粪菌移植对雏鸡生长性能、血清白痢阳性率和屠宰性能的影响

黄金华， 粟永春， 宁国信， 李泰佑， 黄 超， 邓佳辉， 路景荃， 黎应恒

（1.广西农业职业技术学院，广西南宁530007；2. 广西金陵农牧集团有限公司，广西南宁530049；3.广西壮族自治区粮油食品屯里猪场，广西南宁530024；4.武鸣县旺宁养殖场，广西南宁530100；5.广西东盟经济开发区管委会城市和农林水利管理局，广西南宁530105）

鸡白痢是一种流行性传染病，2 ～3 周龄以内雏鸡极容易感染沙门氏菌而发病。 雏鸡感染后常呈急性败血症，临床表现为：精神委顿、怕冷拥挤、食欲减少、腹泻，排出稀薄白色糨糊状粪便，有的出现眼盲或者关节肿胀、跛行，发病率和死亡率都非常高；耐过鸡生长发育不良，成为该病主要传播者之一（林建坤等，2014）。目前对雏鸡白痢往往采用广谱抗生素预防， 但是容易产生耐药性（秦娜等，2018），同时会导致正常菌群不能很好地定植，雏鸡肠道菌群结构和功能受到严重影响， 生长发育受阻（李运喜等，2015；Choi 等，2015），雏鸡免疫水平低下， 鸡白痢等由沙门氏菌引起的疾病反而容易发生，同时存在药物残留隐患。 因此，寻找合适的抗生素替代品防治雏鸡白痢已经成为目前肉鸡养殖业的重要课题。

动物健康与动物胃肠道微生态平衡密切相关。 研究表明， 采用粪菌移植技术可以降低新生仔猪和断奶仔猪下痢率，促进仔猪生长发育（黄金华 等，2018a、2018b； 耿 世 杰 等，2018；Hu 等，2017）。 宋冰（2017）研究发现，将野兔盲肠菌液移植给健康伊拉肉兔，能够提高家兔的纤维消化率，改善家兔盲肠微生态和免疫性能， 促进家兔的消化代谢。 朱见深等（2018）报道，通过SPF 鸡粪菌移植雏鸡，能安全地从源头降低肠道菌群抗药性，抵抗家禽养殖环境中高抗药性病原菌的侵害。 李运喜等（2015）研究发现，SPF 鸡粪菌移植与发酵床养殖模式下肉鸡生产性能和发育性能均高于传统普通地面平养模式， 大肠杆菌抗药性有降低趋势。上述研究表明，肠道菌群在宿主健康中发挥着重要作用， 采用粪菌移植技术尽快建立或恢复畜禽动物肠道微生态平衡， 将是一种相对安全有效的非抗生素药物手段， 在畜牧业中有着巨大的应用潜能（李晓蕾等，2018）。 因此，本试验在采用粪菌移植技术防治仔猪下痢取得一定研究成果及预试验的基础之上（黄金华等，2018a、2018b），选择健康的种母鸡的粪便制作粪菌液， 研究其对雏鸡生长性能、血清白痢阳性率、成活率和屠宰性能的影响， 探索采用粪菌移植技术预防雏鸡白痢的可行性，旨在为现代健康养鸡业提供新思路。

1 试验材料与方法

1.1 鸡粪收集 在广西金陵农牧集团有限公司种鸡基地选取产蛋高峰期健康母鸡， 并经血清鸡白痢检测为阴性的鸡。在鸡排粪前，试验人员手拿内套干净无污染的自封口样品袋的塑料瓶， 让鸡粪直接落入样品袋中（掉在地上的粪便不采集），对收集到的粪便进行沙门氏菌、 寄生虫和病毒检测，无沙门氏菌、寄生虫和病毒的鸡粪于4 ℃冰箱密封保存， 用于制备粪菌液 （黄金华等，2018a、2018b）。

