方法获得胃癌干细胞。我们的研究发现加入PPZ后胃癌细胞系SGC7901、HGC-27的自我更新率明显下降，胃癌干细胞系SGC7901-SP、HGC-27-SP的自我更新率也明显下降，差异统计学意义显著（P<0.01）。采用MTT试验法检测到PPZ、5-Fu 对胃癌细胞增殖有抑制作用;加入PPZ其抑制作用在48 h后出现，到96 h仍有一定的抑制作用;加入5-Fu 24 h后抑制增殖出现，在48 ～96 h时它变得显著;5-Fu+PPZ联合处理对胃癌细胞增殖的抑制作用最为明显。PPZ对胃癌干细胞增殖也有抑制作用，抑制作用在48 h后出现，到96 h仍有一定的抑制作用，且能够增加5-FU的化疗敏感性。因此质子泵抑制剂（PPIs）可能成为逆转胃癌肿瘤（干）细胞耐药治疗的一类联合药物。

PPIs抑制胃癌细胞增殖、逆转化疗抵抗性的机制尚不明确。有研究显示PPZ通过STAT3信号通路抑制胃癌细胞系SGC-7901细胞的增殖，恢复其对顺伯化疗的敏感性[30]。Zhang B等[6]的研究发现PPZ可能通过靶向EMT和Akt/GSK-3β/β-catenin信号通路抑制耐阿霉素SGC-7901细胞的侵袭性。本的研究显示PPZ能抑制胃癌（干）細胞的自我更新能力，提高5-FU化疗敏感性，但其潜在的分子机制还需进一步探讨。PPZ可能成为胃癌治疗领域的一项新突破，为胃癌患者治疗带来新的希望。

参考文献：

[1]Ferlay J，Soerjomataram I，Dikshit R，et al.Cancer incidence and mortality worldwide：sources， methods and major patterns in GLOBOCAN 2012[J].Int J Cancer，2015，136（5）：E359-E386.

[2]Chen W，Zheng R，Baade PD，et al.Cancer statistics in China，2015[J].CA Cancer J Clin，2016，66（2）：115-132.

[3]Siegel RL，Miller KD，Jemal A.Cancer statistics，2015[J].CA Cancer J Clin，2015，65（1）：5-29.

[4]左婷婷，郑荣寿，曾红梅，等.中国胃癌流行病学现状[J].中国肿瘤临床，2017，44（1）：52-58.

[5]Wohrer SS，Raderer M，Hejna M.Palliative chemotherapy for advanced gastric cancer[J].Ann Oncol，2004，15（11）：1585-1595.

[6]Zhang B，Yang Y，Shi X，et al.Proton pump inhibitor pantoprazole abrogates adriamycin-resistant gastric cancer cell invasiveness via Suppression of Akt/GSK-beta/beta-catenin signaling and epithelial-mesenchymal transition[J].Cancer Lett，2015，356（2 Pt B）：704-712.

[7]遇珑，舒雄，刘辉琦，等.高转移胃癌细胞株的建立及其肿瘤干细胞的生物学特征[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2016;23（4）：486-491.

[8]Samadani AA，Akhavan-Niaki H.Interaction of sonic hedgehog（SHH）pathway with cancer stem cell genes in gastric cancer[J].Med Oncol，2015，32（3）：48.

[9]Yang L，Ping YF，Yu X，et al.Gastric cancer stem-like cells possess higher capability of invasion and metastasis in association with a mesenchymal transition phenotype[J].Cancer Lett， 2011， 310（1）：46-52.

[10]Mao J，Fan S，Ma W，et al.Roles of Wnt/[beta]-catenin signaling in the gastric cancer stem cells proliferation and salinomycintreatment[J].Cell Death Dis，2014，5（1）：e1039.

[11]Fan SH，Wang YY，Wu ZY，et al.AGPAT9 suppresses cell growth，invasion and metastasis by counteracting acidic tumor microenvironment through KLF4/LASS2/V-ATPase signaling pathway in breast cancer[J].Oncotarget，2015，6（21）：18406-18417.

[12]Morais-Santos F，Granja S，Miranda-Goncalves V，et al.Targeting lactate transport suppresses in vivo breast tumour growth[J].Oncotarget，2015，6（22）：19177-19189.

