HPLC同时测定蒲地蓝消炎片中黄芩苷和(R,S)-告依春的含量

李怀伟　张朋　马海春　马昌豪

【摘 要】目的：建立同时测定蒲地蓝消炎片中黄芩苷和（R，S）-告依春含量的方法。方法：色谱柱为WelchUltimateXB-C18（250mm×4.6mm，5?m），柱温30℃，以甲醇为流动相A，0.05%磷酸为流动相B，采用梯度洗脱，流速1.0mL/min，检测波长280nm（黄芩苷）、245nm（（R，S）-告依春），进样量10?L。结果：黄芩苷和（R，S）-告依春分别在浓度2.79～83.64?g/ml（r=0.9998）、2.05～61.56?g/ml（r=0.9998）的范围内，呈良好线性关系。黄芩苷和（R，S）-告依春平均回收率分别为99.55%和98.60%（n=6）;RSD分别为0.36%和0.77%。结论：该方法操作简便，准确，重复性好，可用于蒲地蓝消炎片的质量控制。

【关键词】高效液相色谱法;蒲地蓝消炎片;黄芩苷;（R，S）-告依春

【中图分类号】R657.7【文献标识码】A【文章编号】1005-0019（2019）22--01

蒲地蓝消炎片由黄芩、蒲公英、苦地丁和板蓝根4味中药组成，具清热解毒，抗炎消肿的功效。临床常用于疖肿、腮腺炎、淋巴腺炎、扁桃体炎等的治疗。药品收载卫生部药品标准中药成方制剂第三册，标准较为简单，无鉴别和含量测定项目;查阅相关文献，多通过薄层色谱或单一成分的含量测定来控制其质量[1-3]。本研究建立了高效液相色谱法同时测蒲地蓝消炎片中黄芩苷和（R，S）-告依春的含量，方法简单、准确，可用于该药品的质量控制。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药 （1）Agilent1260高效液相色谱仪（美国安捷伦）;XS105 DualRange型十万分之一天平（METTLER TOLEDO）。（2） 药品与试剂 甲醇、磷酸（色谱纯）;黄芩苷（中国食品药品检定研究院，批号：110715-201720）;（R，S）-告依春（中国食品药品检定研究院，批号：111753-201706）;蒲地蓝消炎片（市售，批号20181102，20181103，20190402）。

1.2 方法 （1）色谱条件 以甲醇为流动相A，0.05%磷酸为流动相B，梯度洗脱（0～16min，5%A;16～17min，5%→50%A;17～40min，50%A;40～41min，50%→5%A;41～45min，5%A）;流速：1.0mL·min-1柱温：30℃;进样体积10?L，檢测波长280nm（黄芩苷）、245nm（（R，S）-告依春）。（2）混合对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷和（R，S）-告依春各适量，加甲醇制成含黄芩苷0.2788?g/ml、（R，S）-告依春?g/ml的对照品贮备液溶液。将贮备液稀释10倍作为混合对照品溶液。（3）供试品和阴性样品溶液的制备 取本品20片，除去包衣，研细，取约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min（功率250W，频率40kHz），冷却至室温，用甲醇补足失重，滤过，取续滤液，即得。同法制备不含黄芩和板蓝根的阴性样品溶液。

2 结果

2.1 专属性考察结果表明，黄芩苷和（R，S）-告依春分别为黄芩和板蓝根的特有成分，其它成分对测定无干扰。见图1。

2.2 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品贮备液0.10ml、0.30ml、0.50ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml至10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀。进样测定，以峰面积值为纵坐标（y），浓度（?g·mL-1）为横坐标（x）进行线性回归，黄芩苷和（R，S）-告依春回归方程分别为Y=31.2283X-5.2296（r=0.9998）和Y=63.3927+8.8060（r=0.9999）;分别在2.79～83.64?g/ml和2.05～61.56?g/ml范围内呈良好线性关系。

2.3 精密度实验 取混合对照品溶液，连续进样6次，结果黄芩苷和（R，S）-告依春峰面积的RSD分别为0.26%和0.51%（n=6），表明仪器精密度良好。

2.4 重复性实验 取同一批供试品6份，按“1.2”项下（3）方法制备6份供试品溶液，测定含量，黄芩苷和（R，S）-告依春的RSD分别为0.69%和1.02%，表明方法有较好的重复性。

2.5 稳定性实验取 同一供试品溶液，于0，4，8，16，24 h时进样，结果黄芩苷和（R，S）-告依春峰面积的RSD分别为1.15%和0.45%。

2.6 回收率实验 取已知含量的蒲地蓝消炎片1.0g，共6份，分别精密加入等量对照品，按供试品溶液制备方法进行处理，测定回收率，结果黄芩苷和（R，S）-告依春平均回收率分别为99.55%和98.60%;RSD分别为0.36%和0.77%。

2.7 含量测定 取3批样品，按上述色谱条件测定，计算黄芩苷和（R，S）-告依春的含量，结果见表1

3 讨论

黄芩和板蓝根作为蒲地蓝消炎片处方中的两味主药，其含量直接影响蒲地蓝消炎片的功效。本研究采用DAD检测器双波长检测法，同时测定黄芩苷和（R，S）-告依春含量，该方法专属性、稳定性较好，准确度高且方便快捷;能更全面的反映药品的内在质量，可为蒲地蓝消炎片的质量控制提供参考依据。

参考文献

《卫生部药品标准》中药成分制剂第三册，心可宁胶囊[S].1991：187.

吴谋，陈继英，刘仔.蒲地蓝消炎片黄芩苷含量测定研究[J].按摩与康复医学，2013，4（5）：134-136.

李凯，逯海龙.蒲地蓝消炎片质量标准的研究[J].宁夏医科大学学报，2012，34（8）：859-860.