1.2 粪菌液的制备工艺 采集健康的、血清鸡白痢阴性的种母鸡粪便100 g，置于500 mL 的量筒中，加入无菌生理盐水至500 mL 的刻度，然后倒入搅拌器搅拌均匀，得到粪便浆体，将粪便浆体经2.0 mm 的不锈钢滤网过滤除去其中的大颗粒物质，再经0.25 mm 的不锈钢滤网过滤3 次，即获得新鲜粪菌液，于4 ℃冰箱密封保存待用（黄金华等，2018a、2018b）。

1.3 试验设计 选用972 羽健康、 体重相近的1日龄广西金陵麻鸡雏鸡（由广西金陵农牧集团有限公司提供），随机分为6 组，每组9 个重复，每个重复18 羽，笼养，一个重复一笼。对照组饲喂基础饲粮（见表1），试验组分别饲喂在基础饲粮中添加2%、4%、6%、8%、10%粪菌液的日粮10 d，然后改为投喂基础饲料至35 日龄。 研究第1 阶段（1～14 d）、第2 阶段（15 ～35 d）和整个阶段（1 ～35 d）雏鸡的成活率、饲料利用率、生长性能以及35 日龄时雏鸡血清白痢阳性率和屠宰性能。 按照试验场的正常饲养管理规定和免疫程序进行饲养。 鸡自由采食和饮水。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

1.4 测定指标

1.4.1 生长性能 分别于试验第1、14、35 天早晨空腹称重（第35 天时，先采血再称体重），记录雏鸡体重，用于计算平均日增重；正试期每天以重复为单位记录饲粮投喂量， 并于次日清晨投喂前称量剩料量， 根据饲粮投喂量和剩料量计算平均日采食量。 然后根据平均日增重和平均日采食量计算料重比。 统计各个阶段各个重复试验鸡的成活率。

1.4.2 血清白痢阳性率 于试验最后1 d， 在称体重之前， 对各个重复的所有试验鸡采集全血样本，将血样置于塑料离心管内，并记录对应鸡只编号，待血清自然析出后，吸取血清，进行血清平板凝集试验。 具体操作如下：（1）试验前将室温调至并保持在20 ～25 ℃；（2）将抗原（鸡白痢鸡伤寒多价染色抗原， 中国兽医药品监察所生产， 批号S0621708）充分摇匀，用移液枪吸取抗原垂直滴于洁净的玻片上；（3）用移液枪吸取血清置于抗原滴上，用枪头混匀、涂开，使其直径约2 cm，然后不断晃动玻片，注意观察结果；（4）每次试验均应设阴、阳性血清对照，阴、阳性血清对照成立，才能判定结果；（5）血清与抗原充分混合后，在2 min 内出现片状或者明显的凝集颗粒，即判为阳性；不出现明显的凝集现象， 或仅呈现均匀一致的微细颗粒状凝集， 或在液体边缘处由于临干前显絮状等现象，均判为阴性；有别于上述反应，不易判为阴性或阳性反应的，可判为可疑反应，重复试验一次（徐家芳，2013）。

1.4.3 屠宰性能 于试验最后1 d，采血、称体重结束后， 每个重复随机选取体重接近该重复平均体重的鸡1 只，颈动脉放血处死后，去羽毛，之后称量、记录试验鸡屠体重、全净膛重、胸肌重和腿肌重，分别计算屠宰性能指标：屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率。

1.5 统计分析 采用SPSS 17.0 统计软件进行数据统计，结果以“平均数±标准误”表示，P ＜0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 粪菌移植对雏鸡生长性能的影响 从表2可以看出，在平均成活率方面，在1 ～14 d 阶段，各组鸡平均成活率均无显著差异 （P ＞0.05）；在15 ～35 d 阶段，2%粪菌液组鸡的平均成活率最高， 分别较对照组和其他试验组提高了6.20%（P＜0.05）、3.26% （P ＞0.05）、4.61% （P ＞0.05）、7.42%（P ＜0.05）和8.15%（P ＜ 0.05）。 在1 ～35 d 阶段，2%粪菌液组鸡的平均成活率最高， 分别较对照组和其他试验组提高了8.17%（P ＜0.05）、3.93% （P ＞0.05）、6.00% （P ＞0.05）、8.17%（P ＜0.05）和8.91%（P ＜0.05）。