[13]Song J，Ge Z，Yang X，et al.Hepatic stellate cells activated by acidic tumor microenvironment promote the metastasis of hepatocellular carcinoma via osteopontin[J].Cancer Lett，2015，356（2 Pt B）：713-720.

[14]Federici C，Petrucci F，Caimi S，et al.Exosome release and low pH belong to a framework of resistance of human melanoma cells to cisplatin[J].PLoS One，2014，9（2）：e88193.

[15]Pilon-Thomas S，Kodumudi KN，El-Kenawi AE，et al.Neutralization of tumor acidity improves antitumor responses to immunotherapy[J].Cancer Res，2016，76（6）：1381-1390.

[16]Gu M，Zhang Y，Zhou X，et al.Rabeprazole exhibits antiproliferative effects on human gastric cancer cell lines[J].Oncol Lett，2014，8（4）：1739-1744.

[17]Chen M，Zou X，Luo H，et al.Effects and mechanisms of proton pump inhibitors as a novel chemosensitizer on human gastric adenocarcinoma（SGC7901）cells[J].Cell Biol Int，2009，33（9）： 1008-1019.

[18]Gao G，Sun Z，Wenyong L，et al.A preliminary study of side population cells in human gastric cancer cell line HGC-27[J].Ann Transplant，2015（20）：147-153.

[19]Xu ZY，Tang JN，Xie HX，et al.5-Fluorouracil chemotherapy of gastric cancer generates residual cells with properties of cancer stem cells[J].Int J Biol Sci，2015，11（3）：284-294.

[20]刘小娟，刘复娜，张艳芳，等.慢病毒转染敲低HDAC1表达对胃癌干细胞性增殖、迁移及侵袭的影响及其机制研究[J].疑难病杂志，2018，17（7）：715-718.

[21]何学彦，张超.胃癌干细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性[J].中国组织工程研究，2015，19（41）：6606-6610.

[22]汪贯龙，文刚.胃癌干细胞与腹腔种植转移[J].临床外科杂志，2016，24（8）：641-643.

[23]Taylor S，Spugnini EP，Assaraf YG，et al.Microenvironment acidity as a major determinant of tumor chemoresistance：Proton pump inhibitors（PPIs）as a novel therapeutic approach[J].Drug Resist Updat，2015（23）：69-78.

[24]Azzarito T，Venturi G，Cesolini A.Lansoprazole induces sensitivity to suboptimal doses of paclitaxel in human melanoma[J].Cancer Lett，2015，356（2 Pt B）：697-703.

[25]Bellone M，Calcinotto A，Filipazzi P，et al.The acidity of the tumor microenvironment is a mechanism of immune escape that can be overcome by proton pump inhibitors[J].Oncoimmunology，2013，2（1）：e22058.

[26]Feng S，Zheng Z，Feng L，et al.Proton pump inhibitor pantoprazole inhibits the proliferation， self renewal and chemoresistanceof gastric cancer stem cells via the EMT/β catenin pathways[J].Oncol Rep，2016，36（6）：3207-3214.

[27]Chen M，Huang SL，Zhang XQ，et al.Reversal effects of pantoprazole on multidrug resistance in human gastric adenocarcinoma cells by down-regulating the V-ATPases/mTOR/HIF-1alpha/P-gp and MRP1 signaling pathway in vitro and in vivo[J].J Cell Biochem，2012，113（7）：2474-2487.

[28]Wang BY，Zhang J，Wang JL，et al.Intermittent high dose proton pump inhibitor enhances the antitumor effects of chemotherapy in metastatic breast cancer[J].J Exp Clin Cancer Res， 2015，34（1）：85.

[29]Ferrari S，Perut F，Fagioli F，et al.Proton pump inhibitor chemosensitization in humn osteosarcoma：from the bench to the patients'bed[J].J Transl Med，2013，11（1）：268.

[30]Huang S，Chen M，Ding X，et al.Proton pump inhibitor selectively suppresses proliferation and restores the chemosensitivity of gastric cancer cells by inhibiting STAT3 signaling pathway[J].Int Immunopharmacol，2013，17（3）：585-592.

收稿日期：2019-7-22;修回日期：2019-8-2

編辑/肖婷婷