在平均日采食量方面， 在1 ～14 d 阶段，各组鸡平均日采食量均无显著差异 （P ＞0.05）；在15 ～35 d 阶段，添加粪菌液各组鸡的平均日采食量分别较对照组降低了19.03%、39.16%、19.57%、26.50%和22.96%（P ＜0.05）。在1 ～35 d 阶段，添加粪菌液各组鸡的平均日采食量分别较对照组降低了17.83%、31.27%、15.49%、21.12%和17.26%（P ＜0.05）。

在平均日增重方面，在1 ～14 d 阶段，各组鸡平均日增重差异不显著（P ＞0.05）；在15 ～35 d 阶段，2%粪菌液组鸡的平均日增重最高， 分别较对照组和其他试验组提高了68.74%、113.34%、64.93%、106.27%和105.51%（P ＜0.05）。 在1 ～35 d 阶段，2%粪菌液组鸡平均日增重最高， 分别较对照组和其他试验组提高了29.06%、50.05%、28.10%、46.80% 和47.77%（P ＜0.05）。

在料重比方面，在1 ～14 d 阶段，各组鸡料重比差异不显著（P ＞0.05）；在15 ～35 d，2%粪菌液组鸡的料重比最低， 分别较对照组和其他试验组降低了53.70%、33.10%、39.86%、48.07% 和50.28%（P ＜0.05）。在1 ～35 d 阶段，2%粪菌液组鸡的料重比最低， 分别较对照组和其他试验组降低 了 36.44% 、21.05% 、24.24% 、29.91% 和33.04 %（P ＜0.05）。

2.2 粪菌移植对雏鸡血清白痢阳性率的影响从表3 可以看出，在血清白痢阳性率方面，添加粪菌液各组鸡的血清白痢阳性率均显著低于对照组（P ＜0.05）， 其中2%组鸡的血清白痢阳性率最低， 分别较对照组和其他试验组降低了44.14%、32.56%、21.17%、31.23%和24.70%（P ＜0.05）。

2.3 粪菌移植对雏鸡屠宰性能的影响 从表4可以看出，各组之间的屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率均差异不显著（P ＞0.05），但是2%粪菌液组的屠宰率、半净膛率、全净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率最高。

表2 粪菌移植对雏鸡生长性能的影响

表3 粪菌移植对雏鸡血清白痢阳性率的影响%

表4 粪菌移植对雏鸡屠宰性能的影响%

3 讨论

3.1 粪菌移植对雏鸡生长性能的影响 本试验结果显示，在1 ～14 d 阶段，添加粪菌并不影响雏鸡的饲料转化率、 生长性能和成活率， 但是在15 ～35 d 和1 ～35 d 阶段， 添加2%粪菌液能显著提高雏鸡的饲料转化率、生长性能和成活率。其原因可能是：与哺乳动物相似，刚孵化出的雏鸡胃肠道内几乎无菌， 鸡的肠道菌群是其出生后与环境接触逐步形成的（Hiett 等，2013），在1 ～14 d阶段，这个阶段正是雏鸡肠道在形态、生化和分子结构等方面发生一系列变化的发育时期（张亚楠，2016），其肠道群落还相当不稳定，外源粪菌对雏鸡的影响还没有在饲料转化率、 生长性能和成活率等方面表现出来；但是随着日龄增加，添加的粪菌在鸡胃肠道中不断繁殖，从而促进鸡肠道发育，增加肠道微生物多样性和丰度， 加速肠道群落正常化和稳态化， 提高生产性能（耿世杰等，2018；Hu 等，2017）。鸡胃肠道内存在一个巨大微生物群落，对鸡的健康生长、营养物质吸收、免疫系统发育具有重要作用（Xiao 等，2017） 。 这是因为鸡肠道菌群含有大量的蛋白质和碳水化合物消化酶，能够帮助宿主消化难以消化的蛋白质和碳水化合物， 为宿主提供能量和具有多种重要生理功能的短链脂肪酸，促进宿主健康生长发育，提高生产性能（王姝妹和卢立志，2017）。 李运喜等（2015）研究发现， 粪菌移植有利于提高雏鸡的生产性能和抗病能力。张亚楠（2016）研究发现，高产鸡肠道菌群维持了肠道内环境的稳态， 低产蛋鸡存在肠道菌群失调；将高产蛋鸡粪菌移植给低产蛋鸡，可促进低产蛋鸡肠道菌群重建， 提高低产蛋鸡产蛋水平。耿世杰等（2018）报道，粪菌移植能够提高哺乳仔猪的生长性能和成活率。这些研究结果表明，粪菌移植是一项有前途的可以应用于提高动物生产性能的技术（Khoruts 和Sadowsky，2016）。

3.2 粪菌移植对雏鸡血清白痢阳性率的影响研究证明， 动物发育早期主要受到环境中细菌的影响，特别是对未成熟免疫系统的影响，环境中的沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌等致病菌容易进入家禽肠道内而致病（王姝妹和卢立志，2017）。本试验结果显示， 添加2%粪菌液可以显著降低雏鸡血清白痢阳性率。研究表明，稳态和健康的肠道菌群可以消化宿主不能消化的蛋白质和碳水化合物，为宿主提供能量和短链脂肪酸（Krajmalnik-Brown等，2012；Mcwhorter 等，2009）。短链脂肪酸中的丁酸及其盐有多重作用，能够给宿主提供能量，保持宿主肠绒毛结构， 减少沙门氏菌在家禽肠道内定植（Van Immerseel 等，2005）。 研究也发现，随着鸡肠道菌群丰度增加， 沙门氏菌等有害菌含量降低（Wei 等，2013）。 本研究表明，添加粪菌可以显著降低雏鸡血清白痢阳性率，其机理可能是：将健康的肠道菌群移植到雏鸡体内， 使雏鸡的肠道菌群迅速繁殖，加快雏鸡肠道菌群多样性并提高丰度，促进肠道黏膜发育， 帮助雏鸡排斥环境中沙门氏菌进入体内（Pan 和Yu，2014）。

3.3 粪菌移植对雏鸡屠宰性能的影响 屠宰性能指标是衡量肉鸡产肉性能的主要参考依据（宋琼莉等，2018）。谢文惠等（2018）研究发现，日粮中添加复合益生菌制剂能够提高肉鸡的屠宰性能，这是因为益生菌能够提高肉鸡自身蛋白质的合成， 在胃肠道通过发酵饲粮和菌体代谢均可产生不同种类的短链脂肪酸， 从而提高肉鸡的屠宰性能。 本试验结果显示，添加2%粪菌液能提高雏鸡屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率、腿肌率。 其机理可能是： 健康种鸡的粪菌是一种原生态的含有大量益生菌的微生态制剂， 可以分泌大量的蛋白质和碳水化合物消化酶， 能够帮助雏鸡消化难以消化的蛋白质和碳水化合物， 为雏鸡提供能量和具有多种重要生理功能的短链脂肪酸（王姝妹和卢立志，2017），从而促进雏鸡生长发育，提高其屠宰性能。

本试验结果显示， 添加4% ～10%粪菌液的效果不如添加2%粪菌液的效果好， 其原因可能是：刚孵化出的雏鸡胃肠道内几乎无菌，突然接触大量的细菌，雏鸡发生了应激反应，影响到雏鸡正常的生理生化过程， 从而影响雏鸡的生长发育和免疫抗菌能力。 其机理有待进一步探讨。

4 结论

本试验结果表明， 粪菌移植能够显著提高雏鸡的饲料利用效率，促进雏鸡的生长发育，降低雏鸡血清白痢阳性率，提高雏鸡存活率和屠宰性能，其中添加2%粪菌液的效果最好。